Biológico, São Paulo, v.71, n.2, p.19

7º CICAM
NOVO MÉTODO DE DIAGNÓSTICO DA CINOMOSE CANINA EM CORTES HISTOLÓGICOS. AGOSTINHO, S.D.1*;
PIRES, M.C.1; RONCATTI, F.T.L.B.1; GASPARELLO, I.F.1; FERRARI, H.F.2; LUVIZOTTO, M.C.R. 2; GAMEIRO, R. 1; CARDOSO, T.C.1,2 1Universidade Estadual Paulista, Curso de Medicina Veterinária, Laboratório de Virologia Animal, Rua Clóvis
Pestana, 793, CEP 16050-680, Araçatuba, SP, Brasil. E-mail: [email protected] 2Universidade Estadual
Paulista, Curso de Medicina Veterinária, Laboratório de Patologia Animal, Araçatuba, SP, Brasil. New diagnostic method
for Canine Distemper Virus detection in paraffin embedded tissues.
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A Cinomose Canina é uma doença infecciosa que ocorre mundialmente e compreende todas as famílias da ordem
Carnivora. O vírus da cinomose é classificado na família Paramyxoviridae, estando relacionado intimamente, em termos
antigênicos e biofísicos, ao vírus do sarampo dos seres humanos, e o vírus da peste bovina dos ruminantes. Os 3 vírus são
grupados em conjunto no gênero Morbillivirus. Os morbilivírus são vírus relativamente grandes (150 – 250 nm de diâmetro),
contendo RNA com simetria helicoidal e possuem um envelope de lipoproteína. O vírus da cinomose canina possui sua
partícula viral envelopada, RNA sentido negativo e fita simples, que contém 6 proteínas estruturais, o nucleocapsídeo (N),
a phosphoproteina (P), Large (L), a Matriz (M), a Hemaglutinina (H), e a proteína de fusão (F). No envelope lipídico estão
localizadas as duas glicoproteínas de superfície (F e H) que promovem a entrada e saída do vírus das células do hospedeiro.
A presente investigação visou desenvolver um teste de imunofluorescência indireto (IFI) e imunoistoquímica (IHQ) para o
diagnóstico retrospectivo, 1993-2009, em cérebros de cães, fixados em formol e embebidos em parafina. O total de amostras
analisadas foram 10 cortes de cerebelo e região hipocampal, respectivamente. Para tanto, o anticorpo policlonal, cedido pela
Biovet (título vírus neutralizante de 104.3 TCID50/mL), foi submetido à precipitação com sulfato de amônio a 40%, e feita a
diálise em seguida, frente uma solução tamponada de salina pH 7.4. Os cortes foram desparafinizados e hidratados em
séries de xilol e álcool, e tratados com solução tamponada de fosfato + 0.5% Triton por 30 min à temperatura ambiente. Para
a IFI, cortes das duas regiões em duplicata foram submetidos à adição do anticorpo primário (1:2) e dos conjugados
(streptoavidina Cy3 e FITH), respectivamente. Para a IHQ o kit LSAB foi empregado seguindo procedimentos descritos por
outros autores. As marcações foram classificadas em scores 0 (ausência), 2 (++), 3 (+++), 4 (++++) e 5 (máximo). Os
materiais com mais de 5 anos de fixação no formol apresentaram baixa a média marcação, enquanto os cortes processador
nos anos de 2007-2009, apresentaram resultados acima de 4, na classificação. Não houve diferença estatística em relação às
áreas estudadas nem quanto ao método (IFI e IHQ), entretanto a marcação mais proeminente foi no cerebelo. Em relação às
alterações microscópicas, não houve correlação positiva entre a presença viral e a classificação das lesões. As técnicas aqui
apresentadas, tanto IFI e a IHQ, mostraram-se eficientes no diagnóstico rápido e seguro do vírus da cinomose canina,
podendo ser aplicada em estudos retrospectivos ou no diagnóstico diferencial da raiva canina.
*Bolsa FAPESP 2008/11551-0 e auxílio FAPESP (2008/11534-8).
RESULTADOS PARCIAIS DA AVALIAÇÃO ULTRASSONOGRAFICA EM MODO B E DOPPLER COLORIDO DA
MORFOLOGIA GENITURINÁRIA DE FÊMEAS GOLDEN RETRIEVER ACOMETIDAS PELA DISTROFIA MUSCULAR. FONSECA, C.M.G.T.; ALVES, J.P.; ALVES, F.R.; MIGLINO, M.A. Universidade de São Paulo, Faculdade de Medicina
Veterinária e Zootecnia, Departamento de Cirurgia, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva, 87, CEP 05508-270, São Paulo,
SP, Brasil. E-mail: [email protected] Partial results of evaluation of genitourinary morphology of female Golden
Retriever affected by Muscular Dystrophy by B-mode ultrasound and color Doppler.
A Distrofia Muscular de cães da raça Golden Retriever (GRMD) é uma miopatia hereditária de caráter recessivo, ligada
ao cromossomo X, causada pela ausência da distrofina e geneticamente homóloga à distrofia muscular de Duchenne, que
acomete humanos. O objetivo foi verificar a viabilidade de observação de modificações morfológicas e estabelecer a característica ultrassonográfica de estruturas reprodutivas e do sistema urinário em fêmeas Golden Retriever acometidas pela
Distrofia Muscular, através da ultrassonografia em modo B e em Doppler colorido. Até o momento, foram realizados
exames ultrassonográficos em 4 fêmeas da raça Golden Retriever, com, em média, 6 meses de idade acometidas pela
Distrofia Muscular, e provenientes do Canil GRMD-Brazil do Setor de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres da
Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, FMVZ/USP. O aparelho de ultrassom
utilizado é do tipo Sonosite Micromaxx, com transdutor microconvexo multifrequencial L25e e freqüência variando entre 6 a
13 MHz. O fluxo sanguíneo pôde ser observado pelo uso ultrassom em modo Doppler. Resultados preliminares apontaram
que em todas as avaliações, a vesícula urinária encontrava-se repleta de conteúdo anecogênico e parede com espessura
normal (até 2 mm). O corpo do útero (média 1,3 cm de diâmetro) apresentou-se como estrutura tubular localizada dorsal
à vesícula urinária. Parênquima renal apresentou ecogenicidade normal. A média de comprimento dos dois rins foi de 7,23
± 0,18 cm. De acordo com Evans, o comprimento renal de cão de porte médio pode variar entre 6 e 9 cm. O volume renal
médio foi de 2,37 ± 0,18 cm3/kg. Estudos comprovam que o volume renal está diretamente relacionado com o peso do
animal. De acordo com Sampaio e outros. e Nyland e outros. o volume renal pode variar entre 1,99 – 3,0 cm3/kg e 2,1 -2,8
cm3/kg, respectivamente. O estudo através do Doppler espectral para a vascularização renal não mostrou diferença entre os
rins direito e esquerdo. Portanto, através dos dados obtidos até o presente momento, não foram visibilizadas alterações
ultrassonográficas da morfologia genitourinária de fêmeas Golden Retriever acometidas pela Distrofia Muscular.
Biológico, São Paulo, v.71, n.2, p.19-51, 2009
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