título do resumo

Avaliação da exposição à metformina durante gestação e lactação sobre a
reatividade da aorta abdominal e torácica da prole de ratos.
Kawane Fabricio Moura, Graziela Scalianti Ceravolo. e-mail: [email protected]
Laboratório de Farmacologia Vascular, Departamento de Ciências
Fisiológicas, Universidade Estadual de Londrina
Área e sub-área do conhecimento:
Palavras-chave: Reatividade vascular; exposição intrauterina a fármacos;
metformina.
Resumo
O princípio de que a incidência de certas doenças dos adultos, pode estar
ligada ao desenvolvimento uterino é chamado de “Origem Desenvolvimentista
da Saúde e Doença” ou DOHaD (“Developmental Origins of Health and
Disease”) e baseia-se na percepção de que eventos que ocorrem durante o
desenvolvimento do organismo, como a exposição materna a fármacos, podem
afetar o desenvolvimento morfológico e funcional de órgãos, o que está
relacionado com a origem de doenças tardiamente. A metformina é uma
biguanida utilizada como alternativa terapêutica, no tratamento de diabetes
gestacional, embora atravesse a placenta e tenha sido detectada no cordão
umbilical em concentrações iguais as do sangue materno, é considerada um
medicamento seguro durante toda a gestação, inclusive no primeiro trimestre.
Em camundongos, a exposição intrauterina à metformina causa na vida adulta,
aumento do peso corpóreo, do depósito de gordura visceral, da glicemia de
jejum e intolerância a glicose, indicando que a metformina pode causar na prole
adulta alterações metabólicas, tais como obesidade e diabetes, o que
favoreceria o desenvolvimento de doenças cardiovasculares. Portanto, existe a
necessidade de mais estudos para caracterizar as alterações funcionais que
este fármaco pode causar na vida adulta da prole exposta durante o
desenvolvimento. Sendo assim, o objetivo deste estudo será avaliar na prole
masculina exposta a metformina durante a gestação e amamentação a
resposta contrátil da aorta abdominal e torácica.
Introdução e objetivo
A metformina é uma biguanida amplamente utilizada para tratar
resistência à insulina, diabetes melitus tipo 2, síndrome do ovário policístico
(GLUECK et al., 2002; VIOLLET et al., 2012). Mulheres diabéticas ou com
1
síndrome do ovário policístico tratadas com este fármaco antes da gestação,
em geral continuam o uso após engravidarem, classificando este como
categoria B (GLUECK et al., 2002, JOHNSON, 2011).
Em um estudo randomizado, realizado em mulheres com diabetes
gestacional foi demonstrado que a exposição intrauterina a metformina não
altera o crescimento de crianças expostas a este fármaco (BONEY et al.,
2005).Entretanto, ainda não está claro se a exposição intrauterina a metformina
pode resultar em benefícios metabólicos para prole de mães obesas e
diabéticas (ALI et al., 2011; SCARPELLO ET AL., 2008).
O objetivo do trabalho foi avaliar, em ratos Wistar adultos que foram
expostos à metformina durante a gestação e a amamentação a responsividade
da aorta torácica ao agente vasoconstritor fenilefrina. Paralelamente, foi
padronizada a técnica de reatividade da aorta abdominal também em ratos
expostos à metformina.
Procedimentos metodológicos
Animais e exposição à Metformina
Os procedimentos utilizados neste projeto foram aprovados pelo Comitê
de Ética no Uso de Animais da Universidade Estadual de Londrina (CEUA no
6996.2015.02). Para geração parental foram utilizados ratos e ratas albinos
Wistar.
Para o acasalamento, no final da tarde foi colocado um macho em cada
gaiola contendo duas fêmeas. Na manhã do dia seguinte, o esfregaço vaginal
foi realizado e a fêmea considerada prenhe se no esfregaço fossem
observados espermatozóides e a fase estro. Neste dia, denominado dia
gestacional (DG) 0, as fêmeas foram distribuídas aleatoriamente nos seguintes
grupos experimentais:
1) Ratas tratadas com metformina (293mg/Kg/dia), por via oral (gavagem)
do DG0 até o dia do desmame da ninhada, ou seja, dia pós-natal (DPN)
21.
2) Ratas tratadas com água, por via oral (gavagem) do DG0 até o DPN 21.
Grupos experimentais
As proles foram divididas nos seguintes grupos experimentais:
1) Metformina (MetGL): ratos adultos que as mães foram tratadas com
metformina, por gavagem do DG0 até DPN 21.
2) Controle gestacional e lactação (CtrGL): ratos e ratas adultos que as
mães foram tratadas com água, por gavagem do DG0 até DPN 21.
