Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa Teste prático de Imunologia (2º ano) 2014/2015 Nome: ______________________________________________________ nº pauta________ Turma _________________________(Dia/Hora) Cotação de cada pergunta certa: 0,5 valores; Cada pergunta errada desconta 0,1 valores na cotação final. Fazer um círculo à volta da resposta escolhida. PERGUNTAS 1 - Combinar cada termo (1, 2, 3) com a definição correta (A, B, C): 1. Afinidade; 2. Avidez; 3. Reatividade cruzada. A. A força da ligação entre uma imunoglobulina polimérica, contendo múltiplos anticorpos, e um ou mais antigénios de um agente patogénico. B. A capacidade dos anticorpos reagir com antigénios que não são os que inicialmente causaram a sua produção. C. A força da ligação entre um único anticorpo e um antigénio. A) B) C) D) 1. A.; 2. C.; 3. B. 1. B.; 2. A.; 3. C 1. A.; 2. B.; 3. C. 1. C.; 2. A.; 3. B. 2 - Numa reacção serológica na qual o antigénio e o anticorpo são ambos solúveis, quando misturados formam um complexo insolúvel que pode ser detectado macroscopicamente. Que tipo de ensaio é este? A) B) C) D) Precipitação Aglutinação Floculação Neutralização 3 - O que á zona de equivalência na interacção antigénio/anticorpo? A) Zona em que a precipitação óptima ocorre porque o número de locais polivalentes de Ag e Ab são aproximadamente iguais. B) Zona em que a aglutinação ocorre porque a concentração de hemácias é igual à de antigénio. C) Zona em que a temperatura permite uma boa ligação entre o anticorpo e o antigénio D) Zona em que o número de anticorpos permite ver a precipitação. 4 – Qual destas condições pode ser adversa para uma reacção de eletroimunodifusão? A) B) C) D) Diminuição da força da corrente eléctrica. Alteração do pH do tampão. Alteração da força iónica do tampão. Todas as anteriores. 5 – A electroforese seguida de difusão do anticorpo para fora dos poços, é a base do seguinte ensaio: A) B) C) D) Electroforese por imunofixação Imunoelectroforese Difusão dupla Ensaio dos Rockets 6 - Reacções de precipitação incluem todas as seguintes, EXCETO: A) B) C) D) Imunodifusão dupla ElectroImunodifusão Imunoelectroforese Fixação de anticorpos 7 - Uma amostra de antigénio e uma preparação de anticorpo testadas por imunodifusão revelaram três bandas, indicando que: A) B) C) D) Havia mais de um antígenio O anticorpo era impuro A temperatura era demasiado elevada Havia só um anticorpo e um antigénio 8 – A Imunoelectroforese é uma técnica concebida para separar os componentes da mistura, e utiliza a electroforese: A) B) C) D) Antes da reacção com o anticorpo Antes da reacção com o antigénio Após reacção com o anticorpo Após a reacção com o antigénio 9 – No ensaio dos rockets, o comprimento da precipitação é: A) B) C) D) Proporcional à quantidade de anticorpo em cada poço Inversamente proporcional à quantidade de anticorpo em cada poço Inversamente proporcional à quantidade de antigénio em cada poço Proporcional à quantidade de antigénio em cada poço 10 - Qual das seguintes ligações não participa na formação de complexos antigénio-anticorpo? A) B) C) D) Ligações hidrofóbicas Ligações covalentes Forças de Van der Waals Ligações de hidrogénio 11 – Numa difusão dupla: A) B) C) D) Apenas é permitido migrar o antigénio no gel Apenas é permitido migrar anticorpo no gel Nem o anticorpo nem o antigénio irão migrar no gel Tanto o antigénio como o anticorpo irão migrar no gel 12 - Qual dos seguintes elementos serviria como veículo num teste de aglutinação? A) B) C) D) Soro humano Glóbulos brancos Eritrócitos Anticorpos 13- Uma das principais diferenças entre as reacções de aglutinação e precipitação é: A) O teste de aglutinação utiliza um antigénio solúvel, enquanto o teste de precipitação usa um antigénio insolúvel. B) O teste de aglutinação utiliza um antigénio na superfície de partículas, enquanto o teste de precipitação usa um antigénio solúvel. C) Aglutinação não exige zona de equivalência ao passo que a precipitação exige. D) A precipitação e aglutinação não requerem zona de equivalência. 