RESOLUÇÃO DO EXERCÍCIO 7 - Bioquímica Experimental QBQ

RESOLUÇÃO DO EXERCÍCIO 7 - Bioquímica Experimental QBQ 0316N – Vitor Medeiros Almeida
Parte 1 –
O tecido embrionário de fígado contém a enzima que catalisa a reação S -> P. O tecido de
fígado adulto também apresenta a atividade S -> P. Alguns dados cinéticos obtidos com
extratos dos dois tecidos são apresentados abaixo. Que conclusões você pode tirar com
relação à identidade das duas enzimas?
Para tirar conclusões mais exatas da comparação entre os 2 extratos, sugere-se fazer os
calculos de Km e Vmax. Para isso foi feito os gráficos de duplo-recíproco, 1/[S] X 1/Vo.
Lembrando o gráfico do duplo-recíproco, aonde a reta corta o eixo X, equivale a -1/Km, e
aonde corta o eixo y equivale a 1/Vmax.
Duplo-recíproco (Lineweaver-Burke plot)
Para descobrir aonde a reta corta o eixo X, deve-se substituir o Y da equação por 0.
Para E1: y = 1E-05x + 0.0512, sendo y=0 temos: x = -5120.
Km = - 1/(-5120) = 2e-4M
Vmax = 1/0,0512 = 19,53 mol/min
Para E2: y = 2E-06x + 0.0503, sendo y=0 temos: x= -25150
Km = -1/(-25150) = 4e-5M
Vmax = 1/0,0503 = 19,88 mol/min
Mesmo as Vmax das 2 enzimas dando semelhantes, a E2 possui um Km bem menor do que E1. Dessa
forma, ela precisa de menos substrato para alcançar metade da Vmax, sugerindo uma maior afinidade
desta enzima pelo substrato utilizado no ensaio.
Parte 2 - Durante danos consideráveis do fígado, esta enzima é liberada na corrente sanguínea. Após
exercícios intensos, uma enzima de músculo, E3, que catalisa a mesma reação, é liberada na corrente
sanguínea. E1 e E3 podem ser diferenciadas facilmente porque apresentam diferentes valores de Km
(A Km da enzima de músculo é 2 x 10-5 M). Uma determinação com uma amostra de sangue de um
paciente apresentou os resultados dados na tabela abaixo:
Sabendo que o paciente chegou inconsciente no hospital, de modo que você não pode fazer a ele
nenhuma pergunta, o paciente sofre de uma doença do fígado, ou simplesmente tem se exercitado
violentamente?
Calculando Km:
Temos y = 1E-06x + 0.0034. Sendo y=0, temos x= -3400.
Km = -1/(-3400) = 2,94e-4M
O Km encontrado difere da Km da enzima do músculo em 1 ordem de grandeza (2,5e-5M)