Vetores virais - Google Groups

Vetores virais
-Inserção de uma molécula de DNA, que expressa os
genes virais de interesse
- Vírus não patogênico
-Experimentos: influenza, sarampo, HIV, HBV e raiva
- Mais imunogênicos: plasmídeos
- Limitação:
- Neutralização nos hospedeiros imunizados(vetor)
- Reforços: neutralização por células de memória
Vetor viral para vacina ou terapia gênica
- Objetivo principal: introdução de informação
genética na célula alvo (transferência de genes).
-Transdução: introdução de material genético em
uma célula alvo utilizando uma partícula viral como
veículo.
Vetor adenoviral
• Genes E1A, E1B e E3 podem ser deletados, deixando
espaço para inserção de genes de interesse.
• Proteínas E1A e E1B: replicação do vírus.
• Os genes que codificam para essas proteínas são
transferidos
para
(complementação).
células
que
passam
a
produzi-las
Vetor retroviral
Fase inicial do
ciclo replicativo
Primeira
terapia
gênica
liberada para o mercado:
Glybera
Deficiência
da
lipoproteína
lipase:
• afeta o metabolismo de
lipoproteínas
• causa
inflamação
pâncreas
• doença genética
• mutação no gene
do
Vetor de vírus adeno-associado
Características:
• Não é conhecido por causar
doença
provoca
em
humanos
resposta
–
imune
leve
• Infecta somente células em
divisão
• Não integra no cromossomo
Glybera:
• Um vial: 3 x 1012 cópias
do genoma
• 12 injeções nos músculos
das pernas
• Dose de 1 x 1012 gc/kg do
paciente
Antivirais
• 1955: inibir o vírus Vacínia
• 1963: prevenção da varíola
• Difícil: dependem da célula viva
• Tentam interferir na infecção de novas células
• Tentam interferir na produção de novos vírus
Inibição da adsorção: receptores solúveis
Desvantagens:
• Custo alto
• Tem que ser administrado
com freqüência
-Mais utilizados: análogos de nucleosídios
- Atuação: DNA viral e celular → tóxicos
- Aciclovir: desprovido de toxicidade
-Atuação do antivirais
-Entrada e saída da célula
- Enzimas virais
- Transcriptase reversa
- Pesquisa racional: simulação em computador,
estruturas virais e biologia molecular
Interação
vírus-receptor
Vista
superior
Revisão sobre síntese de ácidos nucleicos
-Base nitrogenada
-Subunidades: nucleotídeos
- Um açúcar
- Três fosfatos
DNA
-Citosina
-Citosina
-Guanina
-Guanina
-Adenina
-Timina
RNA
-Adenina
-Uracila
-Nucleosídeos = base + açúcar
-Transcrição: fita molde é copiada em nova fita
- Enzimas: DNA OU RNA polimerases
- Tradução: síntese de proteínas
Sítios de atuação de um antiviral
-Interferência da adsorção;
- Inibição do desnudamento;
- Inibição
da
transcrição
inicial:
evitando
a
montagem
e
produção de enzimas;
- Interferência na tradução;
- Inibindo a replicação;
-Interferência
no
processo
maturação;
-Inibição do brotamento.
de
Etapas da replicação viral
-Terapia combinada: diminuir a toxicidade e seleção de
mutantes resistentes
- Profiláticos:
-mais rápido do que as vacinas, uma
hora
- interferem com a biossíntese
- virucidas (gel ou pomada)
- HIV e HSV
- Terapêuticos:
-Administrados após a infecção
- reduzir a disseminação viral
Etapas no desenvolvimento antiviral
-Fases: pré clínica e clínica
- ANVISA, FDA
Fase pré clínica
-Cultura de células: citotóxica e ação
- Animais ( 3 a 4 anos)
-I: humanos sadios: metabolismo
Fase clínica
- II: confirmação do efeito antiviral
-III: aumento do número de pacientes
- IV: resultados submetidos a avaliação
Prateleiras: 10 a 12 anos
-Maioria: análogos de nucleosídeos
- Ação inibidora: polimerases virais
- Inibição competitiva, ligação do fármaco à polimerase
- Bloqueio da síntese do acido nucleico por ligação da droga a
enzima
- Impede a entrada dos vírus
-Não é capaz de cura
- Antiviral
- diminuem os sintomas
- reduz a duração da doença
- melhora a qualidade de vida.
INIBIDORES
Inibição da adsorção: anticorpos
Para tratamento e/ou prevenção: VRS e HBV
Antivirais análogos
de nucleosídios
Antivirais para o tratamento da gripe
Relenza
Symmetrel
Flumadine
Tamiflu
Droga antiviral ideal
• Solúvel em água
• Estável na corrente sangüínea
• De fácil penetração nas células
• Não deve ser:
Tóxica
Carcinogênica
Alergênica
Mutagênica