14 - Uma vez que a aglutinação é muito mais sensível do que a técnica de precipitação, aglutinação passiva é utilizada para converter um sistema de precipitação num ensaio mais sensível. Como é feito? A) Ligar quimicamente o antigénio solúvel a partículas inertes, como eritrócitos, bactérias ou esferas de látex. B) Ligar quimicamente o antigénio solúvel a anticorpos. C) Ligar quimicamente o antigénio solúvel a células dendríticas. D) Ligar quimicamente o antigénio solúvel a partículas de vírus. 15 - Qual o tipo de reação que existe quando os anticorpos se ligam aos receptores de superfície de um vírus, bloqueando assim a ligação viral às células? A) B) C) D) Opsonização Neutralização Aglutinação Inibição 16 - Num teste serológico o título de anticorpos de um doente para o HIV-1 foi de 16. Qual o significado deste valor? A) Um título de 16 indica que 1:16 era a maior diluição do soro que demonstrou uma reacção detectável com antigénio. B) Um título de 16 indica que 1:16 era a menor diluição do soro que demonstrou uma reacção detectável com antigénio. C) Um título de 16 indica 1:16 foi a reação do soro do vírus. D) Um título de 16 indica a relação de 1:16 com o antigénio presente na amostra. 17 - Como se pode fazer a titulação dum soro? A) Preparar uma diluição em série da solução de Ac e adicionar um volume igual de suspensão de Ag para cada diluição. B) Preparar uma diluição em série da solução de Ag e adicionar um volume igual de tampão para cada diluição C) Preparar uma concentração em série da solução de Ac e adicionar um volume igual de suspensão de Ag para cada diluição D) Preparar uma diluição em série do plasma e adicionar um volume igual de Ac para cada diluição. 18 - Numa diluição em série (1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64) não foi detectada nenhuma aglutinação no tubo com diluição de 1:64. O que é o título do anticorpo? A) B) C) D) 32 16 64 Não pode ser determinado. 19 – Se quisesse fazer uma solução de 5 ml de soro com uma diluição de 1:20, qual o volume de soro inicial necessário? A) B) C) D) 0.25 ml 2 ml 0.5 ml 1 ml 20 - O teste de Coombs é utilizado nas seguintes situações clínicas: A) B) C) D) Teste de incompatibilidade de grupo sanguíneo. Doença hemolítica do recém-nascido. A anemia hemolítica auto-imune. Todas as alternativas anteriores. 21 - Qual das seguintes reacções detecta antigénio ou anticorpo por reação colorimétrica? A) B) C) D) Testes de precipitação Testes de fixação do complemento ELISA Testes de aglutinação 22 – Num ELISA indireto, a ordem que os reagentes devem ser adicionados é: A) B) C) D) (1- 3- 2- 1- 4 2- 4 -1 -3 2 -3 -1 -4 4 -2 -1 -3 Anticorpo conjugado; 2-antigénio conhecido; 3- soro do doente; 4 – substrato) 23 – Num ensaio imunoenzimático: A) O anticorpo é ligado a uma enzima, que catalisa a reacção B) Substrato da reacção é convertido para um produto final colorido C) Antigénio ou anticorpo pode ser detectado quantitativamente com extrema sensibilidade. D) Todas as anteriores 24 - A maior desvantagem do ELISA directo é: A) A reactividade cruzada do anticorpo secundário é eliminada B) A reactividade cruzada pode ocorrer com o anticorpo secundário, resultando num sinal não específico C) Conjugar anticorpos primários com enzimas, o que é demorado e caro D) Apenas um anticorpo e menos passos são utilizados 25 - O imunoensaio competitivo pode ser utilizado: A) B) C) D) Para detectar quantidades muito pequenas de antigénio. Para detectar anticorpos associados com alergias (IgE) Ambos (a) e (b) Para detectar vestígios de drogas. 26 - Um resultado positivo em ELISA sanduíche indica que o soro do paciente contém: A) B) C) D) Anticorpo específico Antigénio específico Citoquinas Nenhuma das anteriores 27 - O que aconteceria se o soro do doente fosse omisso do ELISA, mas todas as outras etapas fossem iguais? A) B) C) D) Anti-Ig humana conjugado não iria ligar-se e seria removida nas lavagens Os valores de absorvência seriam praticamente os mesmos que o controlo do ensaio C. Ambos (a) e (b) Anti-Ig humana conjugado ligar-se-ia de forma não específica à placa de ELISA 28 – Num ELISA indirecto, o que aconteceria se o anticorpo anti-humano Ig-conjugado não fosse lavado antes do substrato