título do resumo

Seleção de bactérias endofíticas da planta Baccharis dracunculifolia DC
(Asteracea) com atividade antifúngica contra Sclerotinia sclerotiorum
Bruno Henrique Gonçalves de Aguiar Milhim (EAIC/PROIC-UEL), Giovana
Oliveira Gutuzzo, Elizete Pains Rodrigues, e-mail: [email protected]
Universidade Estadual de Londrina/Departamento de Ciências
Biológicas/CCB.
Área e sub-área do conhecimento: Genética/Genética Molecular e de
Microrganismos.
Palavras-chave: Antagonismo, potencial biotecnológico, actinobactérias
Resumo
Plantas nativas da flora brasileira constituem uma fonte promissora para a
bioprospecção de microrganismos com potencial de aplicação biotecnológica
em diferentes áreas de interesse. Neste contexto, as plantas medicinais são
especialmente importantes para a bioprospecção de microrganismos
associados com potencial aplicação na prospecção de antimicrobianos e outras
biomoléculas ativas. O laboratório de Genética de Microrganismos da
Universidade Estadual de Londrina possui uma coleção de isolados de
actinobactérias endofíticas da planta Bacharis dracunculifolia, as quais foram
utilizadas para analisar as atividades antagônicas contra o fungo fitopatogênico
Sclerotinia sclerotiorum, deste modo, selecionando isolados promissores para a
produção de compostos antimicrobianos. Pode-se avaliar que houve resultados
notáveis provenientes de 10 isolados dentre os 15 analisados.
Introdução e objetivo
Espécies do gênero Baccharis sp. (Asteraceae), são consideradas as plantas
mais comumente utilizadas para uso medicinal e para a descoberta de
produtos naturais, sendo, portanto, promissoras para a busca de
microrganismos endófitos e/ou epifíticos produtores de compostos bioativos,
como, por exemplo, antibióticos, enzimas, entre outros (Gunatilaka, 2006). .
Algumas substâncias apresentam potencial para ser aplicada na
biotecnologia despertando o interesse por estes microrganismos como uma
fonte destes compostos para o desenvolvimento de novos medicamentos e/ou
agroquímicos (Strobel et al., 2004).
1
O Laboratório de Genética de Microrganismos da Universidade Estadual
de Londrina possui uma coleção de actinobactérias endofíticas da planta
Bacharis dracunculifolia. Desta forma, este projeto teve como objetivo avaliar
isolados de actinobactérias de B dracunculifolia quanto à sua atividade
antagônica contra fungos fitopatogênicos e selecionar isolados promissores
para a produção de compostos antimicrobianos.
Procedimentos metodológicos
Foram estudados 15 isolados de actinobacterias provenientes da coleção
de culturas do Laboratório de Genética de Microrganismos da Universidade
Estadual de Londrina. Os isolados foram cultivados em meio BDA sólido para a
recuperação dos isolados a partir dos estoques. Os isolados foram avaliados
quanto a sua atividade antagonista contra o fungo fitopatogênico Sclerotinia
sclerotiorum pela técnica de cultura pareada conforme descrito por (Crowford et
al., 1993).
Para os ensaios, os isolados de bactérias foram inoculados (estrias) nos
cantos opostos da placa de meio BDA (HIMEDIA) e incubados por 7 dias em
BOD a 28°C. Após este período, discos com 6 mm de colônias fúngicas, précultivadas em meio BDA por 3-4 dias a 25°C, foram depositados no centro da
placa de petri. O experimento foi feito em triplicata e como controle os discos
foram inoculados em placas de meio BDA na ausência da bactéria antagonista.
Após crescimento a 28°C por 3-4 dias, a inibição do crescimento do fungo foi
avaliada.
A porcentagem de inibição do crescimento (%) foi determinada conforme
descrito por Edginton et al. (1971) empregando-se a formula: Porcentagem de
inibição (%IC) = [(Dc – Dt/Dc) x 100], onde Dc é o diâmetro da colônia do fungo
2
patogênico no tratamento controle e e Dt é o diâmetro da colônia do fungo
patogênico na cultura pareada.
Resultados e discussão
No ensaio de cultura pareada contra o fungo S.sclerotiorum foram
testados 15 isolados de actinobactérias (Tabela 1). Todos os isolados
apresentaram atividade antagônica, com % de inibicção do crescimneto do
fitopatógeno de 38,3% a 89,3%.
Tabela 1: Avaliação de isolados actinobactérias quanto à atividade antagônica
contra o fungo fitopatogênico S. sclerotiorum
ISOLADOS
DC (mm)
DT (mm)
%IC = [DC-DT)/DC] X100
Ac384
90
9,6
89,3
Ac334
90
10
88,9
Ac344
90
10
88,9
Ac388
90
10
88,9
Ac180
90
13,3
85,2
Ac348
90
15,5
82,8
Ac359
90
22,3
75,2
Ac181
90
39
56,7
Ac371
90
28,5
68,3
Ac399
90
34,3
61,9
Ac360
90
34,5
61,7
Ac113
90
39
56,7
Ac397
90
39
56,7
Ac361
90
42,5
52,8
Ac18
90
55,5
38,3
3
Figura 1: Actinobacterias que apresentaram forte inibição.
Figura 2: Actinobacterias que apresentaram media inibição.
Conclusão
Quatro isolados apresentaram forte inibição com %IC acima de 88%
(Ac384, Ac334, Ac344 e Ac388) (Tabela 2 , Figura 1) e quatro apresentarão
inibição média com %IC entre 68-85% (Ac180, Ac348 , Ac359 e Ac371)
(Tabela 2 , Figura 2).
Referências
GUNATILAKA, L.A.A. Natural Products from Plant-Associated Microorganisms:
Distribution, Structural Diversity, Bioactivity, and Implications of Their Occurrence. J.
Nat. Prod., v. 69, p.509-526, 2006.
STROBEL G.A., DAISY B.H., CASTILLO U., HARPER J. Natural products from
endophytic microorganisms. J Nat Prod, v. 67, p. 257-268, 2004
4