Biológico, São Paulo, v.72, n.2, p.103-170, 2010

23ª RAIB
PRODUÇÃO DE BIOSSURFACTANTE POR BACILLUS SUBTILIS EM CALDO BHI ENRIQUECIDO COM MAGNÉSIO.
MONTAGNOLLI, R.N.; LOPES, P.R.M.; BIDOIA, E.D. Universidade Estadual Paulista, Av. 24-A, 1515. CEP 13506-900,
Rio Claro, SP, Brasil. E-mail: [email protected] Biosurfactant production by Bacillus subtilis in BHI broth with magnesium.
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Os biossurfactantes constituem uma das principais classes de surfactantes naturais, sendo classificados de acordo com
a sua composição química e sua origem microbiana. A vantagem mais importante dos biossurfactantes com relação aos
surfactantes químicos é a sua aceitabilidade ambiental. Biossurfactantes são um grupo de substâncias tensoativas produzidas por micro-organismos, capazes de reduzir a tensão superficial de misturas aquosas. Na presença dessas moléculas
são formadas micelas nas quais as substâncias insolúveis se solubilizam em água. Este trabalho teve como objetivo a
determinação da produção de biossurfactante por Bacillus subtilis CCT 2576 em meio de cultura enriquecido. A avaliação da
diminuição da tensão superficial do meio de cultura por biossurfactantes produzidos foi o que permitiu inferir sobre a
produção de biossurfactante. O micro-organismo foi reativado em meio caldo nutriente por 24 horas e inoculado em frasco
Erlenmeyer de 250 mL contendo 100 mL do meio de Caldo Brain Heart Infusion (BHI) enriquecido com Mg. Os frascos foram
incubados a 35° C em incubadora com agitação a 180 rpm por 48h para o crescimento de B. subtillis. Periodicamnte, de 4 em
4h até 168h, os frascos, onde ocorria o crescimento de B. subtilis, tiveram seu conteúdo retirado e centrifugado a 16.000 rpm
por 30 minutos. O sobrenadante, onde estava o biossurfactante, foi coletado. As medidas de tensão superficial foram feitas
tanto diretamente nos meios de cultivo sem ser centrifugados quanto nos sobrenadantes coletados após a centrifugação do
meio de cultura contendo B. subtilis. A temperatura de medição foi a 35° C. Observou-se a diminuição da tensão superficial
do meio de cultura após 16h, que passou de 56,0 mN/m a 32,6 mN/m. Isso é uma evidência da produção de biossurfactante
com atividade tensoativa. A tensão superficial manteve-se nesse valor até 168h. Não foi observada uma diferença estatisticamente significativa entre a tensão superficial dos meios de cultivo contendo biomassa (não centrifugados) e a tensão
superficial dos meios cuja biomassa foi removida por centrifugação. Existem discussões na literatura que propõem a
aplicação in situ de B. subtilis no tratamento de oceanos contaminados com hidrocarbonetos, dada a sua habilidade em
produzir substâncias tensoativas. A literatura refere-se ao biossurfactante do B. subtilis como um poderoso biossurfactante.
A diminuição da tensão superficial em 55,3% observada nesse experimento corrobora esse fato. Assim, o biossurfactante
produzido pode ser considerado bastante eficiente na diminuição da tensão superficial e interfacial de líquidos.
Agradecimentos: CAPES, CNPq.
CARACTERIZAÇÃO TOXICOLÓGICA DE DETERGENTE QUÍMICO COMERCIAL COM SEMENTES DE LACTUCA
SATIVA E ERUCA SATIVA. LOPES, P.R.M.*; CONTIERO, J.; MONTAGNOLLI, R.N.; BIDOIA, E.D. Universidade Estadual Paulista, Instituto de Biociências, Departamento de Bioquímica e Microbiologia, Av. 24-A, 1515, CEP 13506-900, Rio
Claro, SP, Brasil. E-mail: [email protected] Toxicological characterization of commercial detergent with Lactuca
sativa and Eruca sativa seeds.
Os derrames de petróleo e/ou seus derivados causam danos consideráveis ao meio ambiente, gerando uma preocupação enorme nos setores social, econômico e ambiental. Quando ocorrem esses desastres, geralmente tratamentos físicoquímicos são utilizados, o que demanda um alto custo e, possivelmente, cause maior impacto na área remediada. Processos
biológicos, por sua vez, são tecnologias promissoras de descontaminação, principalmente, por combinar simplicidade e
custo-efetividade. Também, já foi demonstrado que a adição de surfactantes sintéticos ou biológicos na biorremediação de
solos contaminados com óleo cru tem aumentado a eficiência de biodegradação (EB) em compostos orgânicos. A melhora
na biodegradação está relacionada ao fato de que os surfactantes aumentam a solubilidade dos hidrocarbonetos, tornandoos disponíveis aos micro-organismos. O objetivo do trabalho foi avaliar a toxicidade da solução de um detergente químico
comercial em diferentes concentrações a partir da germinação de sementes e o desenvolvimento de raiz e hipocótilo. Os testes
de toxicidade foram realizados com sementes de Lactuca sativa (alface) e Eruca sativa (rúcula) para cinco soluções de
detergente comercial e 2 tratamentos controle. As soluções de detergente avaliadas foram, em peso/volume: 0,01%; 0,05%;
0,10%; 0,25% e 0,50%. Para o controle negativo utilizou-se água mineral e para o controle positivo foi utilizada uma solução
de ZnSO4 0,05 N. O procedimento experimental foi realizado em triplicatas, utilizando-se placas de Petri contendo papel
filtro 90 mm, sendo que cada ensaio era composto por 3,5 mL da solução analisada. Também, as placas apresentavam 20
sementes para cada organismo-teste. Dessa forma, foram realizados 5 ensaios toxicológicos com diferentes concentrações
do detergente químico e 2 ensaios controle. Posteriormente, as placas foram cobertas com filme de PVC e incubadas a 22 ±
2º C por 120 horas. Transcorrido esse período, as placas foram transferidas para o freezer durante 24h e, após o congelamento das plântulas, realizou-se a contagem das sementes germinadas e a medição do hipocótilo e da raiz dessas com régua
milimétrica. Os resultados demonstraram alta taxa de germinação para ambas as espécies (< 93,3% para L. sativa e < 82,5%
para E. sativa) em todas as soluções testadas. Em relação ao crescimento do hipocótilo e da raiz, não foi observada
toxicidade nem mesmo em relação a maior concentração de detergente químico utilizada. Assim, o crescimento de raiz
relativo ao tratamento controle negativo foi maior que 80,6% para sementes de L. sativa e não menor que 73,7% para E. sativa.
Portanto, para as duas espécies vegetais empregadas nos testes toxicológicos foi demonstrado que tanto a germinação das
sementes quanto o desenvolvimento do hipocótilo e da raiz não foram afetados pelo detergente estudado até a concentração
0,50% p/v.
*Bolsista FAPESP.
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