ser adicionado? A) O ELISA não apresentava coloração quando o substrato fosse adicionado B) O ELISA iria desenvolver-se normalmente C) Todos os poços mostrariam uniformemente o desenvolvimento de cor devido à presença de conjugado anti-humano não ligado e em excesso D) Nenhuma das anteriores 29 - O teste de imunofluorescência é um processo citoquímico pelo qual o antigénio pode ser detectado dentro de tecidos. O princípio do teste é: A) A partir da conjugação ou acoplamento de anticorpos com um composto fluorescente. (Fluorocromo). B) Quando activado pela luz UV, o fluorócromo emite uma luz visível, que é característica do fluorocrómo utilizado. C) Quando activado por luz visível, o fluorócromo emite uma luz UB que é característica do fluorocrómo utilizados D) A e B apenas 30 - Num citómetro de fluxo: A) A quantidade da luz do laser que se dispersa para os lados das células dá informação relativa ao tamanho das células, à rugosidade da superfície das células e complexidade interna. B) A quantidade de luz visível que é dispersa para os lados das células dá informação relativa ao tamanho das células, a rugosidade da superfície das células e complexidade interna. C) As células podem ser separadas por diferenças na sua velocidade de fluxo através de um tubo muito estreito D) Nenhuma das anteriores. 31 - Um imunoensaio foi realizado da seguinte maneira: O antigénio é ligado a um suporte sólido. O soro do doente é adicionado e o poço é lavado. São adicionados os anticorpos antiimunoglobulina humana marcados com enzima. O poço é lavado e substrato de enzima é adicionado e a actividade enzimática é determinada. Qual o nome deste imunoensaio? A) B) C) D) ELISA Sandwich ELISA Competitivo ELISA Indirecto ELISA Homogéneo 32 – O soro é igual ao plasma menos ________________. A) B) C) D) Fibrina Fibrinogénio Factores de coagulação Plaquetas 33 - Durante o processo de isolamento do plasma a partir de uma amostra de sangue, a centrifugação é realizada para sedimentar: A) B) C) D) Eritrócitos Proteínas do soro Linfócitos Macrófagos 34 - Citómetro de fluxo pode ser usado: A) Para contar diferentes subpopulações de linfócitos T em imunodeficiências virais e conhecer o prognóstico do estado de doença B) Para a detecção de anticorpos em pessoas infectadas. C) Para detectar vírus da imunodeficiência nos tecidos de doentes infectados. D) Nenhuma das anteriores. 35- Os parâmetros medidos na citometria de fluxo para o diagnóstico de doenças malignas hematológicas incluem todas as seguintes características, EXCETO: A) B) C) D) Ângulo direto dispersão da luz do laser Ângulo lateral de dispersão da luz do laser Anticorpo ligado superfície por fluorescência Nenhuma das anteriores 36 - O laser direto (Forward angle) de dispersão é proporcional: A) B) C) D) Tamanho da célula Complexidade nuclear / Complexidade citoplasmática Número de núcleos na célula Presença de marcadores proteicos na superfície celular 37 – Para o dot-plot apresentado, diga qual a interpretação verdadeira: Doente A A) B) C) D) Doente B Quadrante esquerdo superior indica os linfócitos B Quadrante direito superior indica linfócitos T O doente A não tem linfócitos B Existem mais linfócitos B que T no doente B 38 – Referente ao quadro anterior e para o doente A, qual a interpretação incorrecta: A) B) C) D) Quadrante esquerdo em baixo indica as células NK Quadrante direito em baixo indica os macrófagos Existem mais linfócitos T que células NK Existem mais linfócitos T citotóxicos que linfócitos B 39 - No quadro anterior, uma subpopulação de células do quadrante inferior direito foi colocada em contacto com IL-2. Qual o ensaio que utilizaria para quantificar este efeito? A) B) C) D) Ensaio de ELISA com antigénio CD8 Ensaio de citotoxicidade com Cr51 Ensaio de proliferação celular com Timidina Tritiada (3[H]) Citometria de fluxo para detectar CD3 na superfície celular 40 – Para o gráfico apresentado nesta pergunta, qual a população celular R1, R2 e R3, respectivamente? A) B) C) D) Neutrófilos, monócitos, macrofagos Linfócitos, monócitos, neutrófilos Células NK, neutrófilos, linfócitos Neutrólifos, linfócitos, monócitos