universidade do estado do amazonas - uea

UNIVERSIDADE DO ESTADO DO AMAZONAS - UEA
PRÓ-REITORIA DE PÓS-GRADUAÇÃO E PESQUISA - PROPESP
ESCOLA SUPERIOR DE CIÊNCIAS DA SAÚDE - ESA
CURSO DE MESTRADO EM BIOTECNOLOGIA E RECURSOS NATURAIS – MBT
Aluno: Israel Paes Romano
Projeto: “Triagem de Fungos da Amazônia como Potenciais Fornecedores de Lípase para aplicação em
Biocatálise”.
Data: 25/09/2009
Hora: 09:00 h
RESUMO
Neste trabalho, fungos isolados de plantas da Região Amazônica foram avaliados quanto ao potencial de
aplicação em biocatálise como fornecedores de lipases ligadas ao micélio, através de ensaios de atividade
sintética, enantiosseletiva e hidrolítica. Para avaliação da atividade sintética, os fungos foram testados em
reações de esterificação (síntese de oleato de pentila e de linoleato de dodecila) e transesterificação (síntese
do palmitato de etila), utilizando-se a enzima comercial Novozym 435 como padrão de referência (100% de
conversão). Dentre 57 isolados testados, 9 obtiveram percentuais de conversão acima de 30% em pelo menos
uma das três reações de triagem da atividade sintética, tendo os isolados UEA_007 e UEA_115 chegado muito
perto do padrão de referência na síntese de linoleato de dodecila, alcançando, respectivamente, 98% e 94% de
conversão. As 9 cepas com melhores resultados nas reações de síntese foram avaliadas quanto a atividade
enantiosseletiva na resolução do (R,S)-2-octanol. Os resultados obtidos com isolado UEA_115 (ees 29%; eep
99%; c 22%; E > 200), indicam o potencial desta cepa
para resolução de álcoois racêmicos. Junto com o
UEA_115, os isolados UEA_053 e UEA_006, previamente testados na resolução do (R,S)-2-octanol,
foram
utilizados como biocatalisadores na resolução do fármaco (R,S)-ibuprofeno. Nas condições empregadas neste
trabalho, as cepas não apresentaram capacidade de resolução para o fármaco. A atividade hidrolítica de 18
isolados foi testada por meio de um ensaio em placa utilizando óleo de oliva como substrato. Apesar de mais
seletivo do que o ensaio usando tributirina, o ensaio com óleo de oliva apresentou maior dificuldade na
preparação do meio de cultura (emulsificação e homogeneidade), além da possibilidade verificada de
ocorrência de falsos negativos. Assim não se encontrou vantagens no uso desta metodologia para a triagem
preliminar de fungos produtores de lipase. Com este estudo foi possível demonstrar o real potencial de
fungos amazônicos como fornecedores de lipases para biocatálise.
Palavras-chaves: fungos amazônicos, lipase, biocatálise, biotransformação
Orientadora: Profª Drª Sandra Patricia Zanotto
Co-orientadora: Profª Drª Patrícia Melchionna Albuquerque
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