FOSFATASE ALCALINA-PP
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Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 HIV TRI LINE FINALIDADE Método imunocromatográfico para determinação rápida e qualitativa de anticorpos anti-HIV 1, incluindo subtipo O e anti- HIV 2. Somente para uso diagnóstico in vitro. PRINCÍPIO DE AÇÃO Metodologia: Imunocromatografia. O método utiliza antígenos recombinantes HIV 1 e HIV 2, que reagem com anticorpos presentes em amostras de soro, plasma e sangue total. As amostras se movem através de uma membrana cromatográfica por ação capilar. Amostras positivas para HIV 1 irão formar uma linha de cor vermelha na região onde antígeno recombinante HIV 1 está imobilizado. Amostras positivas para HIV 2 formarão uma segunda linha na região correspondente ao antígeno HIV 2 imobilizado. As amostras continuam sendo absorvidas pela membrana até a região do anticorpo controle, com a formação de outra linha vermelha, confirmando o processamento correto do teste. REAGENTE UTILIZADO HIV TRI LINE CATÁLOGO: K087 ANVISA: 10269360148 QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda. Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil Tel.: (31) 3439.5454 – Fax: (31) 3439.5455 E-mail: [email protected] Site: www.bioclin.com.br CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Indústria Brasileira COMPONENTES Reagente Número 1 (R1) Cassete - Conservar entre 2 e 30ºC. Não congelar. Contém: A) 01 cassete plástico com 01 tira teste contendo: - Região de Controle (C): Anticorpo de cabra policlonal anti-IgG; - Região de Teste (T): Antígenos recombinantes HIV-1 e HIV-2; - Conjugado: Antígenos recombinantes HIV-1 e HIV-2 conjugados com ouro coloidal; B) 01 sachê de sílica; Reagente Número 2 (R2) Diluente - Conservar entre 2 e 30ºC. Não congelar. Contém: Tampão Tris (pH 8,0). ESTABILIDADE Os reagentes são estáveis até a da data de validade impressa no rótulo quando conservados de acordo com a temperatura recomendada. Evitar a contaminação do produto durante o uso para não afetar a sua estabilidade. CUIDADOS ESPECIAIS 1- Somente para uso diagnóstico in vitro profissional. 2- Seguir com rigor a metodologia proposta para obtenção de resultados exatos. 3- Os cassetes não apresentam substâncias contaminantes, mas como as amostras são biológicas, as rotinas de segurança devem ser seguidas com rigor e o uso de luvas descartáveis é imprescindível. 4- Usar recipientes limpos e secos para acondicionar as amostras. 5- Abrir o envelope de alumínio, para retirar o cassete, somente no momento do uso. 6- O kit não deve ser congelado ou exposto a altas temperaturas, pois isto causará deterioração do mesmo. 7- Os reagentes, bem como a amostra, devem atingir a temperatura ambiente antes de iniciar o teste. 8- Recomendamos aplicar as normas locais, estaduais e federais de proteção ambiental para que o descarte dos reagentes e do material biológico seja feito de acordo com a legislação vigente. Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 9- Para obtenção de informações relacionadas à biossegurança ou em caso de acidentes com o produto, consultar as FISPQ (Ficha de Informações de Segurança de Produtos Químicos) disponibilizadas no site www.bioclin.com.br ou através de solicitação pelo SAC (Serviço de Assessoria ao Cliente) da Quibasa. 10- Não utilizar o produto em caso de danos na embalagem. 11- É imprescindível que os instrumentos e equipamentos utilizados estejam devidamente calibrados e submetidos às manutenções periódicas. EQUIPAMENTOS E INSUMOS OPERACIONAIS Pipetas, ponteiras, relógio ou cronômetro. Encontram-se no mercado especializado de artigos para Laboratórios de Análises Clínicas. AMOSTRA Soro/Plasma: as amostras de soro e plasma são estáveis por 3 dias quando mantidas entre 2 e 8ºC e por 03 meses a -20ºC, devendo ser descongeladas para uso somente uma vez. Amostras hemolisadas e lipêmicas devem ser evitadas, pois podem causar um resultado falso positivo. Soros e plasmas contendo precipitados podem fornecer resultados inconsistentes. Para obtenção do plasma realizar oleta utilizando como anticoagulante o EDTA, Heparina ou Citrato. Sangue Total: coletar o sangue total por venopunção utilizando o anticoagulante adequado (EDTA, heparina ou Citrato). O sangue total colhido por lanceta deve ser utilizado para testes imediatos. Sangue total colhido por venopunção com anticoagulante pode ser estocado entre 2 - 8ºC por até 2 dias. Não congelar o sangue total. PREPARO DO REAGENTE DE TRABALHO Não se aplica. TÉCNICA 1- A amostra deve estar em temperatura ambiente antes de iniciar o teste. 2- Retirar o cassete da embalagem protetora e identificá-la de forma adequada. 