0410113: DIVERSIDADE BIOLÓGICA E FILOGENIA AULA PRÁTICA 5) Alveolados: Ciliados Objetivos: Caracterização e organização geral dos alveolados ciliados. Organismos heterótrofos e móveis, mantidos em cultura. Parte I - Observação de Paramecium (paramécio). Parte II - Diversidade de ciliados: Blepharisma (paramécio-rosa) e outros. Parte I - Paramecium 1) Coloque uma gota do meio de cultura com paramécios sobre uma lâmina. Pingue uma gotícula de nanquim diluído sobre essa mesma preparação e cubra-a com uma lamínula. Vá retirando cuidadosamente parte do líquido sob a lamínula, com auxílio de um pedaço de papel filtro. Acompanhe essa operação ao microscópio, em menor aumento, até que os ciliados tenham sua locomoção dificultada. O nanquim facilita a observação dos movimentos ciliares e é ingerido pelo paramécio de modo a permitir a observação da região do citóstoma e a formação de vacúolos digestivos, bem como esses vacúolos já formados dentro da célula. Agora, focalize com o aumento médio ou maior pelo menos um dos paramécios e observe seu comportamento. Desenhe-o, indicando com legendas as seguintes regiões ou estruturas celulares: a) Região do citóstoma e da citofaringe. b) Vacúolos digestivos. b) Número, forma e localização dos vacúolos contráteis ou pulsáteis. Descreva o funcionamento dessas organelas e diga qual a importância delas para as células desses organismos. c) Extrussomos do tipo tricocistos localizados na periferia do citoplasma: aparecem como diminutas estruturas dispostas lado a lado. 2) Faça uma nova preparação, colocando sobre a lâmina uma gota de meio de cultura. Cubraa com a lamínula e focalize-a ao microscópio no menor aumento. Passe para o aumento médio e, num dos lados da lamínula, pingue uma gotícula de solução de formol 1% + azul de metileno. O formol é uma substância que provoca irritação seguida de morte celular, e o azul de metileno cora em especial ácidos nucléicos. Com auxílio de um papel absorvente colocado do lado oposto de onde há a gota na lâmina, puxe a água de modo a permitir a entrada dessa solução e o contato dela com os paramécios. Observe o que acontece com esses organismos ao entrarem em contato com essa solução. Faça um desenhe registrando o que observou. a) O que são os filamentos vistos ao redor dos paramécios imobilizados? Onde estavam abrigados na célula viva em condições normais? Quais são as suas prováveis funções? b) Verifique se é visível um corpúsculo mais intensamente corado pelo azul de metileno. Em caso positivo, a que corresponde? Parte II - Diversidade de ciliados 1) Faça uma nova preparação, colocando sobre a lâmina uma gota de meio de cultura com Blepharisma (paramécio-rosa). Cubra-a com a lamínula e focalize-a ao microscópio no menor aumento. Passe para o aumento médio. A cor rósea de Blepharisma se deve a um pigmento chamado blefarismina que fica armazenado em pequenas vesículas membranosas localizadas próximas à membrana plasmática. Este pigmento atua como um fotorreceptor e está relacionado com o comportamento fotofóbico desses organismos, que preferem locais com baixa luminosidade. Desenhe este organismo. a) Cite as principais diferenças observadas nestes ciliados em relação ao que observou no Paramecium. 2) Faça uma nova preparação outros ciliados que estiverem disponíveis. Observe-os ao microscópio e desenhe-os, procurando identificar as estruturas celulares.