Expressão dos genes Wpkci e PKCI na região gonadal em

54º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008
Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
Expressão dos genes Wpkci e PKCI na
região gonadal em diferentes estadios do
desenvolvimento de Aves
Caetano, LC1; Araújo, A1; Bobrovnitchaia, IG1; Gennaro, FGO1; Vila, RA1; Galerani, MAV1; Ramos, ES1,2
Laboratório de Epigenética e Reprodução do Departamento de Genética da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto – USP
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Departamento de Ginecologia e Obstetrícia da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto-USP
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Palavras-chave: expressão, gônada, gene Wpkci, gene PKCI, embrião de galinha
Os mecanismos que levam a determinação e diferenciação sexuais em Aves não estão completamente elucidados. O
gene Wpkci tem expressão fêmea-específica no desenvolvimento gonadal, localiza-se no cromossomo W e apresenta um
homólogo em Z, o gene PKCI. Devido à localização destes genes e a estrutura de suas proteínas, foi proposto que devam
atuar de forma antagônica no processo de diferenciação do ovário. O objetivo deste trabalho foi verificar a expressão
desses dois genes em diversos estádios do desenvolvimento de Gallus gallus. A região gonadal embrionária dos estadios
de desenvolvimento anteriores à diferenciação histológica (estadio 20HH - 3 dias de incubação e estadio 25HH 4 ½ dias de incubação), e os primórdios gonadais pós-diferenciação histológica (estadio 38HH - 12 dias de incubação)
foram isolados de ovos galados, bem como ovário e testículos de animais adultos. Foram utilizados quatro embriões
de cada estadio, sendo dois de cada sexo, e um animal adulto de cada sexo. A sexagem prévia à análise de expressão foi
realizada utilizando-se PCR (Polimerase Chain Reaction) para detecção de seqüências do gene CHD e também pelo
MHM assay, ensaio desenvolvido em nosso laboratório. Foram realizadas a extração de RNA e a transcrição reversaPCR para seqüências dos genes PKCI, Wpkci e da β-actina (controle). O transcrito de Wpkci só pôde ser observado em
embriões fêmeas. A expressão de PKCI foi observada nos machos e fêmeas no período anterior ao início da diferenciação
histológica da gônada, bem como no estadio pós-diferenciação (38HH) nos machos e no testículo adulto. No ovário de
fêmea adulta e nos primórdios gonadais pós-diferenciação das fêmeas não foi visualizada a expressão deste gene. Com esses
resultados pode-se concluir que a expressão do gene PKCI limitou-se ao período pré-diferenciação da gônada feminina,
enquanto no macho, manteve-se até o adulto, enquanto o Wpkci apresentou transcritos em todos os estadios analisados,
mas exclusivamente nas fêmeas. As pesquisas com expressão de genes envolvidos com a determinação sexual das Aves
poderão levar a futuros estudos de interferência por RNA visando a um maior entendimento desse complexo sistema.
Apoio: CNPq, FAPESP, FAEPA, ANCP, CAPES.
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