56º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 56º Congresso Brasileiro de Genética • 14 a 17 de setembro de 2010 Casa Grande Hotel Resort • Guarujá • SP • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2 23 Efeito da qualidade morfológica do oócito bovino na cinética de desenvolvimento embrionário in vitro Lemes, RC1,2; Elias, FP1; Renzi, A1; Vila, RA1; Lôbo, RB1 Laboratório de Micromanipulação de Embriões, Departamento de Genética, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo. 2 Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo. [email protected] 1 Palavras-chave: qualidade oocitária, complexo cumulus-oócito, blastocisto, bovino, fertilização in vitro Introdução: Durante o processo de oogênese, células germinativas se transformam em oogônias e posteriormente em oócitos, os quais são envoltos por células somáticas, (entre elas as células do cumullus oophorus) e juntos formam o folículo, uma unidade fisiológica equilibrada cujas estruturas e funções dependem de interações intrafoliculares e de fatores extracelulares. Ao longo de toda a foliculogênese, a comunicação existente entre o oócito e as células do cumulus se intensifica, evidenciando a importância dessas células para o completo desenvolvimento do oócito e vice-versa. Através das junções do tipo gap ocorre a transferência de moléculas de pequeno peso molecular, necessárias para o crescimento oocitário, tais como, metabólitos, íons, aminoácidos e nucleotídeos, assim como pequenas moléculas reguladoras. Objetivos: Com base na importância da troca bidirecional entre o oócito e as células do cumulus, esse trabalho visa analisar qual a dimensão dessa interação para o desenvolvimento embrionário in vitro, por meio da análise de embriões, em estádio de blastocisto, frutos de fertilizações in vitro de complexos cumulus-oócito de diferentes qualidades morfológicas com sêmen de um único touro. Métodos: Oócitos de grau I, II e III foram extraídos de ovários de vacas abatidas em matadouro, sendo coletados 206, 275 e 302, respectivamente, em três repetições. Estes foram maturados, separadamente, em meio TCM199 com sais Earles, glutamina, NaHCO3, 22µg piruvato/ml, 83µg sulfato de amicacina/ml, 10% SFB, 0,5µg FSH/ml, 50µg LH/ml e 1,0µg estradiol/ ml, por 24 horas a 38,5 oC, 5% CO2 em atmosfera. Em seguida, foram fecundados com sêmen de um único touro com concentração de 2 milhões de sptz/ml, em meio TALP suplementado com 10µl heparina/ml, 22µl piruvato/ml, 83µl sulfato de amicacina/ml, 6µg BSA sem ácidos graxos/ml e solução PHE. Após 12 horas, os supostos embriões foram transferidos para meio CR2 acrescido de 10% SFB e 83µl sulfato de amicacina/ml. Após 168 horas da fertilização, foi feita uma contagem do número de embriões viáveis. Resultados: A análise estatística por meio de ANOVA (α=0,05) mostrou que a taxa de fertilidade (número de embriões viáveis/número de oócitos) é significativamente diferente entre os três graus (p<0,0002). Conclusões: A qualidade morfológica do oócito influencia na quantidade de embriões viáveis, portanto, é possível afirmar que as células do cumulus interagem ativamente com o oócito, possuindo uma importante função durante a foliculogênese, a fertilização e o desenvolvimento embrionário pré-implantacional. Apoio Financeiro: FAPESP, PROEX, PAEX.