Escola Básica e Secundária de Machico Actividade Laboratorial nº6 – Observação da flora bacteriana do iogurte Princípios: Discussão: As bactérias são seres procariontes unicelulares, marcados pela sua simplicidade estrutural e funcional, cujo DNA é uma molécula circular, dispersa pelo citoplasma e não associada a proteínas. Apresentam uma enorme plasticidade adaptativa, residindo em ambientes com condições extremas; As bactérias podem assumir diversas formas e dimensões (normalmente de 1 a 5 µm). De acordo com a sua estrutura podem designar-se de Cocos (esféricas), bacilos (forma de bastonete), vibrões (forma de virgula), e os espírilos (espiraladas). As Cocos podem assumir diferentes aspectos de acordo com a maneira como estão dispostas; As bactérias segundo o sistema de classificação de Whittaker, pertencem ao reino monera pois é o único que assume seres procariontes unicelulares; A visualização das bactérias em microscopia óptica exige coloração de modo a realçar o contraste óptico entre as células e o meio (através dos azul-demetileno – sal designado de cloreto de metileno), facilitando a visualização; Para a visualização das bactérias também são necessárias outras técnicas citológicas: o esfregaço e a fixação. Conceitos: Célula Procariótica Reino Monera DNA Bacteriano Aspectos morfológicos Esfregaço Fixação Azul-de-metileno Que aspectos morfológicos podem assumir as bactérias? As bacterias são a forma numericamente dominante da vida na terra podendo habitar ambientes extremos, impossíveis para outros organismos. Obsevou-se bactérias da flora bacteriana do iogurte (bactérias lácteas), nomeadamente Streptococcus termophilas e Lactobacillus bulgaricus. De acordo com a sua morfologia, as bactérias distinguem-se em cocos (esféricas, podendo constituir colónias), bacilos(forma de bastonete e possuem endoesporos), vibroões (forma de virgula e possuem flagelo) e espirílos ou espiroquetas (espiraladas). As mais abundantes na flora bacteriana foram os cocos, designados de varias formas de acordo com a sua disposição. Os diplococos, quando estão aos pares, os estreptococos quando dispostos em cadeia e as estafilococos quando agrupados em cacho. Os Streptococcus são constituídos por cocos numa forma linear enquanto os Lactobacillus apresenta uma forma mais extensa. Para podermos observar este tipo de bactérias foi necessário recorrer a três técnicas citológicas, coloração, esfregaço e fixação. O azul-de-metileno faz realçar as células, permitindo a visualização e identificação dos vários tipos morfológicos (coloração). O esfregaço tem por objectivo fazer aderir a uma lâmina de vidro elementos celulares, de modo a ficarem dispostas numa monocamada, e a técnica de fixação inibe a actividade enzimática das células, preservando as características morfológicas e citológicas das bactérias. Um iogurte possui milhões de bactérias que se combinam entre si conferindo o sabor ácido dos iogurtes. Conclusão: Apesar da grande simplicidade dos seres procariontes, estes são os responsáveis por toda a vida na terra. Estão na origem dos organismos mais complexos, formando seres eucarioentes, colónias e a partir destas levou à formação de seres Multicelulares, construindo aos poucos o mundo em que vivemos. Objectos: Observação da flora bacteriana do iogurte -Colocar uma gota de água na lamina, juntar uma pequena porção de iogurte e misturar; -Com a ajuda de uma ansa de inoculação, estender a amostra através da técnica de Registo do resultado: esfregaço; -Secar á chama da lamparina de modo a fixar a amostra (Fixação) -Retirar o excesso de gorduras, deitar uma gota de álcool e deixar secar; -Corar com azul-de-metileno (3 a 5min) -Lavar com água e deixar secar; -Observar ao microscópio com a lente de imersão; Fig.1 Observação a microscopia óptica de Streptococcus termophilos e Lactobacillus bulgaricus (1000x Lente de imersão) Legenda: 1-Streptococcus termophilos; 2-Lactobacillus bulgaricus 1 2