Faculdade de Medicina Bioquímica I Aprofundar conhecimentos acerca da composição química do sangue Determinar o Hematócrito INTRODUÇÃO O sangue é constituído por plasma e células sanguíneas, de entre as quais se destacam os glóbulos vermelhos. O componente líquido do sangue, o plasma, é composto por água, proteínas, glucose, aminoácidos, lípidos, ureia, ácido úrico, creatina e iões inorgânicos (tabela I). PLASMA CÉLULAS SANGUÍNEAS Líquido de cor amarela (mais ou menos intensa conforme a quantidade de pigmento biliares, carotenos e outros pigmentos) GLÓBULO VERMELHO PLASMA CAPILAR GLÓBULO BRANCO PLAQUETA Tabela I: Principais constituintes do plasma sanguíneo Constituinte g/100 ml de plasma Função Água 90 Solvente; envolvido em reacções celulares Proteínas (Fibrogénio, Albumina, Globulinas) 7 Glucose 0,08 Aminoácidos 0,03 Lípidos 0,75 Ureia; Ácido Úrico, Creatina Iões Inorgânicos Na+, Cl- Coagulação sanguínea; osmolaridade; transporte de substâncias; anticorpos Nutrientes para as células 0,03 Produtos do metabolismo a serem transportados para os rins 0,90 0,69 Manter a osmolaridade do sangue, dos líquidos intersticiais e das células; manter constante a composição do ambiente interno; tampões Glóbulos Vermelhos / Hemácias / Eritrócitos (42-47%) Transportam O2 dos pulmões para os tecidos e o CO2 dos tecidos para os pulmões. Glóbulos Brancos / Leucócitos (1%) Realizam a fagocitose; Plaquetas Sanguíneas Coagulam o Sangue Formam anti-corpos. Tabela II: Componentes celulares do sangue Células Eritrócitos: Homem Mulher Leucócitos: Granulócitos – Neutrófilos – Eosinófilos – Basófilos Linfócitos Monócitos Plaquetas Células/mm3 de sangue 5,6 x 106 4,8 x 106 5000 – 10000 5500 300 50 2800 550 3 x 105 Função Transporte de O2 dos pulmões para oa tecidos; transporte de CO2 dos tecidos para os pulmões Fagocitose Fagocitose --Formação de anticorpos Fagocitose de vírus, fungos e protozoários Coagulação sanguínea Elementos figurados mais abundantes do sangue Contêm hemoglobina Não têm núcleo nem organelos nos mamíferos, daí o seu tempo de vida limitado (cerca de 120 dias) Produzidos na medula óssea e degradados no baço e no fígado, à mesma velocidade Não se reproduzem Têm forma bicôncava A sua função é a de intervenção na resposta imunitária, dado as suas propriedades de: Emissão de pseudópodes e, consequentemente, de fagocitose; Diapedese, isto é, abandono do tecido sanguíneo e sucessiva penetração nos tecidos conjuntivos. Dividem-se em: Monócitos - diferenciam-se em macrófagos, estruturas responsáveis pelo processo de fagocitose. Linfócitos - produzem anticorpos, através da sua transformação em plasmócitos. Basófilos - secretam histamina, um mediador importante da resposta inflamatória. Eosinófilos - atacam parasitas multicelulares e estão envolvidos em respostas alérgicas. Neutrófilos - também são responsáveis pela fagocitose. Neutrófilo Eosinófilo Basófilo Linfócito Monócitos Derivam dos megacariócitos. São anucleadas Participam sanguínea) na formação da Tromboplastina (coagulação Durante a coagulação, a proteína solúvel fibrinogénio polimeriza em fibras longas de fibrina numa reacção catalizada pela trombina na presença de cálcio. A formação de um coágulo é muito importante uma vez que sela os vasos sanguíneos lesados evitando o extravasamento de sangue. Pode evitar-se a coagulação do sangue através de anticoagulantes. Ex: oxalato, heparina,etc. Transportam Serotonina (responsável pela vasoconstrição) Hematócrito Relação entre o volume total dos eritrócitos do sangue e o volume total deste. Obtém-se por centrifugação rápida de uma colheita de sangue