Aplicação da espectrometria de massas para identificar

Sociedade Brasileira de Espectrometria de Massas – BrMASS
Aplicação da espectrometria de massas para identificar
carotenóides produzidos por bactérias halófilas
Viviane S. Miranda; Adriana Z. Mercadante
e-mail: [email protected]
Departamento de Ciência de Alimentos, Faculdade de Engenharia de
Alimentos, Universidade Estadual de Campinas, CP 6121, 13083-862,
Campinas, SP, Brasil.
Os carotenóides compõem um grupo de pigmentos naturais com grande diversidade
de estruturas e funções, sendo amplamente utilizados como corantes nas indústrias de
alimentos, de cosméticos, de rações e farmacêutica. Os microrganismos halófilos
produzem carotenóides com características estruturais muito diferentes das
encontradas em alimentos, portanto o objetivo deste estudo foi separar e identificar os
carotenóides das bactérias Halobacterium salinarium (ATCC 33171) e Halococcus
morrhuae (ATCC 17082) por cromatografia líquida de alta eficiência conectada aos
detectores de arranjo de diodos e de massas (HPLC-PDA-MS/MS). Os carotenóides
foram caracterizados de acordo com a ordem de eluição dos compostos na coluna C30,
características dos espectros UV-visível obtidos entre 220 e 700 nm e dos espectros de
massas. Os parâmetros usados no MS foram: fonte APCI no modo positivo; corrente
de corona: 4000 nA; temperatura da fonte de 450 °C; gás de secagem utilizado foi N2
à temperatura de 350 °C e fluxo de 5 L/min; nebulizador a 60 psi e energia de
fragmentação MS/MS de 1,4 V. Os espectros de massas foram adquiridos numa faixa
de m/z de 100 a 1200. O carotenóide majoritário identificado nas linhagens Halococcus
morrhuae e Halobacterium salinarium foi all-trans-bacterioruberina com 50 carbonos e
13 ligações duplas conjugadas com molécula protonada ([M+H]+) a m/z 741. Nas duas
bactérias também foram identificados os isômeros derivados de bacterioruberina, todos
com [M+H]+ a m/z 741: 13-cis-bacterioruberina, 5-cis-bacterioruberina, 5-cis,9’-cisbacterioruberina.
A
molécula
protonada
a
m/z 705 corresponde a
bisanidrobacterioruberina presente em ambas as bactérias e o carotenóide
trisanidrobacterioruberina com [M+H]+ a m/z 687 foi encontrado apenas na linhagem
Hcc. morrhuae.
OH
OH
OH
OH
all-trans-bacterioruberina
Apoio: CNPq e FAPESP.
3º Congresso BrMass – 12 a 15 de Dezembro de 2009