Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro

Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral
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ESTABELECIMENTO DA MENOR CONCENTRACAO INIBITORIA DE
CIPROFLOXACINA SOBRE O CRESCIMENTO PLANCTONICO DE
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Maria Laína Silva
Yara Maria Vieira dos Santos
Humberlânia de Sousa Duarte
Rodrigo Maranguape Silva da Cunha
Victor Alves Carneiro
INTRODUÇÃO: Staphylococcus aureus é encontrada colonizando a flora natural,
principalmente da pele, podendo tornar-se patogênico em condições como a quebra da barreira
cutânea ou diminuição da imunidade (GELATTI et al, 2009). É responsável por uma grande
variedade de infecções, entre elas, infecções pós-cirúrgicas, osteomielites, pneumonias,
abscessos, endocardites e bacteremia (LOWY, 1998). É umas das causas mais comuns de
infecções nosocomiais, bem como de infecções comunitárias que podem apresentar altos índices
de morbidade e mortalidade (SALES et al, 2012). No combate a esse patógeno está a
ciprofloxacina (CIP) que faz parte de uma importante classe de antibióticos sintéticos,
conhecidos como fluoroquinolonas (APPELBAUM et al, 2000), que têm sido objeto de intensos
estudos. Esta classe de compostos, tem atualmente destacada importância no combate a
diferentes tipos de bactéria, sendo os únicos agentes antimicrobianos sintéticos a competirem
com os β-lactâmicos em uso clínico (APPELBAUM et al, 2000). Porém, o uso extensivo,
muitas vezes inapropriado dos antibióticos, aliado com as más condições de higiene, aos fluxos
contínuos de viagens, ao aumento de pacientes imunocomprometidos e a demora no diagnóstico
das infecções bacterianas favorece o aumento nos índices de desenvolvimento de resistência
(GUIMARÃES et al, 2010). OBJETIVO: Identificar a menor concentração de CIP capaz de
inibir o crescimento planctônico da bactéria Staphylococcus aureus ATCC 25923.
MATERIAL E MÉTODOS: Para o experimento realizado foram utilizados os métodos de
determinação da Concentração Inibitória Mínima e Bactericida (CIM) e (CBM) para avaliar a
eficácia da ciprofloxacina (CIP) sobre o crescimento planctônico de S.aureus ATCC 25923.
Logo, a partir de uma cultura estoque, 50μL do micro-organismo foram inoculados em 5 mL de
meio BHI (Brain Heart Infusion) e incubado por 24 h, a 37 °C, em condições de aerobiose.
Após 24 horas foi realizado um segundo repique, no qual uma alíquota de 50 μL da suspensão
bacteriana foi transferida para 5 mL de meio estéril. Após 18h de crescimento, deu-se início à
avaliação da atividade antimicrobiana da CIP. Por meio do teste de microdiluição em placas de
poliestireno de 96 poços de fundo “U”, foi realizada a diluição seriada da substância teste,
obtendo as concentrações finais (125 a 0.06μg/mL). Em seguida, os poços foram preenchidos
com uma alíquota de 100 μL da suspensão bacteriana em uma concentração previamente
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ajustada de 1 x 106 UFC.mL-1, obtendo um volume final de 200 μL. As placas foram então
incubadas nos mesmo parâmetros descritos anteriormente e o crescimento bacteriano foi medido
pela densidade óptica a um comprimento de onda de 620 nm, através de um sistema
automatizado Elisa Reader, onde a análise dos dados ocorreu nos tempos 0 e 24 h. Para
determinação da CBM (Concentração Bactericida Mínima), após 24 horas de incubação a placa
foi analisada e dos poços que não apresentaram crescimento microbiano visível foram retirados
10 μL e inoculados em placas de petri contendo meio BHI Ágar e novamente incubadas.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Mediante os dados obtidos através dos testes de CIM e
CBM, evidenciou-se que a CIP demonstrou atividade antimicrobiana estatisticamente relevante
contra o micro-organismo S. aureus ATCC 25923, onde a CIP apresentou capacidade de
interferência no crescimento do micro-organismo em questão, nas concentrações de 125 até 0,48
μg/mL, considerando-se p<0,001 em relação ao controle negativo. Os valores da CIM e CBM
foram de 0,48 ug.mL-1, o que significa que a Concentração Inibitória Mínima não é apenas
bacteriostática, apresentando também efeito bactericida sobre o micro-organismo em estudo.
CONCLUSÃO: A busca por menores concentrações de antibióticos convencionais tem como
finalidade determinar quantidades reduzidas de determinada substância, as quais possam
apresentar a mesma eficácia na inibição do crescimento bacteriano, quando comparado a
concentrações padrão. Isso poderá promover uma menor exposição dos pacientes a esse tipo de
fármaco, o que vem a refletir na redução dos índices de desenvolvimento de resistência
provenientes da utilização exarcebada e indiscriminada destas medicações.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
APPELBAUM, P.C.; Hunter, P.A. The fluoroquinolone antibacterials: past, present and
future perspectives. Int. J. Antimicrob. Ag, 16, 5-15, 2000
GUIMARÃES, D. O. et al. Antibióticos: importância terapêutica e perspectivas para a
descoberta e desenvolvimento de novos agentes. Vol. 33, Nº. 3, 667-679. São Paulo, Ribeirão
Preto, 2010.
GELATTI, L. C. et al. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus: emerging community
dissemination. An Bras Dermatol.; 84(5):501-6. 2009
LOWY F. D. Staphylococcus aureus infections. N Engl J Med. 339:520-32. 1998
SALES L. M., SILVA T. M. Staphylococcus aureus meticilina resistente: um desafio para a
saúde pública. Biomedica Brasiliensia. Vol. 3, Nº.1, 2236-0867. 2012.