Zika/Dengue TRIO ECO Teste

Zika/Dengue TRIO ECO Teste
Porque precisamos utilizar o TRIO Zika/Dengue Ab/Ag ECO Teste?
• A homologia da proteína do vírus Zika e Dengue está entre 53-58%, de modo que o teste sorológico Zika pode
apresentar reação cruzada com o vírus da dengue.
ZIKV
DENV 1
DENV 2
DENV 3
DENV 4
JENV
WNV
YFV
CHIKV (E1)
CHICK (E2)
57.4
53.9
57.6
56.4
54.6
54.7
42.2
4.8
6.7
68.5
77.5
63.8
49.7
50.9
43.0
5.7
6.4
67.7
63.8
46.5
47.7
43.8
5.3
6.4
63.1
47.5
46.2
41.2
3.9
7.2
46.9
49.3
39.8
4.6
7.2
77.6
43.8
7.0
5.7
44.0
7.2
7.2
7.1
7.9
ZIKV
DENV 1
DENV 2
DENV 3
DENV 4
JENV
WNV
YFV
CHIKV (E1)
6.9
CHIKV (E2)
• Para pacientes infectados pelo Zika vírus que tenham sido previamente infectados pelo vírus da dengue:
• Produção de título elevado de IgG comum a Dengue e Zika.
• Geração de IgM específico para Zika insuficiente.
• O PRNT (Teste por neutralização de redução de placas) pode não discriminar anticorpos anti-Zika virus e anticorpos
que tenham reação cruzada em todas as pessoas que tenham sido previamente infectadas ou vacinadas contra um
Flavivirus relacionado.
Os testes PRNT (Teste por neutralização de redução de placas) e MAC ELISA são complicados e demorados.
Teste sorológico
RT-PCR
Infecção secundária
por Zika/Dengue
Início da febre
Infecção
primária
por Dengue
Viremia
RNA
IgG
IgM
IgM
“O uso de testes rápidos altamente sensíveis é mais crítico para reduzir a possibilidade de diagnósticos
falsos do Zika e Dengue na fase de triagem, especialmente onde os métodos de testes de laboratório
não estão disponíveis. “
Algorítimos de testes provisórios
para detecção de arbovírus (23 de março, WHO)
Pacientes com início dos sintomas ≤ 7 dias
Colete sangue e urina
RT-PCRs para DENV, CHIK, ZIKV para testes
sequenciais ou paralelos.
Resultados das reações múltiplas
Interpretação
ZIKV pos, DENV neg, CHIK neg
ZIKV confirmado
ZIKV neg, DENV pos, CHIK neg
DENV confirmado
ZIKV neg, DENV neg, CHIK pos
CHIK confirmado
ZIKV pos e/ou DENV pos ou CHIK pos
Co-detecção e ZIKV confirmado
Um resultado negativo para qualquer teste de PCR não exclui com certeza a infecção
Pacientes com início dos sintomas > 7 dias
Coletar amostra de sangue (para sorologia e RT-PCR)
e urina (apenas para RT-PCR) uma semana após o início dos sintomas.
(Se coletar amostras de soro pareadas**, permitir diferença de 2-3 semanas entre as amostras)
RT-PCR para ZIKV vírus ona urina ou sangue
PCR positivo
Zika confirmado
Outros tipos de amsotras
para RT PCR:
Urina < 30 dias
Semen < 60 dias
PCR negativo
A infecção pelo vírus Zika
não foi definitivamente
excluída
Teste para IgM do DENV, CHIK e ZIKV e outros flavivírus
circulantes de onde a exposição ocorreu
Resultado
Interpretação do laboratório*
ZIKV pos, DENV neg, CHIK neg
ZIKV caso provável
ZIKV neg, DENV pos, CHIK neg
DENV caso provável
ZIKV neg, DENV neg, CHIK pos
CHIK caso provável
ZIKV pos, DENV neg,
CHIK pos
ZIKV caso provável +
CHIK co-infecção
ZIKV pos, DENV pos
e/ou CHIK pos
Provável infecção
por flavivírus +
CHIK co-infecção
*A interpretação final do resultado deve ser feita em conjunto com a apresentação clínica
**Para amostras de soro pareadas, um aumento de quatro vezes em IgM na ausência de um aumento no título de anticorpo para outros flavivírus
é uma maior evidência de infecção recente por vírus Zika
Linha Zika e Dengue
Dengue DUO ECO Teste
• Detecção diferencial de anticorpos IgM/IgG do vírus Dengue
e antígeno NS1 do vírus Dengue
• Armazenamento entre 2-40 ºC
• Amostras: soro, plasma e sangue total
• Volume da amostra: NS1 – 100μl, IgM/IgG - 10μl
• Tempo do teste : 15 mins (não ler após 30 mins)
• Validade: 24M
Dengue IgG/IgM ECO Teste
• Detecção de IgM e IgG específicos para o vírus da Dengue
• Sensibilidade vs ELISA : IgM – 95.5%(77/79), IgG – 97.2%(140/144)
• Especificidade vs ELISA : IgM – 96.6%(346/358), IgG – 96.2%(282/293)
• Armazenamento entre 2-40 ºC
• Amostras: soro, plasma e sangue total
• Volume da amostra: 10μl
• Tempo do teste: 15 mins (não ler após 30 mins)
• Validade: 24M
Dengue NS1 Ag ECO Teste
• Detecção do antigeno NS1 da Dengue
• Sensibilidade vs PCR : 92.9%(184/198)
• Especificidade vs PCR : 98.7%(222/225)
• Armazenamento entre 2-40 ºC
• Amostras: soro, plasma e sangue total.
