BD Sabouraud Glucose Agar • BD Sabouraud

INSTRUÇÕES DE
UTILIZAÇÃO – MEIOS EM
PLACAS PRONTOS A
USAR
PA-254039.07
Rev.: April 2013
BD Sabouraud Glucose Agar 
BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol 
BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol 
BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin 
UTILIZAÇÃO PREVISTA
O BD Sabouraud Glucose Agar é utilizado para o isolamento e cultura de fungos (leveduras,
bolores e dermatófitas) provenientes de amostras clínicas. O BD Sabouraud Agar with
Chloramphenicol, o BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol e o BD
Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin são meios selectivos para o isolamento de
fungos provenientes de amostras clínicas.
PRINCÍPIO E EXPLICAÇÃO DO PROCEDIMENTO
Método microbiológico
O Sabouraud Glucose Agar é um meio de uso geral inicialmente concebido para a cultura de
dermatófitas.1,2 Actualmente, é utilizado para o isolamento e cultura de todos os fungos.3-5 As
peptonas existentes no Sabouraud Glucose Agar são fontes de factores de crescimento de
nitrogénio. A glucose proporciona uma fonte de energia para o desenvolvimento de
microrganismos. A elevada concentração de glucose proporciona uma vantagem para o
desenvolvimento dos fungos (estáveis por osmose) ao passo que a maioria das bactérias não
tolera a elevada concentração de açúcar. Além disso, o baixo nível de pH é ideal para os
fungos, mas não para muitas bactérias.3 Sabouraud Glucose Agar é apenas ligeiramente
selectivo contra as bactérias.
O BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol, o BD Sabouraud Agar with Gentamicin and
Chloramphenicol e o BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin são meios
selectivos baseados no Sabouraud Glucose Agar. Foram acrescentados agentes selectivos
para inibir as bactérias. O cloranfenicol é um antibiótico de largo espectro que inibe uma grande
variedade de bactérias gram-negativas e gram-positivas mas poderá ter um efeito inibidor sobre
vários fungos patogénicos.4 Foi demonstrado que os agentes antimicrobianos, como a
penicilina, a gentamicina e a estreptomicina ou uma combinação dos mesmos, são eficazes na
inibição de bactérias sem afectar o desenvolvimento dos fungos.2-5
Estes meios são utilizados para o isolamento de fungos provenientes de amostras clínicas ou
material que se suspeite conter contaminantes bacterianos. O Sabouraud Glucose Agar é um
dos meios utilizados nos Testes de limites microbianos da USP e EP.6,12
REAGENTES
Fórmulas: consultar a Tabela 1
PRECAUÇÕES
. Apenas para uso profissional.
Não utilizar as placas que apresentem sinais de contaminação microbiana, descoloração,
secura, fissuras ou outros sinais de deterioração.
Consultar as INSTRUÇÕES GERAIS DE UTILIZAÇÃO para informação sobre os
procedimentos de manuseamento asséptico, os riscos biológicos e os procedimentos de
eliminação do produto usado.
ARMAZENAMENTO E PRAZO DE VALIDADE
Após recepção das placas, conservar no escuro a uma temperatura entre 2 e 8°C, dentro do
invólucro original até ao momento da utilização. Evitar congelar e aquecer excessivamente. As
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placas podem ser inoculadas até ao prazo de validade (ver a etiqueta da embalagem) e
incubadas durante o tempo de incubação recomendado.
As placas são fornecidas em pilhas de 10 placas e, quando uma destas pilhas é aberta, as
respectivas placas terão de ser utilizadas no prazo máximo de uma semana, se forem
conservadas em local limpo a uma temperatura entre 2 e 8°C.
Tabela 1: REAGENTES
Fórmulas* por Litro de Água Purificada
Nome do Produto
Ingredientes
Hidrolisado
pancreático de
caseína
Hidrolisado péptico
de tecido animal
Glucose
Ágar
Penicilina G
Estreptomicina
Gentamicina
Cloranfenicol
pH
BD Sabouraud
Glucose Agar
5,0 g
BD Sabouraud
Agar with
Penicillin and
Streptomycin
5,0 g
BD Sabouraud BD Sabouraud Agar
with
Agar with
Gentamicin and
Chloramphenicol
Chloramphenicol
5,0 g
5,0 g
5,0
5,0
5,0
5,0
40,0
15,0
pH 5,6 ± 0,2
40,0
15,0
60000 UI
0,06 g
5,6 ± 0,2
40,0
15,0
0,04
0,4
5,6 ± 0,2
40,0
15,0
0,4
5,6 ± 0,2
*Ajustada e/ou suplementada conforme necessário para cumprir os critérios do desempenho.
