ABORDAGEM DO DIAGNÓSTICO LABORATORIAL BACTERIOLÓGICO NAS INFECÇÕES DO TRATO URINÁRIO Felipe Ferreira Ribeiro 1 Adelaide Machado Coutinho Cavalcante 2 RESUMO As infecções do trato urinário são geralmente atribuídas a microrganismos isolados da urina, na presença ou ausência de sintomas, e são muito frequentes na população. A urina é considerada estéril e pode sofrer contaminações de bactérias da pele, da roupa ou genitália. Se, não colhida, armazenada e transportada de forma adequada pode-se obter falsos resultados em exames bacteriológicos. O paciente dever ser informado sobre os procedimentos recomendados quanto ao horário da colheita, assepsia necessária, bem como o profissional deve estar atualizado quanto às técnicas utilizadas para o isolamento e antibiograma. Bactérias da família Enterobacteriaceae estão envolvidas em quase todas as uretrocistites não gonocócicas, sendo a Escherichia coli a espécie mais comum em aproximadamente 80% dos casos entre mulheres na idade fértil, sem lesão do trato urinário. Outras bactérias incluindo Klebsiella sp., Enterobacter sp., Proteus sp., Pseudomonas sp., e Enterococcus sp., são encontrados frequentemente em pacientes com lesões obstrutivas ou doenças paralíticas afetando a função renal. Palavras chave: Infecções urinárias. Diagnóstico Laboratorial. Bacteriúria. INTRODUÇÃO As infecções do trato urinário (ITU), ao maior número de malformações uma das doenças bacterianas mais comuns, congênitas, especialmente válvula de uretra atinge indivíduos de ambos os sexos e de posterior; incide principalmente no sexo todas as faixas etárias, do neonato ao idoso, masculino (HEILBERG & SCHOR, 2003). mas, durante o primeiro ano de vida, devido ___________________ 1 2 Acadêmico do Curso de Pós Graduação em Análises Clínicas e Gestão de Laboratório, da Universidade Vale do Rio Doce Orientadora Profª do Curso de Farmácia Generalista, da Universidade Vale do Rio Doce 1 Durante toda a infância e, estabelecidas não tratadas, ou mesmo por principalmente, na fase pré-escolar, nas contaminação da genitália externa. Mas, a meninas são mais frequentes os casos de presença de bactérias na urina (bacteriúria) infecções do trato urinário de dez a vinte pode ocorrer em várias condições clínicas vezes maiores do que nos meninos. Na vida envolvendo adulta, o aparecimento de infecções do trato qualquer tecido do trato urinário ou pode urinário aumenta e o predomínio no sexo resultar de simples multiplicação na urina, feminino se mantém, com picos de maior sem invasão do tecido (CAMARGO et al., acometimento no início ou relacionado à 2001). a invasão microbiana de atividade sexual, durante a gestação ou na Sendo a urina um elemento estéril, a menopausa, de forma que 48% das mulheres simples presença de bactérias, independente apresentam pelo menos um episódio de ITU de sua quantidade, deveria indicar ITU, o ao a que, na prática, não se demonstra. Deve-se susceptibilidade à ITU se deve à uretra mais considerar a possível contaminação da curta e a maior proximidade do ânus com o amostra através da microbiota vaginal, o que vestíbulo vaginal e uretra. A partir da 5ª a 6ª aumenta muito o número de resultados década de vida, a presença do prostatismo falso-positivos. O espectro clínico das ITU é torna o homem mais suscetível à ITU muito amplo reunindo diferentes condições (HEILBERG & SCHOR, 2003). como a cistite, pielonefrite, bacteriúria de longo da vida. Na mulher, Por ser uma das doenças bacterianas baixa contagem, bacteriúria assintomática, mais comuns; a conduta clínica exige um síndrome uretral ou síndrome piúria-disúria conhecimento adequado quanto ao número entre e tipos de bactérias envolvidas. Assim, microorganismos causadores de ITU varia na quando métodos quantitativos ou semi- dependência de onde foi adquirida a quantitativos infecção, intra ou extra-hospitalar (HEILBERG são usados, o exame bacteriológico de urina pode ser uma ajuda valiosa no diagnóstico e no outras. A freqüência dos & SCHOR, 2003). controle terapêutico. A urina é um excelente meio de DESENVOLVIMENTO cultura para a maioria dos microrganismos que infectam o trato urinário e o crescimento As infecções do trato urinário podem bacteriano pode ocorrer, resultando em ser complicadas ou não complicadas. É contagens considerada como não complicada quando elevadas em infecções 2 ocorre em pacientes com estrutura e funções sanguínea, e infecção