Citocromo c Oxidase I em subespécies do complexo Culex pipiens

55º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 55º Congresso Brasileiro de Genética • 30 de agosto a 02 de setembro de 2009
Centro de Convenções do Hotel Monte Real Resort • Águas de Lindóia • SP • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
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Citocromo c Oxidase I em subespécies do complexo
Culex pipiens sul americano
Morais, SA¹; Marrelli, MT¹
¹ Departamento de Epidemiologia - Faculdade de Saúde Pública - Universidade de São Paulo. [email protected]
Palavras-chave: Citocromo c Oxidase I, Culex, COX1, DNA
A subunidade 1 da Citocromo c Oxidase (COI) do DNA mitocondrial é parte de um complexo gênico codante de
proteínas transmembranas, envolvidas no transporte elétrico e catálise da cadeia respiratória de organismos eucariotos. Este gene vem sendo alvo de estudos populacionais de variabilidade genética pela sua universalidade e
importância evolutiva. Neste trabalho foram analisados fragmentos do gene COI, com 1260pb, amplificados com
primers UEA3, Fly10 e desenhos internos, em subespécies do complexo Culex pipiens da América do Sul, como o
Cx. quinquefasciatus, Cx. pipiens e os híbridos destes. Foram processados 240 mosquitos originários de áreas urbanas situadas a 5, 9, 23, 24, 27, 31, 33 e 34°S. Constatou-se que a seqüência de bases deste fragmento apresenta alto
conteúdo A+T (70,5%), comum em genes mitocondriais de insetos. Os testes revelam três mutações de ponto por
transição, com troca de pirimidinas (A-G) e uma por purinas (C-T). Destas, dois sítios com transições A-G formam
clusters, tendo os mitotipos localização latitudinal entre 31 e 33°S, no extremo sul do Brasil, sugerindo relação com
a origem geográfica dos mosquitos. Em comparações por pares, esses dois sítios de transição são visualizados em
fragmentos COI de mosquitos pipiens de Ohio e Iran, sendo que essas áreas possuem variação climática semelhante, com quedas bruscas de temperatura. As seqüências gênicas COI sul americana apresentam 99,5 a 100% de
similaridade com subespécies do complexo Cx. pipiens de outras localidades do mundo, mostrando dinamismo
nos mecanismos de dispersão, com fluxo gênico mundial e consequente amplificação citoplasmática. Nenhum dos
mitotipos dados pelo gene COI foi confirmado como subespécie por testes com o intron nuclear ace2, mostrando
que o gene COI não discrimina subespécies. Uma análise de predição de proteínas responde 100% de similaridade
com enzimas Citocromo c Oxidase subunidade I (COX1, EC 1.9.3.1) de subespécies pipiens norte-americanas, indicando domínio funcional conservado. Somente uma das mutações de ponto (A-G) detectada no DNA de um dos
mosquitos processados resulta em modificação de aminoácido na estrutura primária (M-V), na região de domínio.
Igualmente ocorre modificação na estrutura secundária (H-C), com aumento na extensão de uma das hélices. Esta
é um tipo de mutação não-sinônima, podendo não ser positiva, ainda mais pela baixa freqüência na amostragem.
As outras três se caracterizam como mutações silenciosas, sem mudança de aminoácido, início ou parada de
códon. A subunidade 1 do complexo gênico da Citocromo c Oxidase no subgrupo pipiens sul americano é semiconservada e apresenta vestígios de divergência adaptativa, demonstrados por agrupamentos populacionais após
eventos de transição.
Apoio financeiro: FAPESP