Caracterização molecular de isoformas gênicas de actina isoladas

51º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005
Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4
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Palavras-chave: alfa-actina, beta-actina, seqüência nucleotídica,
aminoácidos, Oreochromis niloticus
Araki, CS; Severino, FE; Wasko, AP; Martins, C
Departamento de Morfologia, Instituto de Biociências, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP.
Caracterização molecular de isoformas
gênicas de actina isoladas de musculatura
esquelética de Oreochromis niloticus
(Pisces, Cichlidae)
A musculatura estriada esquelética é composta por músculo branco (fibras de contração rápida e metabolismo
glicolítico), músculo vermelho (fibras de contração lenta e metabolismo oxidativo) e músculo intermediário
(fibras de contração rápida e metabolismo oxidativo/glicolítico). Nos peixes, a maior parte da massa corporal
é composta por músculo estriado esquelético que constitui entre 40 a 75% do peso total do animal. Desta
forma, estudos sobre a organização e a expressão dos componentes deste tecido, como a actina, podem ampliar
os dados acerca dos mecanismos moleculares envolvidos no crescimento muscular. Seis diferentes genes de
actinas têm sido descritos no genoma dos vertebrados superiores - quatro destes genes codificam isoformas
musculares (α-esquelética, α-cardíaca, α-vascular e γ-entérica) e dois outros genes codificam os tipos β- e
γ-citoplasmáticos. Embora existam diversos dados acerca dos genes de actinas em mamíferos, o padrão de
organização e a diversidade destes genes em outros vertebrados, especialmente em peixes, ainda necessitam
ser investigados. O presente trabalho teve como objetivo a análise molecular de isoformas gênicas de actina
isoladas de musculatura esquelética de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), espécie de grande importância
para a piscicultura nacional. Amostras de RNA total foram isoladas de músculo branco e de músculo vermelho
de O. niloticus e utilizadas, separadamente, em RT-PCR. Dois conjuntos de primers, desenhados com base em
segmentos específicos de genes de actinas descritos na literatura, foram utilizados em PCR para amplificação
das amostras de cDNA, gerando fragmentos de distintos tamanhos que foram clonados. Um destes fragmentos,
composto por 825 pares de bases (pb), corresponde à seqüência de um gene de alfa-actina muscular esquelética
contendo os resíduos de aminoácidos 6 a 153 e 233 a 359. Comparações com seqüências depositadas em bancos
de dados indicam que este fragmento apresenta maior homologia com o gene de alfa-actina esquelética do
tipo 1, descrita para diferentes espécies de vertebrados. O segundo fragmento isolado de O. niloticus, composto
por 426pb, corresponde à seqüência de um gene de beta-actina citoplasmática contendo os resíduos de
aminoácidos 12 a 153. Embora algumas substituições de bases nucleotídicas puderam ser identificadas entre
os diversos clones analisados, as seqüências deduzidas de aminoácidos mostraram-se altamente conservadas já
que a maioria das variações nucleotídicas corresponde a substituições sinônimas. Entretanto, seis dos resíduos
de aminoácidos deduzidos podem ser considerados diagnósticos na diferenciação entre a alfa-actina muscular
esquelética e a beta-actina citoplasmática isoladas de Oreochromis niloticus, característica também descrita para
outras espécies de peixes, como Fugu rubripes. A ampliação das análises visando a comparação da organização
de diversas isoformas de actinas poderá ser útil para a melhor compreensão da evolução molecular destes genes
em peixes e, de uma forma geral, em vertebrados.
Apoio financeiro: FAPESP e CAPES.
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