Resumos do 49° Congresso Brasileiro de Genética Águas de

Resumos do 49° Congresso Brasileiro de Genética
Águas de Lindóia, SP, 16 a 19 de Setembro de 2003
www.sbg.org.br
UTILIZAÇÃO DE MARCAD ORES RAPD NA IDENTIFICAÇÃO DE ISOLADOS DE Histoplasma
capsulatum
Imano, ECM 1 ; Czelusniak, PA 2; Pinheiro, RL 3; Almeida, SM4; Werneck, LC5 ; Vicente, VA6
Mestranda em microbiologia/UFPR- PR1; graduando em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia/UFPR-PR2 ;
4,5
3
Serviço de Neurologia/HC–UFPR ; Laboratório de Micologia/HC–UFPR ; Prof. Adjunto, Departamento de
6
Patologia/UFPR- PR .
[email protected]
Palavras-chave: histoplasmose, RAPD, taxonomia.
A histoplasmose é um quadro clínico infeccioso de caráter oportunista com evolução aguda ou
crônica capaz de acometer o homem e certos animais, causada pelo fungo Histoplasma capsulatum ,
caracterizada geralmente por manifestações subclínicas com resolução residual pulmonar.
Dependendo da exposição durante o contágio, da variedade do agente e ou das características
imunológicas do hospedeiro a patogênese pode manifestar -se com clínica pulmonar aguda de
variável gravidade. Ecologicamente, o H.capsulatum é um fungo dimórfico saprobionte, disseminado
por excrementos de morcegos e aves, onde nas temperaturas ambientais apresenta um
desenvolvimento filamentoso e quando inalado desenvolve-se à temperatura corpórea na forma de
levedura. Tal característica é freqüentemente utilizada com um critério de identificação “in vitro”. No
presente trabalho foi isolada uma amostra de Histoplama a partir de licor de um paciente
imunocompetente portador de histoplasmose cerebral. O isolado apresentava morfologia compatível a
Histoplasma capsulatum var. capsulatum, porém não revertia para a forma leveduriforme à 37ºC.
Dentro deste contexto, marcadores de RAPD foram utilizados como subsídios na confirmação da
identificação, realizada previamente, baseada em características morfológicas. Foram utilizadas
linhagens referência de Histoplasma capsulatum procedentes do Instituto de Medicina Tropical de
São Paulo e do Hospital de Clínicas da UFPR/Curitiba e a Hca24 suspeito de H. capsulatum isolado
do Hospital de Clínicas da UFPR. Para o estudo foram utilizados 6 “primers” da linha “operon”, os
quais geraram 75 marcadores, cujo o perfil de amplificação gerou pelo menos 2 grupos apresentando
valores de “bootstrap” acima de 90%, indicando a confiabilidade dos agrupamentos observados. O
primeiro grupo reuniu as linhagens de Histoplasma capsulatum estudadas com similaridades variando
entre 50% a 91% indicando assim, um polimorfismo entre elas, onde foi verificado um subgrupo entre
as linhagens referências e o isolado investigado com um alto grau de similaridade genética. As
similaridades encontradas indicaram a proximidade genética entre o isolado suspeito de H
capsulatum e a linhagem referencia utilizada, confirmando a identificação baseada em caracteres
morfológicos identificada como H. capsulatum embora não reversível. E no segundo grupo verificouse a linhagem MMHCEj4 de Exophiala jeanselmei (HC/UFPR/Curitiba) utilizada como “outgrup”.
Outras linhagens referências estão sendo utilizadas visando à confirmação destes resultados.
Apoio Financeiro: CNPq e CAPES.
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