Otimização do protocolo de regeneração e brotamento de morango

56º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 56º Congresso Brasileiro de Genética • 14 a 17 de setembro de 2010
Casa Grande Hotel Resort • Guarujá • SP • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
229
Otimização do protocolo de regeneração e brotamento
de morango (Fragaria ananassa e Fragaria vesca)
advindos de transformação genética via Agrobacterium
Pinto, NA; Haiter, JAC; Aragão, FJL; Tavares, LS
Laboratório de Genética, Universidade Federal de Juiz de Fora - MG
[email protected]
Palavras-chave: transformação genética, Fragaria, regeneração,brotamento,OXDC.
Crescimento e regeneração in vitro são fenômenos complexos e influenciados por vários fatores ambientais e
genótipo da espécie estudada. Como cada espécie parece ter seus próprios requerimentos, existem vários relatos
sobre as substâncias e as condições que ajudam as células a se diferenciar. No caso das espécies de morango
ocorrem ploidias variadas de origens diferentes, criando variações nos processos de regeneração que dificultam
a seleção de plantas transgênicas. A transformação genética é uma alternativa atrativa para programas de
melhoramento de Fragaria e outras espécies, porque mantém a integridade do cultivar enquanto adiciona uma
característica específica. As dificuldades de cruzamento entre cultivares de morangueiro devido à sua natureza
poliplóide limitam as transformações genéticas ao cultivar desejado. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o
melhor sistema de regeneração para a cultivar Dover (cultivar livre de proteção intelectual) de Fragaria ananassa
e Fragaria vesca (comercial Feltrin), cocultivados com Agrobacterium. Para este fim foram testados meios de
cultura contendo duas citocininas, BAP (benzil aminopurina) e TDZ (thiadizurom) nas espécies Fragaria ananassa
(Dover) e Fragaria vesca. Os explantes foliares foram cocultivados com uma linhagem de Agrobacterium contendo
o plasmídio pC 1390-OXDC por 30 minutos e posteriormente cultivados em meio MS contendo phytagel (2 - 2,5%),
glicose (2%), higromicina (1 mg/L), timentin (200 mg/L) para eliminar a bactéria e hormônios. Um dos tratamentos
incluía a utilização dos hormônios BAP (3 mg/L) e AIB (0,5 mg/L) e o outro incluía TDZ (2 mg/L) e AIB (0,5 mg/L).
Conclusões: O maior número de regenerações e brotamentos foi obtido em meio com TDZ para ambas as espécies.
Estes meios foram testados na regeneração e brotamento das duas espécies provenientes de experimentos de
transformação genética com gene da oxalato descarboxilase contendo o gene da higromicina como agente seletivo.
Novamente, para ambas as espécies o melhor meio de produção de calos transformados foi aquele contendo
TDZ. Assim, este meio vem sendo utilizado na regeneração de plantas transgênicas para resistência a fungos.
Apoio: CNPq; FAPEMIG