CONTROLO DE QUALIDADE PELO UTILIZADOR
Inocular amostras representativas com as seguintes estirpes (para mais detalhes, consultar as
INSTRUÇÕES GERAIS DE UTILIZAÇÃO). Consultar a nota de rodapé relativa a incubação.
Nome do Produto
Estirpes de teste
BD Sabouraud
Glucose Agar
BD Sabouraud
Agar with
Penicillin and
Streptomycin
BD Sabouraud
Agar with
Gentamicin and
Chloramphenicol
BD Sabouraud
Agar with
Chloramphenicol
**Candida
Crescimento bom
a excelente
Crescimento bom a excelente
albicans
ATCC 10231
**Saccharomyces Crescimento bom
a excelente
Crescimento bom a excelente
cerevisiae
DSM 1333
** Aspergillus
Crescimento bom
brasiliensis
a excelente
Crescimento bom a excelente
ATCC16404
**Penicillium
Crescimento bom
a excelente
Crescimento bom a excelente
roquefortii
ATCC 9295
***Trichophyton
Crescimento bom
mentagrophytes
a excelente
Crescimento bom a excelente
ATCC 9533
*Staphylococcus
Sem inibição
Inibição completa
aureus
ATCC 25923
*Escherichia coli
Sem inibição
Inibição completa
ATCC 25922
Não inoculadas
Âmbar claro
Incubação: *48 h 35-37° C / **</= 5 days, 20-25° C, em condições aeróbias
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PROCEDIMENTO
Materiais fornecidos
BD Sabouraud Glucose Agar,
BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol,
BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol, ou
BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin, tudo fornecido em placas Stacker
de 90 mm. Microbiologicamente controlados.
Materiais não fornecidos
Meios de cultura auxiliares, reagentes e equipamento laboratorial, conforme necessário.
Tipos de amostra
Os produtos descritos neste documento são meios de isolamento para fungos e podem ser
usados (alternativamente ou como uma combinação destes meios) para todas as amostras
clínicas (consultar também CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO E LIMITAÇÕES DO
PROCEDIMENTO). Os meios também são utilizados em muitas áreas da microbiologia
industrial e na monitorização da higiene.
Procedimento do teste
Espalhar a amostra para cultura imediatamente após esta ser recebida no laboratório. A placa
para cultura é usada principalmente para isolar culturas puras das amostras que contêm flora
mista. Em alternativa, se o material estiver a ser cultivado directamente de uma zaragatoa,
fazer rolar a zaragatoa sobre uma pequena área da superfície, na extremidade; em seguida,
espalhar a partir desta área inoculada.
 Se a amostra for composta por raspas de pele, cabelo ou unhas, colocar o material no
centro da superfície do meio. Se for possível, as partículas maiores devem ser ligeiramente
prensadas sobra a superfície por meio de pinças estéreis de modo a fazer contacto com o
meio.
 Para a detecção de dermatófitas, incluir também BD Dermatophyte Agar ou BD Mycosel
Agar.
 Se o BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol, o BD Sabouraud Agar with
Gentamicin and Chloramphenicol e o BD Sabouraud Agar with Penicillin and
Streptomycin forem utilizados, incluir também uma placa de BD Sabouraud Glucose
Agar.
 Por último, também deve ser inoculado um meio não selectivo, como é o caso do BD
Columbia Agar with 5% Sheep Blood, para fornecer uma indicação dos elementos
patogénicos bacterianos presentes na amostra.
Se for utilizado para a detecção de leveduras (por exemplo, Candida species) em amostras
clínicas, incubar durante 48 horas a uma temperatura entre 30 e 35°C. Se houver suspeita de
fungos filamentosos, incluindo dermatófitas, incubar durante um máximo de uma semana a uma
temperatura de 25 a 30°C. As dermatófitas requerem, ocasionalmente, 3 semanas ou mais para
produzir crescimento. Se for utilizado para monitorização da higiene, incubar durante um
máximo de 7 dias a uma temperatura entre 20 e 25°C. Se a incubação durar mais de 3 dias,
proporcionar condições adequadas de humidade. As placas podem ser seladas com fita
adesiva plástica de modo a evitar que ocorra dessecação. Para mais detalhes sobre a
temperatura de crescimento e a incubação, consultar a bibliografia.5,7-10
Resultados
Após uma incubação suficiente, as placas podem apresentar colónias isoladas nas áreas
estriadas bem como crescimento confluente nas áreas de grande inoculação.
