PRODUÇÃO DE SUBSTÂNCIAS ANTIMICROBIANAS POR Acinetobacter baumannii/calcoaceticus e Enterobacter cloacae ISOLADOS DE UTENSÍLIOS DE UM LACTÁRIO Conceição, C. S., Souza, B. V., Araújo, B. C., Nascimento, W. G. R., Vieira, J. M. B. D. & Nascimento, J. S Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Rio de Janeiro (IFRJ RESUMO – A análise microbiológica de fórmulas lácteas infantis (FLI) e de utensílios utilizados em seu preparo oriundos de um lactário hospitalar no Rio de Janeiro revelou a presença de diferentes bactérias Gram-negativas. Alguns dos isolados pertencem a espécies patogênicas que podem causar doenças aos lactentes. Substâncias antimicrobianas (SAM) produzidas por bactérias podem ser capazes de reduzir ou impedir o crescimento de patógenos associados a um mesmo nicho. Neste trabalho, quarenta e oito isolados foram testados quanto à produção de SAM e 31 (64,6%) mostraram atividade inibitória contra pelo menos uma das bactérias utilizadas como indicadoras. Cinco isolados de utensílios, 3 Acinetobacter baumannii/calcoaceticus (JE3, JE6 e JE4) e 2 Enterobacter cloacae (ME1 e BIE1), foram os mais promissores e inibiram patógenos alimentares como Bacillus cereus e Salmonella enterica sorotipo Typhi, além de Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis e P. vulgaris, sugerindo que as SAM produzidas por estes isolados possam ter potencial de aplicação na área de alimentos. PALAVRAS-CHAVE: substâncias antimicrobianas, fórmulas lácteas infantis, lactário. INTRODUÇÃO As fórmulas lácteas infantis (FLI) apesar de constituírem um recurso usado para a alimentação infantil, têm preocupado bastante as organizações de saúde pelo fato de não serem estéreis, o que facilita a contaminação por agentes microbiológicos. Além disso, falhas relacionadas à higienização correta dos utensílios contribuem para a contaminação microbiana (USAI et al., 2013) comprometendo, assim, a segurança das FLI e saúde dos lactentes. Estudos realizados em um lactário hospitalar no Rio de Janeiro detectaram a contaminação de FLI e de utensílios utilizados em seu preparo por diferentes patógenos Gram-negativos (MORAES et al., 2015; ARAÚJO et al., 2015). Muitas destas bactérias são de grande importância devido à produção de diversos fatores de virulência, motivando, assim, pesquisas relacionadas à produção de substâncias antimicrobianas (SAM), que podem ser capazes de reduzir ou impedir o crescimento bacteriano (YANG et al., 2014). Ao contrário dos conservantes e dos antibióticos, a utilização de aditivos com propriedades antimicrobianas tem se tornado uma potente arma na III Congresso Nacional de Alimentos e Nutrição | VI Congresso Nacional de Alimentação e Nutrição Ouro Preto, MG | 27 a 31 de março de 2017 | ISSN 2236-2495 preservação de alimentos. Dentre eles destacam-se as SAM que geralmente são substâncias naturais capazes de retardar ou inibir o crescimento e reprodução dos micro-organismos ou até mesmo causar a sua morte. Atualmente, são descritas SAM produzidas por animais, plantas, insetos e bactérias como, por exemplo, o peróxido de hidrogênio, ácidos orgânicos, antibióticos e bacteriocinas (YANG et al., 2014). MATERIAIS E MÉTODOS O esquema abaixo ilustra o resumo da metodologia empregada: RESULTADOS E DISCUSSÃO Trinta e um isolados foram capazes de produzir algum tipo de substância antimicrobiana contra pelo menos uma das bactérias utilizadas como indicadoras, entretanto, 5 isolados denominados JE3, JE6, JE4, ME1 e BIEI foram os mais promissores, sendo capazes de inibir patógenos alimentares como Bacillus cereus, Salmonella enterica sorotipo Typhi, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis e Proteus vulgaris, conforme a Tabela 1. Exemplos da inibição de