Efeito de antibióticos para eliminação de agrobacterium no

54º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008
Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
Efeito de antibióticos para eliminação de
agrobacterium no enraizamento in vitro de
brotos de Citrus sinensis L. Osb
Neves, DM; Mendes, AFS; Cidade, LC; Costa, MGC
Departamento de Ciências Biológicas, Universidade Estadual de Santa Cruz, Ilhéus-BA
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Palavras-chave: transformação genética, citros, enraizamento, antibióticos, agrobactéria
A Agrobacterium tumefaciens possui a habilidade de transferir e integrar fragmentos específicos de DNA exógeno no genoma
de uma planta hospedeira, e devido a esta capacidade, esta bactéria tem sido utilizada como uma ferramenta importante
na engenharia genética de plantas. Para uma alta eficiência na obtenção de planta transgênicas, deve-se dispor de um
protocolo de regeneração bem definido associado a um sistema de transformação otimizado para a introdução do gene
de interesse. Em citros, o sucesso na recuperação de plantas transgênicas é relativamente limitado, devido a dificuldades
no enraizamento de brotos transgênicos e influência do genótipo. Portanto, a escolha do antibiótico empregado para
a eliminação de Agrobacterium nos protocolos de transformação genética de citros é extremamente importante, pois
o mesmo não deve promover a inibição do crescimento e a organogênese de brotos ou raízes, não deve ser de custo
elevado, devendo ser estável quando em cultura e principalmente promover a eficiente eliminação da agrobactéria. Os
antibióticos mais utilizados nos trabalhos de transformação genética incluem a cefotaxima, o meropenem e o timentim,
que têm sido utilizados com sucesso para a transformação genética mediada por Agrobacterium de diversas espécies
vegetais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a influência dos antibióticos cefotaxima, meropenem e timentim
no enraizamento in vitro de brotos de duas variedades de laranja-doce [Citrus sinensis (L.) Osb, ‘Pêra’ e ‘Pineapple’].
Ao meio de enraizamento [MS “força completa” e uma combinação das auxinas ácido naftalenoacético (ANA) a 0,5
mg.L-1 e ácido indolbutírico (AIB) a 0,5 mg.L-1] foram adicionados os antibióticos nas seguintes concentrações: 250 ou
500 mg.L-1 de cefotaxima, 150 ou 300 mg.L-1 de timentin ou 6,25 ou 12,5 mg.L-1 de meropenem. Para a variedade
‘Pêra’, o antibiótico meropenem em ambas as concentrações testadas promoveu o maior número de raízes por broto
(3,59) e comprimento de raízes (2,66 cm, em média). Para ‘Pineapple’, não houve diferenças significativas entre os
tratamentos em relação ao número médio de raízes por broto. No entanto, o antibiótico timentim a 150 mg.L-1
promoveu um maior crescimento de raízes (3,78 cm em média) para essa variedade. A análise dos resultados permite
concluir que o efeito dos antibióticos usados para a remoção de Agrobacterium no enraizamento in vitro de citros é
genótipo-dependente, sendo meropenem a melhor opção para a variedade ‘Pêra’ e timentim o antibiótico de escolha
para a variedade ‘Pineapple’.
Apoio financeiro: FAPESB, CAPES e CNPq.
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