3- Para Soro, Plasma ou Sangue Total: Transferir 10 μL de Soro, Plasma ou Sangue Total para no orifício A 4- Segurar o frasco de Diluente (Reagente n° 2) verticalmente e aplicar 2 gotas (70 μL) no orifício B. 5- Aguardar a formação das linhas. Interpretar os resultados entre 15 e 30 minutos. Não realizar a leitura do teste após 30 minutos de reação. CÁLCULOS Não se aplica. INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS Formação de duas ou três linhas vermelhas após 15 minutos. Não interpretar o resultado após 30 minutos. O kit de HIV Tri Line é um teste de triagem para anticorpos anti-HIV 1/2. Resultados isolados do teste não podem ser utilizados para diagnóstico defi nitivo, necessitando de outros testes para confirmação. HIV 1 Positivo: Além da linha vermelha na região do Controle (C), forma-se outra linha na região de Teste 1 (T1). HIV 2 Positivo: Além da linha vermelha na região do Controle (C), forma-se outra linha na região de Teste 2 (T2). HIV 1 e 2 Positivos: Além da linha vermelha na região do Controle (C), formam-se duas outras linhas nas regiões de Teste 1 e 2 (T1 e T2). Se a intensidade da cor da linha T1 for maior que a linha T2 pode-se considerar o resultado como HIV-1 positivo. Se a intensidade da cor da linha T2 for maior que a linha T1 pode-se considerar o resultado como HIV-2 positivo. Obs.: Vide Notas. Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 Teste Negativo: Formação de apenas uma linha vermelha, após 15 minutos, na região do Controle. Não interpretar o resultado após 30 minutos. Um resultado negativo não exclui totalmente a possibilidade de infecção por HIV 1/2. Um indivíduo infectado pelo vírus pode apresentar um período de incubação de 10 dias a 6 meses (janela imunológica), período no qual o organismo pode apresentar níveis de anticorpos não detectáveis. Um segundo teste deve ser realizado após o período de 6 meses. Teste Inadequado: A ausência de formação de linha na região do Controle (C), indica erro no procedimento ou deterioração do cassete. Neste caso, repetir o teste utilizando novo cassete. Notas: 1- A linha na região controle aparecerá antes dos 15 minutos de incubação do testes, e isso não significa que os resultados negativos podem ser interpretados antes do tempo. 2- O resultado positivo não irá mudar após 30 minutos de teste, mas o resultado não deve ser interprerado após esse tempo para evitar resultados incorretos. 3- É importante o uso do volume correto de amostra, pois volumes inferiores ou superiores podem determinar resultados errôneos. 4- O tempo de leitura da reação deve ser seguido conforme a técnica estabelecida, a fim de se evitar falsas interpretações dos resultados. 5- O HIV-2 apresenta 60% de homologia em relação ao HIV-1. Portanto, caso o kit HIV Tri Line apresente resultado positivo para HIV-1 e HIV-2, este deve ser confirmado por outro método. Considerando que é raro haver coinfecção por HIV 1 e 2, é provável que o resultado tenha sido causado por reatividade cruzada entre eles. 6- O kit HIV Tri Line é um teste de triagem para caracterizar a presença de anticorpos antiHIV 1, incluindo o subtipo O, e 2. Resultados positivos devem ser confirmados com outro teste e informações clínicas disponíveis. Os resultados isolados do teste não podem ser utilizados para o diagnóstico definitivo. 7- Somente o resultado do teste negativo não significa que o indivíduo avaliado seja necessariamente negativo. Estudos científicos revelam que pessoas infectadas por HIV podem apresentar um período de incubação de 10 dias a 6 meses, período também conhecido como janela imunológica. Em casos de suspeita de contaminação pelo vírus, o paciente deve repetir o exame em intervalos periódicos, conforme orientação médica. 8- Os resultados fornecidos por este kit devem ser interpretados pelo profissional médico responsável, não sendo o único critério para a determinação do diagnóstico e/ou tratamento do paciente. VALORES DE REFERÊNCIA Não se aplica. LIMITAÇÕES DO PROCESSO Não se aplica Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 INTERFERENTES Hemólise com valores de hemoglobina até 10 g/L não interferem na dosagem de HIV. Não foram encontradas interferências significativas até 30 g/L de lípides, 0,2 g/L de bilirrubina e 60 g/L de proteínas. Não foi verificado nenhuma reação cruzada com HBsAg, HCV e Sífilis. SENSIBILIDADE Para estabelecer a sensibilidade e especificidade do kit HIV Tri Line, outro kit qualitativo comercialmente disponível foi usado para comparação. Foi evidenciado uma concordância de 100%. Estudos comparativos utilizando 192 amostras verdadeiramente positivas e 1023 amostras verdadeiramente negativas, mostraram que o kit HIV Tri Line possui > 99,9% de sensibilidade (192/192) e 99,9% de especificidade (1022/1023). LINEARIDADE Não se aplica. CONTROLE DA QUALIDADE Materiais Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e número de catálogo. Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados. Controle Interno Descrever a calibração periódica de pipetas, equipamentos utilizados, controle de temperatura ambiente e geladeiras para armazenamento dos kits. Deve ser prática rotineira do Laboratório Clínico o uso de soro controle para checar a precisão e exatidão das dosagens. Citar POP para controle interno. Controle Externo Descrever os procedimentos utilizados nas avaliações de qualidade feitas por programas de comparação entre laboratórios ou outros controles de qualidade. Gerenciamento dos dados obtidos no Controle Interno e Externo Definir como os dados de controle são arquivados e gerenciados. Fazer referência ao manual ou POP de garantia da qualidade. SIGNIFICADO DIAGNÓSTICO O Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) é um retrovírus, identificado como agente etiológico da Síndrome de Imunodeficiência Adquirida (AIDS). A AIDS é caracterizada por mudanças na população de linfócitos T, que tem um papel chave no sistema imunológico. No indivíduo infectado o vírus causa uma redução da sub-população das células T, chamadas células T “helper”, que deixam estes pacientes susceptíveis a infecções oportunistas e certas malignidades. As principais vias de transmissão são: Relação sexual desprotegida, contaminação por sangue ou hemoderivados e a transmissão de mãe para filho durante o parto. O HIV é constituído por uma molécula de RNA, protegida por um capsídeo e um envelope. Existem dois tipos do vírus HIV: HIV 1 e HIV 2. O envelope do HIV é o principal alvo da resposta imune. A presença do vírus faz com que o sistema imune dos pacientes produza anticorpos anti-HIV. A detecção destes anticorpos pode ser usada como uma ferramenta de diagnóstico. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Popovic, M., M. G. Sarngadharan, E. Read, and R. C. Gallo. 1984. Detection, isolation, and continuous production of cytopathic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and pre-AIDS. Science 224:497. 2. Gallo, R. C., S. Z. Salahuddin, M. Popovic, G. M. Shearer, M. Kaplan, B. F. Haynes, T. J. Palker, R. Redfield, J. Oleske, B. Safai, and. 1984. Frequent detection and isolation of cytopathic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and at risk for AIDS. Science 224:500. 3. Curran, J. W., W. M. Morgan, A. M. Hardy, H. W. Jaffe, W. W. Darrow, and W. R. Dowdle. 1985. The epidemiology of AIDS: current status and future prospects. Science 229:1352. 4. Plot, P., F. A. Plummer, F. S. Mhalu, J. L. Lamboray, J. Chin,and J. M. Mann. 1988. AIDS: an international perspective. Science 239:573. Nome do Laboratório Página 1 de 4 Procedimento Operacional Padrão (POP) POP xxx HIV TRI LINE Elaborado por: Aprovado por: Implantado por: Substitui POP: Revisado por: Revisado por: Revisado por: Desativado por: Razão: Cópias Nome Revisão: 00 Assinatura Data __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ Número Destino Quibasa/Bioclin POP HIV TRI LINE Revisão: Março/2017 Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 HIV TRI LINE FINALIDAD Método inmunocromatográfico para determinación rápida y cualitativa de anticuerpo anti-HIV 1, incluyendo subtipo O y antiHIV 2. Solamente para uso diagnóstico in vitro. PRINCIPIO DE ACCIÓN Metodología: Inmunocromatografia El método utiliza antígenos recombinantes HIV 1 y HIV 2, que reaccionan con anticuerpos presentes en muestras de suero, plasma y sangre total. Las muestras se mueven a través de una membrana cromatográfica por acción capilar. Muestras positivas para HIV 1 formarán una línea de color rojo en la región donde antígeno recombinante HIV 1 está inmobilizado. Muestras positivas para HIV 2 formarán una segunda línea en la región correspondiente al antígeno HIV 2 inmobilizado. Las muestras continuan siendo absorbidas por la membrana hasta la región del anticuerpo control, con la formación de outra línea roja, confirmando el procesamiento correcto del test. REACTIVO UTILIZADO HIV TRI LINE CATÁLOGO: K087 ANVISA: 10269360148 QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda. Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil Tel.: +55 (31) 3439.5454 – Fax: +55 (31) 3439.5455 E-mail: [email protected] Site: www.bioclin.com.br CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Indústria Brasileira COMPONENTES Reactivo Numero 1 (R1) Casete - Almacenar entre 2 e 30ºC. No congelar. Contiene: A) 01 casete plástico com la tira 01 de ensayo que contiene: - Región de Control (C): Anticuerpo de cabra policlonal anti-IgG; - Región de Prueba (T): Antígenos recombinantes HIV-1 y HIV-2; - Conjugado: Antígenos recombinantes del HIV-1 y HIV-2 conjugados com oro coloidal B) Bosita de sílice 01; Reactivo Numero 2 (R2) Diluyente - Almacenar entre 2 e 30ºC. No congelar. Contiene: Tampón Tris (pH 8,0). ESTABILIDADE Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta cuando se almacena en la temperatura recomendada. Evitar la contaminación del producto durante su uso para no afectar a su estabilidad. CUIDADOS ESPECIALES 1- Solamente para el uso diagnóstico in vitro profesional. 2- Seguir com rigor La metodología propuesta para obtención de resultados exactos. 3- Los casetes no presentan sustancias contaminantes, pero como las muestras son biológicas, las rutinas de seguridad deben ser seguidas con rigor y el uso de guantes descartables es imprescindible 4- Usar recipientes limpios y secos para acondicionar las muestras. 5- Abrir el sobre de alumínio, para retirar el casete, solamente en el momento del uso. 6- El kit no debe ser congelado o expuesto a altas temperaturas, pues esto causará deterioración del mismo. 7- Los reactivos, bien como la muestra, deben alcanzar la temperatura ambiente antes de iniciar el test. 8- Se recomienda la aplicación de la ley local, estatal y federal de protección ambiental para la eliminación de reactivos y material biológico se hace de acuerdo con la legislación vigente. 9- Para obtener información relacionada con la seguridad biológica o en caso de accidentes con el producto, consultar la FISPQ (Ficha de Informaciones de la Seguridad de Productos Químicos) Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 disponibles en el site www.bioclin.com.br o solicitando a través del SAC (Servicio de Asesoría al Cliente) de Quibasa. 10- No utilice el producto en caso de daños en su embalaje. 11- Es esencial que los instrumentos y equipos utilizados estén adecuadamente calibrados y sometidos a mantenimientos periódicos. EQUIPAMIENTOS E INSUMOS OPERACIONALES Pipetas, punteros, reloj o cronómetro. Se encuentran en el mercado especializado de artículos para Laboratorios de Análisis Clínicos MUESTRAS Suero/Plasma: las muestras de suero y plasma son estables por 3 días cuando mantenidas entre 2 y 8ºC y por 03 meses a -20ºC, debiendo ser descongeladas para uso solamente una vez. Muestras hemolizadas y lipémicas deben ser evitadas, pues pueden causar un resultado falso positivo. Sueros y plasmas conteniendo precipitados pueden fornecer resultados inconsistentes. Para obtener la recogida de plasma ulizando realizar como anticoagulante EDTA, Heparina o Citrato. Sangre Total: colectar la sangre total por venopunción utilizando el anticoagulante adecuado (EDTA, Heparina o Citrato). La sangre total recogida de la lanceta se debe utilizar para la prueba inmediata. La sangre total extraída por punción venosa con anticoagulante se pueden conservar entre 2 - 8ºC por hasta 2 dias. No congelar la sangre total. PREPARO DEL REACTIVO DE TRABAJO No se aplica. TÉCNICA 1- La muestra debe estar en temperatura ambiente antes de iniciar el test. 2- Retirar el casete del embalaje protector e identificarlo de forma adecuada. 3- Para el Suero, Plasma o Sangre Total: Transferencia de 10 μl de Suero, Plasma o Sangre Total en el orificio A. 4- Mantener el Diluyente (Reactivo n° 2) verticalmente, y se aplica 2 gotas (70 μL) en el orificio B. 5- Aguardar la formación de las líneas. Interpretar los resultados entre 15 y 30 minutos. No realizar la lectura del test luego de 30 minutos de reacción. CÁLCULOS No se aplica. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS Test Positivo: Formación de dos o tres líneas rojas luego de 15minutos. No interpretar el resultado después de 30 minutos. El kit de HIV Tri Line es un test de selección para anticuerpos anti-HIV 1/2. Resultados isolados del test no pueden ser utilizados para diagnóstico defi nitivo, necesitando de otros tests para confirmación. HIV 1 Positivo: Además de la línea roja en la región de Control (C), se forma otra línea en la región de Test 1 (T1). HIV 2 Positivo: Además de la línea roja en la región del Control (C), se forma otra línea en la región de Test 2 (T2). HIV 1 y 2 Positivos: Además de la línea roja en la región del Control (C), se forman otras dos líneas en las regiones de Test 1 y 2 (T1 y T2). Si la intensidad del color de la línea T1 es mayor que la línea T2 puede considerar el resultado como HIV-1 positivo. Si la intensidad de color de la línea T2 es mayor que la línea T1 puede considerar el resultado como HIV-2 positivo. Obs:. Ver Notas. Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 Test Negativo: Formacíón de apenas una línea roja, lluego de 15 minutos, en la región del Control. No interpretar el resultado después de 30 minutos. Un resultado negativo no excluye totalmente la posibilidad de infección por HIV 1/2. Un individuo infectado por el vírus puede presentar un período de incubación de 10 dias a 6 meses (ventana inmunológica), período en el cual el organismo puede presentar niveles de anticuerpos no detectables. Un segundo test debe ser realizado luego del período de 6 meses. Test Inadecuado: La ausencia de formación de línea en la región del Control (C), indica error en el procedimiento o deterioración del casete. En este caso, repetir el test utilizando nuevo casete. Notas: 1- La línea en la región control aparecerá antes de los 15 minutos de incubación del test, y eso no significa que resultados negativos pueden ser interpretados antes de tiempo. 2- El resultado positivo no va a cambiar después de 30 minutos de test, pero el resultado no debe ser interpretado después esse tiempo para evitar resultados incorrectos. 3- Es importante el uso del volumen correcto de muestra, pues volúmenes inferiores o superiores pueden determinar resultados erróneos 4- El tiempo de lectura de la reacción debe ser seguido conforme la técnica establecida, a fin de evitarse falsas interpretaciones de los resultados. 5- HIV-2 tiene 60% de homología con el HIV-1. Así que el kit HIV Tri Line dispone resultado positivo para el HIV-1 y HIV-2, esto debe ser confirmado por otro método. Considerando que rara vez hay coinfección por el HIV 1 y 2, es probable que el resultado fue causado por la reactividad cruzada entre ellos. 6- El kit HIV Tri Line es un test de selección para caracterizar la presencia de anticuerpos anti-HIV 1, incluyendo el subtipo O y 2. Resultados positivos deben ser confirmados con otro test e informaciones clínicas disponibles. Los resultados isolados del test no pueden ser utilizados para el diagnóstico definitivo. 7- Solamente el resultado del test negativo no significa que el indivíduo evaluado sea necesariamente negativo. Estúdios científicos revelan que personas infectadas por HIV pueden presentar un período de incubación de 10 dias a 6 meses, período también conocido como ventana inmunológica. En casos de sospecha de contaminación por el vírus, el paciente debe repetir el exámen en intervalos periódicos, conforme orientación médica. 8- Los resultados proporcionados por este kit deben ser interpretados por el profesional médico responsable, no siendo el único criterio para determinar el diagnóstico y/o tratamiento del paciente. VALORES DE REFERENCIA No se aplica. Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 LIMITACIONES DEL PROCESOS No se aplica. INTERFERENTES Tests de reactividad cruzada fueron realizados utilizando sueros positivos anti-HCV, anti-TP (Sífilis) y anti-HBc, y ninguna reactividad fue observada. SENSIBILIDAD Para establecer la sensibilidad y especificidad del kit HIV Tri Line, otro kit cualitativo comercialmente disponible fue usado para comparación. Fue evidenciado una concordancia de 100%. Estudios comparativos utilizando 192 muestras verdaderamente positivas y 1023 muestras verdaderamente negativas, mostraron que el kit HIV Tri Line posee > 99,9% de sensibilidad (192/192) y 99,9% de especificidad (1022/1023). LINEARIDAD No se aplica. CONTROL DE CALIDAD Materiales Identificar el control del material interno y control externo de calidad, citando el fabricante y el número de catálogo. Refiriéndose POE para la limpieza y secado de los materiales utilizados. Control Interno Describa la calibración periódica de las pipetas, el equipo utilizado, control de temperatura y refrigeradores para el almacenamiento de equipos. Debería ser una práctica habitual del laboratorio clínico utilizando suero de control para comprobar la precisión y la exactitud de las mediciones. Cita POE para el control interno. Control Externo Describir los procedimientos utilizados en las evaluaciones de calidad realizadas por programas de comparación entre laboratorios u otros controles de calidad. La gestión de los datos obtenidos en el Control interno y externo Establecer como los datos de control se almacenan y gestionan. Consulte el manual de Definido por el aseguramiento de la calidad. SIGNIFICADO DIAGNÓSTICO El Vírus de la Inmunodeficiéncia Humana (HIV) es un retrovírus, identificado como agente etiológico del Síndrome de Inmunodeficiéncia Adquirida (AIDS). El AIDS