ascendente, a partir da do trato urinário normal, sexo feminino não via urinária. A infecção ascendente é, gestante, ausência de cateteres urinários e claramente, a via mais comum pela qual as alterações da imunidade e adquirida fora de bactérias ambiente hospitalar. Já as complicadas, o microorganismos uropatogênicos colonizam acometimento ocorre devido um maior risco o intestino grosso e a região perianal, nas de falha terapêutica e sendo associadas a mulheres os sítios mais comuns de infecção fatores que favorecem a ocorrência da do trato urinário, são a uretra e a bexiga. A infecção, como um aparelho urinário com mulher possui a bexiga maior, podendo alterações estruturais ou funcionais, sexo armazenar masculino, apresenta uretra mais curta e ausência de patógeno multirresistente, têm a acesso urina por ao rim. mais tempo, imunossupressão. As características clínicas propriedades das ITU dependem do estado do paciente e encontradas no líquido prostático. Por isso, também do órgão e da extensão atingida as infecções agudas são mais comuns nas pelo microrganismo. Situações mais graves mulheres que nos homens, além do fato de ocorrem estão que a proximidade anatômica entre vagina e acometidos os rins, geralmente ocorrendo ânus, associada ao alto grau de umidade febre, calafrio e dor lombar, além de grande local, cria uma verdadeira “ponte” líquida, risco para uma septicemia (CHEBABO & proporcionando BRAVO NETO, 2002; VIEIRA NETO, 2003). microrganismos normalmente quando A infecção pode afetar um único local, feminino. antimicrobianas, Os Em livre ao como acesso sistema condições as dos urinário normais há tal como a uretra (uretrite), próstata competição entre esses uropatogênicos e a (prostatite), flora vaginal constituída por lactobacilos. A bexiga (cistite), ou rins (pielonefrite), embora, frequentemente mais colonização de um local esteja envolvido. Infecção principalmente pelo uso de antimicrobianos restrita à urina pode apresentar-se como e pela má higiene perineal. A migração para a bacteriúria uretra assintomática, mas pode, e da vagina bexiga é é facilitada, desencadeada, subseqüentemente, levar à infecção clínica. principalmente, pela atividade sexual, pelo Todas as porções do trato urinário podem uso de contraceptivos com espermicida e correr risco, desde que algum de seus sítios pela alteração do ph vaginal, que pode torne-se infectado. Há duas vias de infecção ocorrer com a alteração da flora pelo uso de dos rins: infecção hematógena, pela corrente antimicrobianos e pelo hipoestrogenismo 3 que, habitualmente ocorre na menopausa aspiração suprapúbica ou jato médio de (MURRAY et al., 1998; VIEIRA NETO, 2003). micção espontânea (CAMARGO et al., 2001). A colheita da amostra de urina para A aspiração suprapúbica da bexiga suspeita de ITU é a primeira da manhã, pois pode ser necessária para diagnosticar uma as contagens bacterianas são mais altas infecção, procedimento este realizado pelo devido à incubação noturna na urina contida médico e envolve a punção direta da bexiga na bexiga. A urina de pacientes que estão através da parede abdominal, usando-se recebendo líquidos diuréticos pode estar agulha e seringa. A técnica é utilizada quando diluída, reduzindo a contagem de colônias. os resultados de culturas repetidas de urina Os cuidados na colheita, preservação e fornecem transporte das amostras de urina são da microrganismos e microbiota bacteriana, maior importância. As melhores técnicas de mista. Também, quando na presença de laboratório para contar e identificar bactérias bacteriúria e a cultura é negativa, existe a são de pouco valor se o espécime não é possibilidade de infecção por anaeróbios. A colhido ao obtenção de amostras de urina por micção laboratório, sem demora ou sob refrigeração espontânea varia muito, dependendo da adequada. pesquisada idade, sexo e da capacidade de cooperação bacteriologicamente não deve ser colhida em do paciente. As instruções adequadas para urinol ou “comadre”, deve ser coletada colher uma urina por micção espontânea diretamente em frasco estéril, identificada e devem ser passadas para todos os pacientes, examinada de forma que as bactérias encontradas na adequadamente A urina ou a e levado ser refrigerada, o mais números possam ser conflitantes consideradas de rapidamente possível, entre 4 – 6 °C, pois, urina como sob refrigeração, as contagens bacterianas