validação de método espectrofotométrico para

FM92. Validação do método analítico para a quantificação do metotrexato em nanossuspensões por
espectrofotometria UV-VIS
Santos AM, Carvalho FC, Gremião MPD
Introdução: Doenças do trato gastrointestinal, como a doença de Crohn, retocolite ulcerativa e
carcinomas colorretal podem ser tratadas com metotrexato (MTX), que é um fármaco classificado como
antimetabólico utilizado como imunossupressor ou quimioterápico, porém possui uma solubilidade
limitada. Uma estratégia promissora para formulações de compostos que possuem solubilidade pH
dependente, como o MTX, é o desenvolvimento de nanossuspensões. As nanossuspensões são dispersões
coloidais de partículas formadas apenas pelo fármaco, que normalmente são estabilizadas pelo uso de
tensoativos e polímeros. A vantagem das nanossuspensões está na diminuição da partícula do fármaco,
que aumenta a taxa de dissolução, aumentando assim sua biodisponibilidade. Além disso, um tamanho
menor de partícula proporciona um aumento na estabilidade química e física da formulação. Objetivo: O
objetivo deste estudo foi desenvolver e validar uma metodologia analítica por espectrofotometria UV-VIS
para a determinação do MTX nas nanossuspensões. Metodologia: Os parâmetros como linearidade,
precisão intra-corrida e inter-corrida, exatidão, limite de detecção (LD) e limite de quantificação (LQ)
foram determinados dentro das especificações exigidas pela Anvisa (Brasil, 2003). A construção da curva
analítica foi preparada a partir de uma solução estoque de MTX a 100 μg/mL em uma solução de ácido
clorídrico 0,1 mol/L, a fim de obter diluições em diferentes concentrações (1; 2,5; 5; 10; 15; 20; 25 e 35
μg/mL) em triplicata. A absorbância das soluções foi definida por espectroscopia na região UV no
comprimento de onda de 306 nm, utilizando ácido clorídrico 0,1 mol/L como branco. Resultados e
discussão: A curva analítica foi construída com base no valor da absorbância em função da concentração
do MTX, com os dados adquiridos a partir da regressão linear foi obtida a equação da reta y = 0,0417x 0,0045. A linearidade pode ser observada na faixa de concentração de 1 a 35 μg/mL, confirmada pelo
coeficiente de correlação r = 0,9998 estando de acordo com o preconizado pela ANVISA, comprovando a
linearidade do método para o intervalo estabelecido. O método demonstrou que é preciso uma vez que os
valores dos coeficientes de variação obtidos (0,09% a 0,54%) foram inferiores a 5 % e os valores obtidos
na exatidão (99,08 a 101,39%) estão dentro da faixa de 80 a 120%, estando de acordo com os limites
aceitáveis pela Anvisa (Brasil, 2003). O LD e LQ, foram de 0,122 µg/mL e 0,408 µg/mL,
respectivamente, constatando que a metodologia é adequada para detectar e quantificar concentrações
muito baixas de fármaco. Desta maneira, o método validado por espectrofotometria UV pode ser utilizado
para quantificar o MTX incorporado nas nanossuspensões.
Palavras-chave: espectrofotometria UV-VIS, parâmetros de validação, metotrexato.
Apoio financeiro: CNPq.