es caracterizada por cambios en la población de linfócitos T, que tienen un papel clave en el sistema inmunológico. En el individuo infectado el vírus causa una reducción de la sub población de las células T, llamadas células T “helper”, que dejan a estos pacientes susceptibles a infecciones oportunistas y ciertas malignidades. Las principales vias de transmisión son: relación sexual desprotegida, contaminación por sangre o hemoderivados y la transmisión de madre a hijo durante el parto. El HIV es constituído por una molécula de RNA, protegida por un capsídeo y un sobre. Existen dos tipos de vírus HIV: HIV 1 y HIV 2. El sobre del HIV es el principal alvo de la respuesta inmune. La presencia del vírus hace con que el sistema inmune de los pacientes produzca anticuerpos anti-HIV. La detección de estos anticuerpos puede ser usada como una herramienta de diagnóstico REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Popovic, M., M. G. Sarngadharan, E. Read, and R. C. Gallo. 1984. Detection, isolation, and continuous production of cytopathic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and pre-AIDS. Science 224:497. 2. Gallo, R. C., S. Z. Salahuddin, M. Popovic, G. M. Shearer, M. Kaplan, B. F. Haynes, T. J. Palker, R. Redfield, J. Oleske, B. Safai, and. 1984. Frequent detection and isolation of cytopathic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and at risk for AIDS. Science 224:500. 3. Curran, J. W., W. M. Morgan, A. M. Hardy, H. W. Jaffe, W. W. Darrow, and W. R. Dowdle. 1985. The epidemiology of AIDS: current status and future prospects. Science 229:1352. Nome do Laboratório Página 1 de 4 Procedimento Operacional Padrão (POP) POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 4. Plot, P., F. A. Plummer, F. S. Mhalu, J. L. Lamboray, J. Chin, and J. M. Mann. 1988. AIDS: an international perspective. Science 239:573. Preparado por: Aprobado por: Presentado por: Sustituye POE: Revisado por: Revisado por: Revisado por: Desactivado por: Razón: Cópias Nombre Firma Fecha __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ Número Destino Quibasa/Bioclin POE HIV TRI LINE Revisión: Marzo/2017 Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 HIV TRI LINE FUNCTION Immunochromatographic method for quick and qualitative determination of the anti-HIV 1 antibodies, subtype O included, and anti-HIV 2. For in vitro diagnostic only. PRINCIPLE OF ACTION Methodology: Immunochromatography The method uses the recombined antigens HIV 1 and HIV 2, who react with the present antibodies in serum samples, plasma and total blood. The samples move by a chromatographic membrane for capillary action. The positive HIV 1 will form a line of red color where the recombined antigen HIV 1 is immobilized. The positive samples for HIV 2 will form another red line in the correspondent area where the antigen HIV 2 is immobilized. The samples continue been absorbed by the membrane until the area of the control antibody, with the formation of another red line, confirming the test was correctly performed. REAGENT USED HIV TRI LINE CATÁLOGO: K087 ANVISA: 10269360148 QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda. Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil Tel.: +55 (31) 3439.5454 – Fax: +55 (31) 3439.5455 E-mail: [email protected] Site: www.bioclin.com.br CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Indústria Brasileira COMPONENTS Reagent Number 1 (R1) Cassette – Store between 2 and 30ºC. Do not freezer. Contains: A) 01 plastic cassette with 01 test strip containing: - Control region (C): Polyclonal goat anti-IgG antibody; - Test region (T): HIV-1 and HIV-2 recombinant antigens; - Conjugate: Recombinant HIV-1 and HIV-2 antigens conjugated with colloidal gold; B) 01 sachet of silica; Reagent Number 2 (R2) Diluent - Store between 2 and 30ºC. Do not freezer. Contains: Buffer Tris (pH 8,0). STABILITY The reagents are stable until the expiration date printed on the label when stored under the recommended temperature. Avoid contamination of the product during use to not affect its stability. SPECIAL CARE 1- For professional in vitro diagnostic use only. 2- Strictly follow the methodology proposed to obtain exact results. 3- The cassettes do not present contaminant substances, but once the samples are biological, the safety routine must be followed strictly and the use of disposable gloves is indispensable. 4- Use clean and dry recipients to settle the samples. 5- Open the aluminum envelop, to take the cassette off, only for its immediate use. 6- The kit must not be frozen or exposed to high temperatures, because it will cause its deterioration. 