Aulas práticas – Ensinos Fundamental II e Médio – Citologia – Células Epidérmicas CÉLULAS EPIDÉRMICAS: CATAFILO DE ALLIUM CEPA Objetivos: Observar, ao microscópio de luz, células epidérmicas do catafilo de Allium cepa (cebola), sem e com adição de corante. Duração: Aproximadamente 30 min. Local: Laboratório adequado. Material: Uma cebola inteira, lâmina de barbear, pinça, água destilada, lâmina histológica, lamínula, pipeta de Pasteur, tiras de papel filtro, microscópio de luz e lugol. Número de participantes: No máximo 30. Procedimentos: Fazendo uso da lâmina de barbear deverá ser feito um corte transversal extremamente fino na epiderme superior do catafilo da cebola. Com ajuda de uma pinça, depositar a camada extremamente fina da epiderme superior na lâmina histológica e acrescentar uma gota de água destilada com auxílio da pipeta de Pasteur. Após a primeira observação, sem a adição do corante, ao microscópio de luz a lâmina deverá ser inclinada aproximadamente em 45°. Então com a pipeta de Pasteur gotejar duas gotas do corante lugol sobre a região próxima à lamínula, com auxílio de um tira do papel filtro para possibilitar a entrada e posterior o contato do corante com a epiderme superior. Resultados esperados: Na primeira observação, sem o corante, poder-se-á notar poucas estruturas celulares, sendo apenas a parede celular um pouco visível graças a sua espessura. A parede celular é componente típico dos vegetais, fazendo limite entra as células vizinhas. A aplicação do corante lugol permitirá visualizar melhor as células, corando a parede celular destas e de algumas estruturas como núcleo, nucléolo, citoplasma e área vacuolar. As células da epiderme mostrar-se-ão alongadas e imbricadas, sem deixar espaços entre si. O citoplasma, por sua vez, apresentará aspectos translúcidos e, em algumas células, mostrará áreas vacuolares, que permitirá visualizar regiões mais claras do citoplasma e sem presença de organelas. Discussões esperadas: As estruturas celulares que conterão grande quantidade de polissacarídeos (vacúolos e parede celular) poderão ser bem evidenciadas com a adição do corante lugol à amostra. No caso citado, a parede celular encontrar-se-á corada de preto devido sua afinidade com o lugol, o qual contém iodo e este elemento se combina com as moléculas de glicose da celulose presente na parede celular e permitirá, assim, sua visualização. As células do tecido deverão encontrar-se em íntimo contato, sem deixar espaços entre si. Isso ocorrerá por se tratar de um tecido de revestimento, que tem essa característica devido sua função de ser isolante térmico e químico à planta, além da proteção contra agente patogênicos. O citoplasma deverá encontrar-se translúcido e muito reduzido ao tamanho do vacúolo empurra-lo-á à periferia da célula. O tamanho do vacúolo estará relacionado com a absorção de água do meio externo à planta. Quando submetido a um meio hipotônico promove a entrada de água na célula para equilibrar as concentrações intra e extracelulares. Esta água é destinada ao vacúolo, que acaba por aumentar de tamanho. Não será possível determinar todos os limites do vacúolo, uma vez que o tonoplasto não será visível. Instituto Aprenda.bio 1