tornado incoagulável, num tubo estreito graduado. Muitas vezes usa-se em vez da contagem dos glóbulos vermelhos como indicação diagnóstica em casos em que se suspeita de alteração do número de glóbulos vermelhos na circulação. Altura ocupada pelos glóbulos vermelhos Hematócrito = ___________________________________ Altura ocupada pelo sangue X 100 Constitui uma alternativa mais fiável e rápida à contagem das hemácias, em diagnósticos onde existe uma suspeita de alterações do número destas células sanguíneas. Pode ser feito mais rapidamente do que uma contagem dos glóbulos vermelhos Tem uma probabilidade menor de erro do que uma contagem dos glóbulos vermelhos Como determinar o hematócrito? Qual o significado em termos clínicos? Centrifugação de um pequeno volume de sangue Separação dos diferentes componentes do sangue Medição e determinação do Hematócrito Análise do Hematócrito mediante tabelas padrão = Volume ocupado pelas células sanguíneas Volume ocupado pelo sangue Valores Teóricos Hematócrito 41% Volume Sanguíneo 5,00L Volume Plasmático (V.P.) 2,95L Volume Globular (V.G.) 2,05L NOTA: O aumento do V.G. é o grande responsável pelo aumento do volume do sangue circulante. Aumento do Volume Plasmático Aumento do Volume Plasmático Volume Plasmático normal ou aumentado Aumento do Volume Globular Sobrecarga devido a transfusão Volume Globular normal Retenção de água; Sobrecarga de líquido no decurso de uma reanimação Aumento do Volume Globular Doença de Vaquez; Insuficiência respiratória crónica Diminuição do Volume Plasmático Diminuição do Volume Plasmático Volume Plasmático normal Diminuição do Volume Globular Hemorragia recente Volume Globular normal Hemoconcentração dos estados de choque; Desidratação Diminuição do Volume Globular Hemorragia em via de compensação; Anemias diversas TRABALHO LABORATORIAL MATERIAL Tubo capilar Plasticina PROCEDIMENTO Obteve-se uma gota de sangue da ponta Centrifugadora Régua Agulha esterilizada Amostra de sangue de um dedo; Tocou-se no centro da gota de sangue com um tubo capilar de 7,5cm de comprimento e aspirou-se para o encher até cerca de 6cm (o sangue subiu por capilaridade); Vedou-se as pontas do tubo com plasticina; Colocaram-se os tubos capilares em dois tubos de centrífuga de mesa e centrifugaram-se a 3000 rpm durante 5 min; Mediu-se a altura ocupada pelos glóbulos vermelhos e a altura ocupada pelo sangue e calculou-se o hematócrito. RESULTADOS Foram utilizados 2 tubos capilares : Altura Tubo A Tubo B X 1,45 cm 1,8 cm Y 3,4 cm 4,1 cm Hematócrito = X Y x 100 RESULTADOS Valor Teórico = 41% TUBO A Hematócrito = 1,45 × 100% 3,4 TUBO B = 42,6% 3,4 cm 1,45 cm 4,1 cm Hematócrito = 1,8 × 100% 4,1 = 43,9% 1,8 cm Plasma Diferenciação da amostra em 3 porções Glóbulos Vermelhos Glóbulos Brancos Diferentes densidades dos constituintes do sangue 42,6% VALORES OBTIDOS NOS HEMATÓCRITOS VALORES TEÓRICOS DOS HEMATÓCRITOS 43,9 % 41% 40% a 54% para os Homens 38% a 47% para as Mulheres Podemos concluir que ambos os indivíduos aos quais foram retiradas as amostras de sangue tinham uma quantidade normal de glóbulos vermelhos. Consolidação de conhecimentos relativos à constituição do sangue e a determinação do hematócrito. Determinação do hematócrito é uma técnica simples, eficaz e muito prática que permite identificar rapidamente a proporção de glóbulos vermelhos no sangue e, consequentemente, inferir acerca da existência de diversas patologias. Para que o diagnóstico seja o mais correcto possível é necessário que sejam efectuados outros exames não sendo possível para um médico basear-se apenas no resultado do hematócrito.