P. vulgaris e B. cereus pelo isolado JE6 estão apresentados na Figura 1. O espectro de ação dos isolados produtoras de SAM mostrou-se extremamente relevante para a indústria alimentar porque B. cereus e Salmonella spp. estão no grupo das bactérias mais associadas a doenças transmitidas por alimentos no Brasil (SVS, 2016). III Congresso Nacional de Alimentos e Nutrição | VI Congresso Nacional de Alimentação e Nutrição Ouro Preto, MG | 27 a 31 de março de 2017 | ISSN 2236-2495 Tabela 1: Produção de SAM por bactérias Gram-negativas isoladas de utensílios usados no preparo de fórmulas lácteas infantis IV SEMINÁRIO ÇÃO Figura 1: Produção de SAM pelo isolado JE6 contra (A) P. vulgaris e (B) B. cereus. Além da inibição de Salmonella e de B. cereus, vale ressaltar alguns agentes infecciosos Gram-negativos encontrados em alimentos como, Klebsiella e Proteus podem carrear genes de resistência a antibióticos, tornando o tratamento dos casos, quando necessário, mais difícil. Estes agentes raramente são inibidos por bacteriocinas de bactérias Gram-positivas (FLEMING et al., 2010; DAMACENO et al., 2015). Dessa forma, faz-se necessário o estudo de SAM produzidas por bactérias Gram-negativas que sejam ativas contra estes microorganismos. CONCLUSÕES Este trabalho mostra a produção de SAM por isolados de Acinetobacter baumannii/calcoaceticus e Enterobacter cloacae oriundos de utensílios usados no preparo de FLI. São necessários mais estudos para se determinar a natureza química destas SAM e como podem ser usadas como agentes na redução ou III Congresso Nacional de Alimentos e Nutrição | VI Congresso Nacional de Alimentação e Nutrição Ouro Preto, MG | 27 a 31 de março de 2017 | ISSN 2236-2495 inibição do crescimento de patógenos em alimentos, em especial, em fórmulas lácteas infantis. REFERÊNCIAS - ARAÚJO, B.C.; MORAES, M.S.; COSTA, L.E.O.; NASCIMENTO, J.S. Multidrugresistant Acinetobacter baumannii-calcoaceticus complex isolated from infant milk formula and utensils in a nursery in Rio de Janeiro, Brazil. Journal of Dairy Science, v. 98, p. 2303-2306, 2015. - DAMACENO, H. F. B.; FREITAS JUNIOR, C. V.; MARINHO, I. L.; CUPERTINO, T. R.; COSTA, L. E. O.; NASCIMENTO, J. S. Antibiotic resistance versus antimicrobial substances production by gram-negative foodborne pathogens isolated from minas frescal cheese: heads or tails? Foodborne Pathogens and Disease, v. 12, n. 4, p. 297-301, 2015. - FLEMING, L. R.; BOLZAN, D. N.; NASCIMENTO, J. S. 2010. Antimicrobial substances produced by coliform strains active against foodborne pathogens. Foodborne Pathogens and Disease, vol. 7, 2010, no. 3, p. 243-247. - MORAES, M. S., ARAUJO, B. C., COSTA, L. E. O., NASCIMENTO, J. S. Avaliação do crescimento de Salmonella enterica em fórmulas lácteas infantis sob diferentes condições de preparo e armazenamento. Vigilância Sanitária em Debate: Sociedade, Ciência & Tecnologia, v.3, p.48 - 52, 2015a. - SVS/MS – Secretaria de Vigilânica Sanitária/Ministério da Saúde. Surtos de Doenças Transmitidas por Alimentos no Brasil. Disponível em: http://u.saude.gov.br/images/pdf/2016/junho/08/Apresenta----o-Surtos-DTA2016.pdf. Acesso em 18 de janeiro de 2016. - USAI, T., MUTONHODZA, B., MAKAMURE, C., TSHALIBE, R.S., CHINOFUNGA, D. Hygiene for preparation of infant formulas in a developing country. International Journal of Scientific and Technology Research, v. 2, n. 9, p. 1-5, 2013. - YANG, S. C., LIN, C. H., SUNG, C. T., & FANG, J. Y. Antibacterial activities of bacteriocins: application in foodsand pharmaceuticals. Frontiers in Microbiology. v. 5, p. 241, 2014. III Congresso Nacional de Alimentos e Nutrição | VI Congresso Nacional de Alimentação e Nutrição Ouro Preto, MG | 27 a 31 de março de 2017 | ISSN 2236-2495