desvendando os mecanismos inflamatórios

O papel da medula óssea no desenvolvimento da leishmaniose visceral grave:
desvendando os mecanismos inflamatórios e imunossupressores.
Débora Cavalcante Braz, Adeno Gonçalves Oliveira, Clarissa Romero Teixeira, Dorcas Lamounier
Costa, Elaine Sobral Costa, Adriana Cesar Bonomo, Carlos Henrique Nery Costa
Introdução: A leishmaniose visceral (LV), uma protozoose sistêmica grave, conhecida como
Calazar, é causada pela espécie Leishmania infantum. O Brasil é considerado o epicentro da LV
na América do Sul, doença que encontra-se em expansão e fora de controle. A LV possui
características imunológicas e clínicas ímpares e de difícil resolução. Cerca de 30% dos
pacientes tem quadro grave, podendo ir a óbito por infecções secundárias e hemorragias. Apesar
de aparentemente contraditório, a imunossupressão coexiste com a resposta inflamatória
exagerada. Estes dados nos levam a pensar que as células da corrente sanguínea podem ser
influenciadas ou refletir o que se passa na intimidade de órgãos e tecidos como a medula óssea e
o baço. Então é necessário comparar amostras de medula óssea (MO) e sangue periférico (SP)
de um mesmo paciente. Desta forma, o presente trabalho tem por objetivo geral contribuir para a
redução da letalidade em LV, em particular, da doença grave. Materiais e Métodos: Amostras de
SP e MO de pacientes com suspeita clínica de LV foram incubadas em ambiente a 5% de CO2 a
37ºC por 4 horas em meio RPMI com monensina. Em seguida, marcadas com os anticorpos antiCD4, anti-CD8, anti-CD14, anti-CD19, anti-CD45. Após 30 minutos em câmara escura, foram
permeabilizadas e adicionados anti-IL-6, anti-IL-8, anti-IL-10, anti-INF-? e anti-TNF-? e incubadas
por 1 hora. Em seguida, as amostras foram adquiridas em citômetro de fluxo FACSCantoII. O
software Infinicyt foi utilizado para análise. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética e
Pesquisa da Universidade Federal do Piauí com número 30392214.0.0000.5214. Quanto a
análise estatística, foram utilizados Friedman e Wilcoxon, considerados significativos com p?0.05,
no programa GRaph pad Prisma. Alguns dados não apresentados estão encontram em fase de
análise. Resultados e Discussão: Atualmente, muitos estudos questionam o papel dos leucócitos
no desenvolvimento da LV, se apresentam atividade protetora e/ou inflamatória e/ou supressora,
informação importante para definir gravidade. É importante ressaltar que as citocinas podem
contribuir com estas atividades. Na presente pesquisa, foi possível identificar que os neutrófilos
são os principais produtores de TNF? (p?0.05) em SP de LV. Resultados do nosso grupo de
pesquisa demonstraram que IL-6 é uma citocina relacionada com gravidade e morte. Desta
forma,
ao comparar SP e MO em LV ativa, linfócitos TCD8 (p=0.0013) e TCD4 (p=0.0335)
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expressam mais IL-6 no SP. Dentre as células T, no sangue periférico TCD8 produzem mais IL6
que TCD4 e estão correlacionadas (p=0.0039 e rs=0.8226). Na MO não existe diferença
significativa entre os linfócitos quanto a síntese de IL6. Conclusão: Então após as primeiras
análises, foi possível concluir que existem diferenças na atividade de algumas células de acordo
com o compartimento do organismo e, como IL-6 é uma citocina inflamatória, é possível que
TCD4 e TCD8 apresentem maior atividade inflamatória no SP.
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