UNIPAMPA INTRODUÇÃO A MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS PROFª. DRª. CAROLINE MORAES ESTRUTURAS DOS MICRORGANISMOS (BACTÉRIAS): PÊLOS FLAGELOS GLICOCÁLICE ESPOROS CONDIÇÕES DE CRESCIMENTO TEMPERATURA (psicrófilos, psicrotrófilos, mesófilos, termófilos) 0-20ºC pH ATMOSFERA GASOSA ( aeróbios, anaeróbios, anaeróbios facultativos, microaerófilos) NUTRIENTES EXIGÊNCIAS NUTRITIVAS DOS MICRORGANISMOS -FONTE DE CARBONO Grupo nutricional Fonte de carbono Fonte de energia -FONTE DE NITROGÊNIO (orgânico, inorgânico ou atmosférico) Quimioautotrófico CO2 FÓSFORO -HIDROGÊNIO, OXIGÊNIO, ENXOFRE, -Sódio Quimioheterotrófico Orgânico -Ferro -Zinco Fotoautotrófico CO2 -Cobre FotoheterotróficoPequenas quantidades Orgânico -Manganês -Molibdênio -Cobalto -vitaminas inorgânico orgânico LUZ LUZ Meios bacteriológicos Ágar Meio sintético Meio complexo Microrganismo fastidioso meio complexo Sangue animal soro Meio seletivo – inibe algum microrganismo Meio diferencial – alguma característica que diferencia o microrganismo dos outros Meio seletivo-diferencial Meio enriquecimento Meio de manutenção Meio de análise microbiológica Quanto ao estado físico Sólido : ágar Semi-solido Líquido : caldos Preparo de meios: Adição de água pH Frascos esterilização Coloração de Gram Soluções Reação e aspectos da bactéria Gram + Gram - Células coradas em violeta Células coradas em violeta Sol. Iodo-iodeto (1 min e 30 segundos) Formação do complexo CV-I no interior das células, que permanecem violetas Formação do complexo CV-I no interior das células, que permanecem violetas Álcool-acetona Desidratação da parede celular, diminuição da porosidade e permeabilidade complexo CV-I na pode sair Extração dos lipídios da parede celular, aumento da porosidade complexo CV-I é removido. Células permanecem violeta As células fixam o corante, e torna-se vermelhas Cristal violeta(CV) (1 min) (lavagem) Fucsina básica (30 segundos) REPRODUÇÃO MICROBIANA Fissão binária transversal Maioria das bactérias Brotamento Rhodopseudomonas acidophila Fragmentação do filamento Nocardia Produção de esporos Tempo de geração: intervalo de tempo para que o microrganismo se duplique ou que uma população bacteriana duplica em número g= t/n População total : N= N0 x 2n Para calcular o número de gerações que ocorreram em uma cultura: n= 3,3 (log 10 N – log 10 N0) Curva de crescimento 1- fase lag 2 - fase exponencial ou log 3 - fase estacionária 4 - fase de declínio ou morte Crescimento em cultura contínua Crescimento sincrônico MEDIDAS DE CRECIMENTO Microscopia direta Contagem de colônias em placa (profundidade ou superfície) Contagem com membrana filtrante Determinação da densidade por turbidimetria Determinação da concentração celular por medida de nitrogênio Determinação do peso seco Determinação da massa celular pela verificação de alterações químicas