56º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 56º Congresso Brasileiro de Genética • 14 a 17 de setembro de 2010 Casa Grande Hotel Resort • Guarujá • SP • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2 48 Análise in silico de vias metabólicas e reanotação de genes do patógeno de cana-de-açúcar Leifsonia xyli subsp. xyli Soares, RC 1; Camargo, LEA 3; Paulino, LC 1; Monteiro-Vitorello, CB 2 Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH), Universidade Federal do ABC (UFABC) Departamento de Genética, Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” (ESALQ – Universidade de São Paulo) 3 Departamento de Fitolatolologia e Nematologia, Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” (ESALQ – Universidade de São Paulo) [email protected] 1 2 Palavras-chave: Leifsonia, raquitismo da soqueira, análise comparativa, genoma. Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), bactéria Gram-positiva pertencente ao filo Actinobacteria, é o agente causador do raquitismo da soqueira, sendo responsável por grande perda econômica na produção de cana-de-açúcar. Estudos da biologia de Lxx e análises genéticas e funcionais são dificultados pelo crescimento fastidioso da bactéria in vitro, mesmo em meio de cultura considerado rico em nutrientes. O sequenciamento completo do genoma de Lxx revelou um grande número de pseudogenes, sugerindo um processo de decaimento genômico associado à restrição de nicho ecológico desta bactéria. A deleção ou interrupção de genes com consequente perda de função poderiam estar associados ao crescimento lento da bactéria in vitro. A disponibilidade da sequência completa do genoma e a predição funcional dos genes tornaram possível a análise das vias metabólicas e criação de hipóteses sobre auxotrofias. Com o objetivo de identificar possíveis auxotrofias em Lxx que estariam associadas ao seu crescimento lento in vitro, foram analisadas e descritas todas as vias de biossíntese de aminoácidos, vitaminas e cofatores desta bactéria, comparando-as a organismos filogeneticamente próximos: Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm) e Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus (Cms), patógenos de tomate e batata, respectivamente. Assim como para Lxx, as sequências completas dos genomas de Cmm e Cms também estão disponíveis. As análises consistiram na verificação da presença ou ausência de genes preditos para a biossíntese de cada aminoácido, vitamina ou cofator, utilizando-se os bancos de dados KEGG (Kyoto Enciclopédia de Genes e Genomas), LBI (Laboratory for Bioinformatics – Leifsonia xyli subsp. xyli Genome Project), GenBank (NCBI), Protein (NCBI), Uniprot e BRENDA; a ferramenta BLAST e base na literatura. As análises mostraram que Lxx é possivelmente auxotrófica para tiamina, biotina e nicotinato, além de metionina e cisteína (previamente descrito). Um panorama compreensivo das vias de biossíntese analisadas foi construído incluindo todas as interligações possíveis entre os substratos e produtos das diferentes vias. Análises comparativas permitiram a reanotação de diversos genes. Onze genes com função até então desconhecida ou parcialmente conhecida foram reanotados e associados a vias metabólicas. Além destes, 20 genes previamente anotados, porém sem função atribuída nas vias analisadas foram incluídos a passos enzimáticos das vias. O trabalho realizado poderá facilitar os estudos para o desenvolvimento de um meio de cultura para crescimento in vitro de Lxx. Apoio financeiro: FAPESP, CNPq