dEtERminAÇÃo dE SiStEmA “in VitRo” moRtE CELuLAR PoR

lou organização glandular e morfologia normal
da linhagem tumoral. Por outro lado, as células
tratadas com jararagina mostraram significativa
desorganização dos microfilamentos de actina e
condensação da cromatina nuclear comparada
as células do grupo controle. CONCLUSÃO - A
cultura 3D mostrou-se estruturalmente semelhante
à formação esferoidal de tumores avasculares in
vivo, por isso tem avançado em diversas linhas
de pesquisa tornando-se um modelo alternativo
bastante utilizado na avaliação do microambiente
tumoral para o desenvolvimento e validação de
testes de novos fármacos. CEAU/INSTITUTO
BUTANTAN: I-1187/13. Suporte Financeiro:
FAPESP 2012/18256-9.
DETERMINAÇÃO DE SISTEMA “IN VITRO” MORTE
CELULAR POR AUTOFAGIA EM LEUCEMIAS
Thais de Oliveira Conceição; Manuela Garcia
Laveli da Silva; José Alberto Lorenço da Costa
Moreira; Durvanei Augusto Maria
Laboratório Bioquímica e Biofísica, Instituto Butantan,
São Paulo, Brasil. [email protected]
INTRODUÇÃO: Autofagia é um processo
celular fisiológico para degradação e reciclagem
de componentes do citosol e organelas celulares
danificadas, para manutenção da homeostase
celular em condições adversas como privação de
nutrientes, presença de patógenos e toxinas. A Jararagina é uma metaloproteinase tipo disintegrina
isolada do veneno de Bothrops jararaca capaz de
induzir diminuição da viabilidade e inibição da
adesão celular. OBJETIVO: Avaliar os efeitos
da toxina antiproliferativa e pró-apoptótica por
autofagia em células leucêmicas K-562 e a formação de radicais livres. MÉTODOS: As células
leucêmicas foram tratadas por 24hs com Jararagina em diversas concentrações para realização
do método colorimétrico MTT. Os sobrenadantes
foram recolhidos e medidos a produção de produtos da peroxidação por TBARs. As alterações
na morfologia e formação de vacúolos foram
analisadas com Microscopia Confocal a Laser
pela distribuição da acridina-orange (AO), sendo
um corante fluorescente metacromático que tem
sido utilizado para avaliar a apoptose por auto-
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fagia, medir a adesão dos leucócitos e marcação
lisossomal, utilizado para marcação lisossomal,
o interior dos lisossomas é caracterizado por um
pH baixo (conteúdo rico em enzimas digestivas),
o que permite a sua marcação específica por parte
do fluorocromo AO. AO é uma base fraca com
capacidade de penetrar a membrana plasmática
e lisossomal. Ao entrar nos lisossomas com conteúdo acídico, a AO é protonada e aprisionada.
RESULTADOS: As células tumorais tratadas com
Jararagina, mostraram aspectos morfológicos de
lise, a partir da concentração de 2,5 nM. As demais
concentrações mostraram efeitos citotóxicos, com
aumento percentual da mortalidade celular e perda
da progressão dos prolongamentos citoplasmáticos. A microscopia Confocal a laser morte celular
por autofagia demonstrou a formação de corpos
apoptóticos, vacuolização de lisossomos e condensação da cromatina nuclear. CONCLUSÃO:
O tratamento com Jararagina mostrou toxicidade
na linhagem celular de leucemia com IC50% de
2,5 nM. Mudanças na morfologia, à cinética do
crescimento celular e sugere que a toxina induz
a morte celular por apoptose, autofágica com
a produção de radicais livres. Estes resultados
apontam para o potencial deste modelo alternativo
como uma ferramenta para a avaliação de novos
fármacos. CEUA/ Instituto Butantan: I-1187/13
- FINANCIAMENTO: CNPq
EFEITO HIPOGLICEMIANTE DE PROTEÍNAS DE FOLHAS
DE Moringa oleifera LAMARCK EM CAMUNDONGOS
DIABÉTICOS
Paulo Carvalho de Paula1, Daniele Bezerra de
Sousa1, Renalison Pereira2, Bella Alves1, Ana
Fontenele Carvalho2, Ilka Vasconcelos1
1. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular;
2. Departamento de Biologia. Campus do Pici, Universidade Federal do Ceará, 60455760, Fortaleza/CE, Brasil.
Email: [email protected]
INTRODUÇÃO - Modelos animais diabéticos
têm sido úteis na pesquisa biomédica tanto para o
maior entendimento acerca da doença, bem como
no estudo de novas fontes farmacológicas hipoglicemiantes. Moringa oleífera é uma fonte vegetal que
apresenta compostos hipoglicemiantes. Apesar da
RESBCAL, São Paulo, resumos, pg. 291-354, 2014