Comparação do Padrão da Expressão Gênica em Linhagens

56º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 56º Congresso Brasileiro de Genética • 14 a 17 de setembro de 2010
Casa Grande Hotel Resort • Guarujá • SP • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
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Comparação do Padrão da Expressão Gênica em
Linhagens Celulares Leucêmicas com e sem o
Fenótipo de Resistência a Múltiplas Drogas
Bagni, C1,2; Pinho, MB3; Pinto-Silva, FE4; Rumjanek, VM4; Moreira, MAM1
Divisão de Genética, Centro de Pesquisa, INCA, RJ
Departamento de Genética, Instituto de Biologia, UFRJ, RJ
3
Laboratório de Bioinformática e Biologia Computacional, Divisão de Pesquisa Clínica, Centro de Pesquisa, INCA, RJ
4
Instituto de Bioquímica Médica, UFRJ, RJ
[email protected]
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Palavras-chave: expressão gênica, resistência a múltiplas drogas, MDR, microarray, linhagens leucêmicas.
O fenótipo de Resistência a Múltiplas Drogas (MDR) confere às células mecanismos de resistência simultânea a
diferentes agentes citotóxicos não relacionados, resultando na incapacidade da droga em induzir a morte celular,
permitindo que células tumorais sobrevivam, afetando a resposta dos pacientes ao tratamento quimioterápico.
Existem múltiplos mecanismos que contribuem para este fenótipo: falha na regulação da apoptose, aumento
na detoxificação intracelular, alteração no reparo de danos ao DNA, e ativação ou superexpressão de proteínas
transportadoras de drogas. Neste trabalho procuramos compreender os mecanismos de desenvolvimento de
resistência a múltiplas drogas de maneira global, utilizando a metodologia dos microarranjos de DNA. Foi feita uma
análise comparativa da expressão global entre três linhagens celulares leucêmicas: duas linhagens MDR (Lucena,
selecionada com vincristina e FEPS, selecionada com daunorubicina) e uma linhagem sensível parental (K562).
Utilizando a plataforma Affymetrix, o RNA total das linhagens foi hibridado em microarranjos de oligonucleotídeos
e os dados de expressão gênica foram analisados através do programa R e a classificação da ontologia gênica
pelo software Ingenuity Pathway Analysis. Quando comparadas à linhagem parental, Lucena apresentou 130
genes diferencialmente expressos (65 induzidos e 65 reprimidos) e FEPS apresentou 932 genes diferencialmente
expressos (288 induzidos e 644 reprimidos). Ao comparar as linhagens resistentes entre si, cultivadas na presença e
ausência de droga, nenhum gene mostrou-se diferencialmente expresso. Entre Lucena e FEPS foi possível observar
1211 genes diferencialmente expressos, 459 induzidos e 752 reprimidos em FEPS. O gene diferencialmente
expresso com maior valor absoluto de expressão nas comparações entre as linhagens MDR e a linhagem parental
foi MDR1, o gene que codifica Pgp, principal mecanismo relacionado ao fenômeno MDR, confirmando os
fenótipos das linhagens resistentes já descritos na literatura. As vias funcionais que mais se destacaram entre os
genes diferencialmente expressos em Lucena e FEPS foram: morte celular (apoptose), desenvolvimento celular,
crescimento celular e proliferação, e ciclo celular, que são vias relacionadas à viabilidade e sobrevivência celular.
Apoio Financeiro: Ministério da Saúde, CNPq, FAPERJ, FAF, Convênio INCA/FIOCRUZ e Swiss Bridge Foundation.