7- The reagents, as well as the sample, must rech environment temperature before the test begins. 8- We recommend applying the local, state and federal rules for environmental protection, so that disposal of reagents and biological material can be made in accordance Blank current legislation. 9- To obtain information related to biosafety or in case of accidents with the product, consult the MSDS (Material Safety Data Sheet) available on the website www.bioclin.com.br or upon request by the SAC (Customer Advisory Service) of Quibasa. 10- Do not use the product in case of damaged packaging. Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 11- It is essential that the instruments and equipments used are properly calibrated and subjected to periodic maintenance. EQUIPMENTS AND OPERATIONAL INPUTS Pipettes, tips, watches and stopwatches. They can be found at markets specialized in laboratories of clinical analysis. SAMPLE Serum/Plasma: the serum and plasma samples are stable for 3 days when kept between 2 and 8ºC and for 3 months at -20°C, it ca only be defrosted for use once. Hemolyzed and lipemic samples shall be avoided, because they can cause a wrongly positive result. Serum or plasma containing precipitate can supply inconsistent results. To obtain the plamsa, collect EDTA, Heparin or Citrate as anticoaculant. Whole Blood: Collect whole blood by venipuncture using the appropriate anticoagulant (EDTA, Heparin or Citrate) or with the aid of a lancet. The whole blood collected from the lancet should be used for immediate testing. Whole blood collected by venipuncture with anticoagulant may be stored at 2 - 8°C for up 2 days. Do not freeze whole blood. PREPARATION OF WORKING REAGENT Not applicable. TECHNIQUE 1- The sample must be in a ambient temperature before test begins. 2- Take off the cassette of the protection case and identify it in an adequate form. 3- For Serum, Plasma or Whole Blood: Transfer 10 μL of Serum, Plasma or Whole Blood to port A. 4- Hold the Diluent bottle (Reagent n° 2) vertically and apply 2 drops (70 μL) to the hole B. 5- Wait the formation of the lines. Interprete result between 15 and minutes. Do not interpreter it after 30 minutes. CALCULATION Not applicable. RESULTS Positive test: The formation of two or three red lines after 15 minutes. Do not interpret results after 30 minutes. The HIV Tri Line kit is a test of classification for anti-HIV 1/2 antibodies. Isolated results can not be used for defi nitive diagnosis, demanding the other tests for confi rming the result: HIV 1 Positive: Besides the red line in the Control area (C), another line forms in the Test 1 area (T1). HIV 2 Positive: Besides the red line formation in the Control area (C), another line forms in the Test 2 area (T2). HIV 1 and 2 Positive: Besides the red line in the Control area (C), another two lines form in the Test 1 and 2 areas (T1 and T2) If the intensity of the T1 line color is greater than the T2 line can be considered the result as HIV-1 positive. If the intensity of the color line T2 is greater than the T1 line can be consider the result as HIV-2 positive. Obs .: See Notes. Negative test: Formation of a single red line, after 15 minutes, in the Control area. Do not interpret results after 30 minutes. A negative result does not exclude the possibility of HIV 1/2 infection. An infected individual can present an incubation period of 10 days and 6 months (immunological window), period in which the organism can present high levels of non-detectable antibodies. A second test shall be realized after the period of 6 months. Invalid Test: Complete absence of line in the Control area (C), indicates an error in the procedure or deterioration of the cassette. In this case, repeat the test using a new cassette. Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 Notes: 1- The line in the control region appears before the 15 minute test incubation, and this does not mean that negative results can be interpreted ahead of time. 2- The positive result will not change after 20 minutes, but the result must not be interpreted after this time to avoid incorrect results. 3- It is important the use of the right amount of sample, because lower volumes can determinate wrong results. 4- The reading time must be followed according to the specific technique, in order to avoid fake results interpretation. 