provenientes apenas da bexiga e uretra permanecem em ritmo lento de replicação (CAMARGO et al., 2001). por (pelo menos) 24 horas nessas condições, Uma urinálise cuidadosa, que inclua o embora não parem totalmente a replicação. exame microscópico da urina, é parte Bactérias contaminantes, provenientes do fundamental da avaliação de qualquer períneo, podem multiplicar-se nas amostras paciente com suspeita de infecção do trato mantidas à temperatura ambiente e invalidar urinário. A presença de bactérias na análise os resultados dos exames. Amostras de urina do sedimento urinário (bacteriúria) apresenta podem algumas ser colhidos por cateterização, limitações especificidade para de o sensibilidade diagnóstico e de 4 infecções do trato urinário. A análise do cultivo de microrganismos aeróbios ou sedimento urinário pode resultar em falso- microaerófilos, negativos negativos. para bacteriúria, mesmo na gram-positivos Devido a ou uma gramampla presença de infecção ativa, da mesma forma, disponibilidade de substâncias nutritivas e resultados falso positivos podem ocorrer, por não possuírem substâncias inibidoras, como nos casos de contaminação da amostra são considerados meios de cultivo universal (CARMAGO para urocultura. Pode-se utilizar meio de Mac et al., 2001). O exame de esfregaço de urina não centrifugada, corada é gram-negativos, por se tratar de um meio recomendado como parte do procedimento com inibidores para gram-positivos. É um básico. excelente auxílio diagnóstico (CAMARGO et Colocar 10 pelo µL de Gram, Conkey para isolamento de enterobacilos urina não centrifugada em uma lâmina deixar secar al., 2001). sem espalhar, fixar e, então corar pelo Uroculturas quantitativas devem ter método de Gram, em objetiva de imersão, seus resultados relatados e as colônias uma ou mais células bacterianas observadas isoladas devem ser selecionadas para os por campo, é indicativo de infecção urinária, testes de identificação e susceptibilidade. Se sendo este um procedimento de triagem, e houver crescimento de 10 colônias (≈104 não diagnóstico. A presença de várias células UFC/mL), a probabilidade de contaminação é epiteliais de grande, se o crescimento for de 10 a 100 contaminação pelo conteúdo vaginal, sendo colônias registra-se o número de bactérias recomendável nova amostra. por mililitro de urina, a predominância de um escamativas é típica A urocultura é o padrão ouro do único tipo de microorganismo, ele deve ser diagnóstico laboratorial de um quadro de identificado, mas se há mistura de dois ou infecção do trato urinário, para minimizar as mais se relata microbiota mista e requisita chances de contaminação da amostra, a urina uma nova amostra. Se há presença de mais deve ser coletada e processada no menor de 100 colônias, mais de 105 bactérias por tempo possível (ideal em até 20 minutos), mL, caso contrário, a mesma deve ser refrigerada adequadamente, logo após a coleta e semeada nos meios de devem estar presentes. Caso exista mais de cultura, no máximo em 24 horas no um momento da refrigeração. Recomenda-se o suficientemente elevado, cada tipo dever ser uso de ágar Cled ou Brolacin, que permitem o identificado e os testes de susceptibilidade se tipo as placas foram colônias presente em bem um semeadas isoladas número 5 aos antimicrobianos realizados, quando solicitados (NATIONAL..., 1999). saprophyticus é por vezes difícil, pelo fato de apresentar um crescimento muito lento em Deve-se identificar pelo menos o urocultura e também porque este agente gênero de patógenos potenciais, embora pode com o advento dos equipamentos de Staphylococcus coagulase e DNAse-negativo, automação, a identificação em gênero e saprófita da microbiota indígena do trato espécie tenha se transformado em prática urinário, comum nos laboratórios. Há uma variedade Staphylococcus de disponíveis diferencia deste último é a resistência ao diagnóstico antibiótico Novobiocina e ao Ácido Nalidíxico. presuntivo de infecções do trato urinário. Nas ITU complicadas, a incidência de Eles Pseudomonas é maior, assim como a de kits ou comercialmente se dispositivos para baseiam em o procedimentos ser confundido mucosas e com pele, epidermidis. O como o que o bacteriológicos ou químicos. Um exemplo de gram-positivos kit para cultura bacteriológica quantitativa é Enterococcus (HEILBERG & SCHOR, 2003). o laminocultivo que consiste numa lâmina Como resistentes outro critérios