55º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 55º Congresso Brasileiro de Genética • 30 de agosto a 02 de setembro de 2009 Centro de Convenções do Hotel Monte Real Resort • Águas de Lindóia • SP • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2 31 Isolamento de linhagens de bactérias da biodiversidade do solo do cerrado secretoras de amilase e aplicação dessa em processos biotecnologicos Passini, MRZ¹; Sá, FVJ¹; Guerra, OG¹ ¹Laboratório de Genética Molecular e de Microrganismos/Biotecnologia - Departamento de Ciências Naturais. Campus de Três Lagoas UFMS [email protected] Palavras-chave: secreção de enzimas amilolíticas, halos de amilolise, linhagens de bactéria, biodiversidade do Cerrado; biotecnologia Esse estudo teve o intuito de isolar linhagens de bactérias amilolíticas da biodiversidade do solo do Cerrado, com objetivo final de contribuir com a obtenção de novas amostras com melhor potencial industrial. Nos últimos anos, com os grandes avanços tecnológicos, novas pesquisas para a identificação de microrganismo têm sido estimuladas, com a intenção de descobrir mais sobre os mesmos, pois a utilização desses em processos biotecnologicos tem preferência, devido às facilidades operacionais e econômicas, comparando com animais e vegetais. Desde microrganismos até animais mais derivados como o homem é encontrada a amilase, essa proteína degrada o amido que é um polissacarídeo produzido em plantas. As enzimas amilolíticas ocupam o segundo lugar na produção mundial de enzimas, ficando atrás apenas das proteases. Portanto, são de grande importância na biotecnologia atual com aplicações nas indústrias têxteis, papel e celulose, de couro, detergentes, bebidas destiladas e panificação, além dessas áreas outras vêm sendo atendidas como, por exemplo, farmacêutica, médica e químicoanalítica. Para o isolamento das linhagens de bactérias com atividade amilolítica, foi coletado em cinco pontos diferentes 250g de solo no município de Três Lagoas/MS. As amostras foram cultivadas em meio M9 acrescido de uma única fonte de carbono, o amido que se encontrava a uma concentração final no volume de meio de 0,5%. As cinco amostras foram incubadas separadamente, 10g das amostras foi colocado em 100ml de meio M9 líquido, onde permaneceu por 48h. Após a incubação, retirou-se 500µl do sobrenadante e esse foi semeado em 100ml de meio M9 liquido e permaneceu incubado por 120h. Ao término desse período, as amostra foram diluídas para encontrar na Câmara de Neubauer aproximadamente 300 Unidades Formadoras de Colônia (UFC). Utilizou a diluição 10-4 para todas as amostras, e estas foram plaqueadas em meio M9 sólido. Da amostra um semeou 100µl, amostra dois semeou 160µl, amostra três semeou 200µl, amostra quatro semeou 100µl e amostra cinco semeou 180µl. Em todas essas esperava-se encontrar 270UFC. Entretanto foi encontrado na amostra um 220UFC, na dois 192UFC, na três 300UFC, na quatro 337UFC e na cinco 353UFC. Após o crescimento as placas foram abertas e emborcadas sobre outra contendo cristais de iodo sublimado. As linhagens de bactérias que promoverem a degradação do amido geraram um halo incolor ao redor das colônias, sendo que o meio de amido não degradado encontrava-se azul violeta. Neste estudo possibilitou concluir que existem linhagens de bactérias na biodiversidade do Cerrado que produzem algum tipo de enzima amilolítica e que puderam ser expressas e excretadas in vitro. Todas as amostras apresentaram atividade enzimática, exibindo possível potencial biotecnológico. Apoio Financeiro: UFMS e CNPq.