5- HIV-2 has 60% homology to HIV-1. So if your HIV Tri Line kit present positive for HIV-1 and HIV-2, this must be confirmed by another method. Whereas there is rarely coinfection with HIV 1 and 2, the result is likely to have been caused by crossreactivity between them. 6- The HIV Tri Line kit is a classification test to characterize the presence of antibody antiHIV 1, subtype O included, and 2. Positive results can be confirmed with other test and available clinical data. The isolated results of the test can not be used for the definitive diagnosis. 7- Only the negative test result does not mean that the evaluated individual is necessarily negative. Scientific studies reveal that HIV infected people can present an incubation period of 10 days to 6 months, period known as immunological window. In case of suspicious virus contamination, the patient shall repeat the exams in periodic intervals, according to medical guidance. 8- The results provided by this kit must be interpreted by the English 2/2 medical professional responsible, not being the only criterion for the determination of diagnosis and/or treatment of the patient. REFERENCE VALUES Not applicable. PROCEDURE LIMITATIONS Not applicable INTERFERING Cross reactive test were carried out using positive anti-HCV serum, anti-TP (syphilis) and anti-HBc, and no reactivity was observed. Nome do Laboratório Procedimento Operacional Padrão (POP) Página 1 de 4 POP xxx HIV TRI LINE Revisão: 00 SENSITIVITY To establish the sensitivity and specificity of the HIV Tri Line kit, other qualitative kit was compared to other methods available in the market. A concordance of 100% was found. Comparative studies using 192 truly positive samples and 1023 truly negative samples were tested, and demonstrate that the HIV Tri Line kit has > 99,9% sensitivity (192/192) and 99,9% of specificity (1022/1023). LINEARITY Not applicable. QUALITY CONTROL Materials Identify material internal control and external quality assurance, citing manufacturer and catalog number. Referring SOP for cleaning and drying of materials used. Internal Control Describe the periodic calibration of pipettes, equipment used, temperature control and refrigerators for storage of kits. It should be a routine practice of the Clinical Laboratory using control serum to check the precision and accuracy of measurements. Quote SOP for internal control. External Control Describe the procedures used in quality assessments made by inter-laboratory comparison programs or other quality controls. Management of the data obtained in the Internal and External Control Set as the control data are stored and managed. Refer to the manual or POP for quality assurance. DIAGNOSTIC SIGNIFICANCE The Human Immunodeficiency Virus (HIV) is a retrovirus, identified with etiologic agent of the Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS). AIDS is characterized by changes in T-lymphocytes population, that play an important rule in the immunological system. In the infected individual the virus causes a reduction of the T-cells subpopulation called T ”helper”, that leave these patients susceptible to opportunist infections and some malignances. The main transmission ways are: Unprotected sexual act, blood contamination or blood derivatives and the transmission from mother to child during birth. The HIV is constitute of a RNA molecule, protected by a capsid and an envelop. There are two kinds of HIV virus: HIV 1 and HIV 2. The envelop of HIV is the major target of the immune response. The presence of the virus makes the immune system of the patients produce antiHIV antibodies. The detection of this antibodies can be used as a diagnosis tool. BIBLIOGRAPHIC REFERENCES 1. Popovic, M., M. G. Sarngadharan, E. Read, and R. C. Gallo. 1984. Detection, isolation, and continuous production of cytopathic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and preAIDS. Science 224:497. 2. Gallo, R. C., S. Z. Salahuddin, M. Popovic, G. M. Shearer, M. Kaplan, B. F. Haynes, T. J. Palker, R. Redfield, J. Oleske, B. Safai, and. 1984. Frequent detection and isolation of cytopathic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and at risk for AIDS. Science 224:500. 3. Curran, J. W., W. M. Morgan, A. M. Hardy, H. W. Jaffe, W. W. Darrow, and W. R. Dowdle. 1985. The epidemiology of AIDS: current status and future prospects. Science 229:1352. 4. Plot, P., F. A. Plummer, F. S. Mhalu, J. L. Lamboray, J. Chin, and J. M. Mann. 1988. AIDS: an international perspective. Science 239:573. Nome do Laboratório Página 1 de 4 Procedimento Operacional Padrão (POP) POP xxx HIV TRI LINE Prepared by: Approved by: Established by: Replaces SOP: Reviewed: Reviewed: Reviewed: Disabled by: Reason: Copies Name Revisão: 00 Signature Date __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ __/__/__ Number Destination Quibasa/Bioclin SOP HIV TRI LINE Review: March/2017