de avaliação de utilizam-se, na coberta de meio de cultivo sobre cada lado, bacteriúria sendo um seletivo e outro não seletivo. São prática, dois critérios: o de Kass e o de destinados ao isolamento e a identificação Stamm. Segundo Kass, são consideradas presuntiva bactérias, amostras compatíveis com ITU aquelas com freqüentes na urocultura, reduzindo a mão contagem de colônias igual ou maior a de obra, custos e tempo de semeadura 100.000 UFC/mL (Unidades formadoras de (SILVA, 1999). colônia por mililitro de urina). Já o critério de de determinadas Os maiores responsáveis pela ITU são os germes gram-negativos considerável, como Stamm, aquelas com contagem de colônias entéricos igual ou maior a 100 UFC/mL. A utilização especialmente a Escherichia coli, que é o deste ou daquele critério é de competência mais freqüente, seguido dos demais gram- do clínico a cada situação isolada, já que o de negativos como Klebsiella, Enterobacter, Kass é mais específico, enquanto o de Stamm Proteus, Pseudomonas. Além destes, o é mais sensível, ambos os critérios devem ser Staphylococcus saprophyticus, um germe utilizados, sempre acompanhados de dados gram-positivo, tem sido apontado como clínicos compatíveis para que se diagnostique segunda causa mais freqüente de ITU não ITU. Atualmente, os critérios de Stamm são complicada. O diagnóstico de ITU por S. 6 utilizados para crianças e mulheres jovens (CAMARGO et al., 2001). CONCLUSÃO A infecção do trato urinário é uma patologia extremamente frequente e constitui um grave problema de saúde que afeta milhões de pessoas a cada ano. A coleta e o armazenamento da urina são os fatores mais importantes para um correto diagnóstico laboratorial da ITU e, para isto, sugere-se uma análise imediata da urina. Os should be informed about best practices as to the time of harvest, asepsis required as well as the professional must stay current on techniques used for the isolation and antibiogram. Bacteria of the Enterobacteriaceae family are involved in almost all non-gonococcal uretrocistites, Escherichia coli being the most common species in approximately 80% of cases among women of childbearing age, without injury to the urinary tract. Other bacteria including Klebsiella sp., Enterobacter sp., Proteus sp., Pseudomonas sp. and Enterococcus sp. Are often found in patients with obstructive lesions or diseases affecting renal function paralyzed. Keywords: Urinary tract infections. Laboratory Diagnosis. Bacteriuria. maiores responsáveis pela ITU são os germes gram-negativos entéricos especialmente a Escherichia coli, que é o mais freqüente, REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS seguido dos demais gram-negativos como CAMARGO, I.L.; BARATELLA, C.; MASCHIETO, A.; SALVINO, C.; DARINI, A.L.C. Diagnóstico bacteriológico das infecções do trato urinário: uma revisão técnica. Rev. Medicina, v. 34, n. 1, p. 70-78, 2001. Klebsiella, Enterobacter, Proteus, Pseudomonas. ABORDAGEM DO DIAGNÓSTICO LABORATORIAL BACTERIOLÓGICO NAS INFECÇÕES DO TRATO URINÁRIO ABSTRACT Urinary tract infections are usually attributed to organisms isolated from urine, the presence or absence of symptoms, and are very common in the population. Urine is considered sterile and can suffer contamination of bacteria from skin, clothing or genitalia. If not harvested, stored and transported properly you can get false results in bacteriological examinations. The patient CHEBABO, A. & BRAVO NETO, G.P. - Uso racional de antibióticos na infecção urinária do paciente cirúrgico. In: Programa de Atualização de Uso de Antibióticos em Cirurgia – Farmídia/Pfizer, v. 1, n. 4, p. 4-8, 2002. HEILBERG, I.P; SCHOR, N. - Abordagem diagnóstica e terapêutica na infecção do trato urinário – ITU. Rev. Assoc. Méd. Bras., São Paulo, v. 49, n. 1, 2003. LOPES, H.V. & TAVARES, W. - Infecções do trato urinário não complicadas tratamento. Projeto Diretrizes - Associação Médica Brasileira, Conselho Federal de Medicina, Sociedade Brasileira de Infectologia e Sociedade Brasileira de Urologia, p. 11, 2004. 7 MURRAY PR; ROSENTHAL KS; KOBAYASHI GS & PFALLER MA. Microbiologia médica, Trad. de Patrícia Josephine Voeux. 3a ed. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 1998. SILVA CHPM. Bacteriologia um texto ilustrado, Eventos, Teresópolis, cap.8, p.9199, 1999. VIEIRA NETO, O.M. - Infecção do trato urinário. Med., Ribeirão Preto, v. 36, p. 365369, 2003. 8