Reatividade da porção da aorta abdominal e torácica
2
Os ratos foram anestesiados com tiopental (40 mg/kg, ip), e após
toracotomia, as porções abdominal e torácica da aorta foram removidas,
dissecadas e seccionadas em 2 anéis transversais cada. Em um dos anéis o
endotélio foi removido (E-) e no outro anel, o endotélio foi preservado (E+). Os
anéis de aorta foram montados em banhos para estudo de órgãos isolados,
mantidos em solução de Krebs, a 37°C. Para a avaliação da função contrátil,
foram feitas curvas concentração-efeito cumulativas para fenilefrina (10-9 a 103M), agonista alfa1-adrenérgico. O mesmo protocolo experimental foi adotado
para a aorta torácica. As comparações entre os diferentes grupos
experimentais foram realizadas pela determinação das respostas máxima e
concentração efetiva 50 (EC 50) para o agonista. As comparações foram feitas
com o teste ANOVA de uma via, seguido do teste de Tukey, considerando a
diferença estatística quando p<0,05.
Resultados e Discussão
Durante o desenvolvimento deste projeto foi realizada a padronização do
protocolo de reatividade da aorta abdominal, entretanto, devido às dificuldades
encontradas não foi possível apresentar resultados referentes a esta porção da
aorta. Por conseguinte, os dados apresentados neste relatório são referentes à
reatividade da aorta torácica.
A Rmax para fenilefrina em anéis foi semelhante entre os grupos MetGL
E+ [2,151±0,22 (8)] e CtrGL E+ [2,366±0,24 (10)]; MetGL E- [3,384±0,34 (8)] e
CtrGL E- [3,056±0,26 98)]. Segundo Kinnan e colaboradores (2015) o uso de
metformina para o tratamento de gestantes com diabetes mellitus 2
apresentam efeitos protetores sobre o endotélio das mesmas, seu mecanismo
ainda precisa ser melhor elucidado. Benefícios para a prole também foram
descritos no trabalho de Rowan e colaboradores (2011), onde foi observado um
menor número de crianças entre os 5-7 anos com excesso de peso. O presente
estudo acrescenta a informação de que o tratamento de ratas prenhes com
metformina não altera a resposta da aorta torácica para fenilefrina.
Não houve diferença no pD2 para fenilefrina, entre os grupos
experimentais MetGL E+ [6,836±0,08 (8)] e CtrGL E+ [6,895±0,07 (10)]; MetGL
E- [8,169±0,27 (8)] e CtrGL E- [8,048±0,12 (8)].. A pD2 é um parâmetro
utilizado para avaliar potência de um agonista, considerando a sensibilidade de
tecidos a um agonista e a afinidade deste agonista ao seu receptor (ARAUJO
et al. 2013). Podendo sugerir-se que a sensibilidade dos receptores
adrenérgicos não foi alterada pela exposição intrauterina e lactacional à
metformina.
Conclusões
3
Com o presente estudo foi possível concluir que o tratamento com metformina
em ratas durante a gestação e amamentação não altera a resposta da aorta
torácica à fenilefrina. Sugerindo que a exposição a este fármaco é seguro para
o sistema vascular da prole exposta.
Agradecimentos
Agradeço à orientadora e aoPIBIC pela concessão da bolsa de iniciação
científica.
Referências
ALI, A.T. et al. Insulin resistance in the control of body fat distribution: a new
hypothesis. Horm Metab Res. v. 43, p.77–80, 2011.
ARAUJO, S. J. A. et al.Treinamento Resistido Controla a Pressão Arterial de
Ratos Hipertensos Induzidos por L-NAME. Arq Bras Cardiol. v.100, p.339-346,
2013.
BONEY, C.M. et al. Metabolic syndrome in childhood: association with birth
weight, maternal obesity, and gestational diabetes mellitus. Pediatrics. V.115,
p.290–296, 2005.
GLUECK, C.J. et al.Pregnancy outcomes among women with polycystic ovary
syndrome treated with metformin. Hum Reprod. v.17, p.2858-2864, 2002.
JOHNSON, N. Metformin is a reasonable first-line treatment option for nonobese women with infertility related to anovulatory polycystic ovary syndrome –
a meta-analysis of randomised trials. Aust N Z J Obstet Gynaecol. v.51, n. 2,
p.125–129, 2011.
KINAAN, M. et al. Metformin: An Old Drug for the Treatment of Diabetes but a
New Drug for the Protection of the Endothelium. Med Princ Pract. v.24, p.401–
415, 2015.
ROWAN, J. A. et al. Metformin in Gestational Diabetes:The Offspring Follow-Up
(MiG TOFU). Diabetes care. V.34, p.2279-2284, 2011.
SCARPELLO, J.H.; HOWLETT, H.C. Metformin therapy and clinical uses. Diab
Vasc Dis Res. v. 5, p.157–167, 2008.
VIOLLET, B. et al. Cellular and molecular mechanisms of metformin: an
overview. Clin Sci (Lond). v.122,n.6, p.253–270, 2012.
4