PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CURSO DE ENGENHARIA AMBIENTAL MICROBIOLOGIA APLICADA Meios de Cultura Microbiologia C línica Meios de Cultura Conjunto de substâncias, formuladas de maneira adequada, capazes de promover o cresc. bacteriano, em condições de laboratório. - A maioria das bact. pode ser cultivada em laboratório, utilizando-se meios nutrientes; - Diferentes espécies de bactérias, variam extensivamente quanto as exigências mínimas de substâncias nutrientes; C aracterísticas B ásicas dos Meios de C ultura: - Fonte de Carbono e Nitrogênio; - Fonte de Energia; - Sais Minerais; - Fatores de Crescimento; - Condições Físicas; - Esterilização. C lassificação C ultura: dos Meios De acordo com seu conteúdo químico, os meios de cultura podem ser sintéticos ou complexos. 1. Meio de Enriquecimento: - geralmente líquido, de composição química rica em nutrientes, com a finalidade de permitir que as bactérias contidas em uma amostra clínica aumentem em número. Ex.: Caldo Brain Heart Infusion (BHI) e Caldo Tetrationato. de C lassificação C ultura: dos Meios 2. Meio de Transporte: - consiste em um meio isento de nutrientes, contendo um agente redutor (Tioglicolato ou cisteína). Geralmente mantém o pH favorável, previne a desidratação de secreções durante o transp. e evita a oxidação e auto-destruição enzimática dos patógenos presentes. Ex.: Meio de Stuart, Meio de Cary-Blair e Caldo Tioglicolato. de C lassificação C ultura: dos Meios 3. Meio Seletivo: - a finalidade deste tipo de meio é selecionar as espécies que se deseja isolar e impedir o desenvolvimento de outros germes (adição de corantes, antibióticos e outras substâncias com capacidade inibitória para alguns germes. Ex.: Agar Manitol Salgado e Agar SS de C lassificação C ultura: dos Meios 4. Meio Diferencial: - possibilita a distinção entre vários gêneros e espécies de microrganismos, por possuir substâncias que permitem uma diferenciação presuntiva, evidenciada na mudança de coloração ou na morfologia das colônias. Ex.: Agar Eosin Methilene Blue (EMB), Agar McConkey e Agar Hektoen. de C lassificação C ultura: dos Meios 5. Meio Indicador: - é utilizado no estudo das propriedades bioquímicas das bactérias, auxiliando, assim, sua identificação. O mais simples é aquele usado no estudo das reações de fermentação. Ex.: Agar Triple Sugar Iron (TSI) e Agar Citrato de Simmons.. de S eleção dos Meios de C ultura: - a escolha dos meios de cultura, para o processamento inicial das amostras é muito importante e está condicionada à flora patogênica desse local; - em geral é usado mais de um tipo de meio, no sentido de fornecer condições de crescimento a todos os patógenos possíveis de estarem presentes; S eleção dos Meios de C ultura: - para cada caso em particular, existem os meios utilizados rotineiramente na semeadura primária; - atualmente, o procedimento mais utilizado é a aquisição de meios pré-fabricados e fornecidos de forma desidratada, onde é necessário apenas a pesagem criteriosa da quantidade necessária ao volume desejado, seguido de dissolução e esterilização. C lassificação quanto ao estado físico - Líquidos ou caldos: crescimento indiscriminado com turvação do meio - Sólidos: crescimento de colônias isoladas, muito uitilizado para culturas puras - Semi-sólido: adição de menor quantidade de ágar, mobilidade bacteriana s Novidade: Chromagar AquaCHROM ™ Presença / ausência de E.coli e coliformes em amostras de água Técnica líquida. Aparência típica de microrganismos E.coli → Liquido azul para Verde Coliformes Outros → líquido amarelo CHROMagar Orientação ™ Para o isolamento e diferenciação de patógenos do trato urinário. Aparência típica de microrganismos E.coli → vermelho Enterococcus → azul turquesa Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter → azul metálico Proteus → halo marrom E.coli CHROMagar ™ Para a detecção e enumeração de E.coli em amostras de alimentos e água. Aparência típica de microrganismos CHROMagar ™ ECC Para a detecção simultânea e enumeração de E. coli e outros coliformes em amostras de alimentos ou água. Aparência típica de microrganismos E.coli → azul E.coli → Azul Outras bactérias gram negativas → incolor Gram positivos → inibidos Outros Coliformes → Vermelho Outras bactérias → incolores ou inibida. CHROMagar ECC ™ Liquid Para a detecção simultânea e enumeração de E. coli e outros coliformes em amostras de alimentos ou água. Aparência típica de microrganismos E.coli → Azul Coliformes Outros → Vermelho Outras bactérias → incolores ou inibida. CHROMagar Salmonella ™ Plus Para a detecção e isolamento de Salmonella, incluindo S. Typhi, S. Paratyphi e Salmonella lactose positiva agora é necessário em microbiologia de alimentos pela norma ISO 6579:2002. Aparência típica de microrganismos Salmonella (incluindo S. Typhi, S. A Paratyphi e Salmonella lactose positiva) → Mauve Exemplos de meios específicos • Agar Batata – Leveduras • Agar Bismuto Sulfito – Salmonella spp (centro negro, borda clara e brilho metálico) • Ágar Cled – Gran Positivo e Gran Negativo • EMB (Eosina Azul de Metileno) – Seletivo para Gran Negativo • Agar Loeffler – isolamento de Corynebacterium diphtheriae 884 × 584 - ... meio de Batata-DextroseÁgar (BDA) ou outro meio de cultura específico. S+enteritidis+Agar+bismuto+sulfito.jpg agar_cled.jpg pragawall.cenargen.embrapa.br 200 × 200 - martes 24 de marzo de 2009 429 × 461 - AGAR CLED microorganismosemergentes.blogspot.com gefor.4t.com E.coli_EMB_fig1.jpg Loeffler1.jpg 380 × 400 - Escherichia coli on EMB (Enlarged view) 360 × 239 - Bacilli - Loeffler's Methylene Blue microbelibrary.org microscopy-uk.org.uk Exemplos de meios específicos • Agar Lowestein Jensen – Micobactérias • Agar Sal Manitol – Staphylococcus spp • Agar Verde Brilhante – Salmonella spp, exceto S. typhi • Agar Sabouraud Dextrosado – Fungos e Leveduras • Agar Infusão Cérebro Coração – Fastidiosos como pneumococo e meningococo, muito utilizado em hemoculturas 300 × 300 - Sabouraud Liquid Medium and Sabouraud Dextrose Agar from Oxoid for the reliable cultivation and differentiation of Sabouraud Liquid MediPR026506.jpg Mycobacterium+tuberculosis.jpg 400 × 400 - The second medium that can be used is Lowenstein Jensen ... Mannitol.jpg 384 × 384 - ... diferentes especies de Estafilococo creciendo en agar sal manitol (MSA). pathmicro.med.sc.edu figura9.jpg 357 × 399 - Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos anvisa.gov.br PR026506.jpg 300 × 300 - Sabouraud Liquid Medium and Sabouraud Dextrose Agar from Oxoid for the reliable cultivation and differentiation of Sabouraud Liquid Medium and Sabouraud ... oxoid.com UM B REVE INTER VA LO!!!! A TÉ MA IS !!!!