Examinar as placas para verificar a existência de colónias fúngicas que apresentem morfologia
e cor típicas. Para confirmar os resultados, devem realizar-se testes bioquímicos bem como
procedimentos microscópicos e serológicos.6-9
Uma vez que existe um grande número de fungos patogénicos, não se incluem aqui
pormenores sobre o seu aspecto. Consultar a bibliografia.2,3, 5-9
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CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO E LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
Os meios apresentados neste documento são meios padrão para o isolamento e cultura de
fungos provenientes de todos os tipos de amostras clínicas e não clínicas.4-11
Devido a uma grande variação nas temperaturas de desenvolvimento dos fungos, poderá ser
necessário inocular várias placas do mesmo meio e incubá-las a temperatura diferentes.
Consultar a secção Procedimento do Teste bem como a bibliografia apropriada.5, 7-10
Uma vez que o BD Sabouraud Glucose Agar é apenas ligeiramente selectivo, as bactérias
desenvolver-se-ão no meio, especialmente após um período de incubação alargado. No caso
de se suspeitar de contaminação bacteriana das amostras, materiais ou áreas em investigação,
tem de se utilizar meios com uma elevada selectividade como, por exemplo, BD Sabouraud
Agar with Chloramphenicol, o BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol
ou o BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin para a cultura do espécime ou da
amostra.
Nocardia e Actinomyces são bactérias filamentosas (e não fungos!) pelo que não se
desenvolvem em todos os meios Sabouraud que contêm inibidores bacterianos.
BIBLIOGRAFIA
1. Sabouraud, R. 1892. Contribution a l'etude de la trichophytie humaine. Etude clinique,
microscopique et bacterioloqique sur la pluralité des trichophytons de l'homme. Ann.
Dermatol. Syphil. 3: 1061-1087.
2. Haley, L.D., J. Trandel, and M.B. Coyle. 1980. Cumitech 11, Practical methods for culture
and identification of fungi in the clinical microbiology laboratory. Coordinating ed., J.C.
Sherris. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
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medical mycology. PHS Publication No. 994, U.S. Government Printing Office, Washington,
D.C.
4. MacFaddin, J.F. 1985. Media for isolation-cultivation- identification-maintenance of medical
bacteria. vol. I. Williams & Wilkins, Baltimore.
5. Sutton, D.A. 2003. Specimen Collection, transport, and processing: mycology. In: Murray,
P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical
microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
6. U.S. Pharmacopeial Convention, Inc. 2009. The U.S. Pharmacopeia 32/The national formulary
27--2009. U.S. Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, Md. USA
7. Larone, D.H. 2002. Medically important fungi: a guide to identification. 4th ed. American
Society for Microbiology, Washington, D.C.
8. Summerbell, R.C. 2003. Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton, and agents of
superficial mycoses. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H.
Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
9. Kwon-Chung, K.J., and J.E. Bennett. 1992. Medical mycology. Lea & Febiger, Philadelphia.
10. Pfaller, M.A., and R.A. Fromtling (section ed.). 2003. Mycology. In: Murray, P. R., E. J.
Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical
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11. Brun, S., et al. 2001. Evaluation of five commercial Sabouraud gentamicin-chloramphenicol
agar media. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 20: 718-723.
12. Council of Europe, 2008. European Pharmacopoeia, 6.1. European Pharmacopoeia
Secretariat. Strasbourg/France.
EMBALAGEM / APRESENTAÇÃO
BD Sabouraud Glucose Agar
Cat. No. 254039
Meios em placas prontos a usar, 20 placas
Cat. No. 254083
Meios em placas prontos a usar, 120 placas
BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol
Cat. No. 254091
Meios em placas prontos a usar, 20 placas
PA-254039.07
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BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol
Cat. No. 254041
Meios em placas prontos a usar, 20 placas
Cat. No. 254096
Meios em placas prontos a usar, 120 placas
BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin
Cat. No. 254451
Meios em placas prontos a usar, 20 placas
INFORMAÇÕES ADICIONAIS
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Becton Dickinson GmbH
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