• Volume da amostra: 100μl
• Tempo do teste: 15 mins (Não ler após 30 mins)
• Validade: 24M
Zika IgG/IgM ECO Teste
• Detecção de anticorpos IgM e IgG específicos para vírus Zika
• Sensibilidade vs PCR : 97.4%(260/267)
• Especificidade vs PCR : 99%(187/189)
• Armazenamento entre 2-40 ºC
• Amostras: soro, plasma e sangue total
• Volume da amostra: 10μl
• Tempo do teste: 15 mins (Não ler após 30 mins)
• Validade: 24M
Zika/Dengue TRIO ECO Teste
• Detecção simultânea de Zika IgM/IgG , Dengue IgM/IgG
e antígeno NS1 da Dengue.
• Armazenamento entre 2-40 ºC
• Amostras: soro, plasma ou sangue total
• Tempo do teste: 15 mins (Não ler após 30 mins)
• Validade: 24M
Zika/Dengue Procedimentos
Dengue DUO ECO Teste
Interpretação
Dengue NS1 Ag Test
Positivo
1 100µl
Ag Dengue
100µl
gue NS1 Ag
NS1 Ag Den
Dengue NS1
15 ~ 30 min.
Ag
Dengue NS1
Ag Dengue
IgM Positivo
C M G
C M G
C M G
C T
C T
C T
NS1/IgM Positivo
IgG/IgM Positivo
C M G
C M G
C T
C T
I NS1
Dengue NS1 Ag
gue NS1 Ag
NS1 Ag Den
I IgM/IgG
Dengue IgM/IgG Test
1
I NS1
2
Assay diluent
Negativo
10µl
C M G
gotas
Assay diluent
I IgM/IgG
Inválido
Se não houver linha de controle,
o teste é inválido.
C T
10µl
drops
Zika IgG/IgM ECO Teste
I NS1
Interpretação
Positivo
1
Assay diluent
10µl
IgG Positivo
C M G
C M G
Do not read
After 30 mins
C M G
2
Zika
IgM/IgG
gotas
15 ~ 30Read
min.at
15 mins
Do not read
After 30 mins
IgG/IgM Positivo
C M G
Read at
Negativo
Zika
Zika
IgM Positivo
15 mins
IgM/IgG
IgM/IgG
drops
Assay diluent
Ag
Dengue NS1
IgG Positivo
I IgM/IgG
Dengue NS1 Ag
Dengue NS1
NS1 Positivo
Inválido
Se não houver linha de controle,
o teste é inválido.
Linha Chikungunya
Chikungunya IgM ECO Teste
• Detecção de anticorpos IgM específico para Chikungunya
• Sensibilidade vs ELISA: 90,3%
• Especificidade vs ELISA: 100%
• Armazenamento entre 2-40C
• Amostras: soro, plasma e sangue total
• Volume da amostra: 30-45uL
• Tempo do teste: máximo 15 minutos
• Validade: 24M
Chikungunya IgG/IgM ECO Teste
• Detecção de anticorpos IgM e IgG específicos para vírus Chikungunya
• Sensibilidade vs ELISA : IgM – 100%(21/21), IgG – 100%(21/21)
• Especificidade vs ELISA : IgM – 97.6%(253/259), IgG – 99.6%(258/259)
• Armazenamento entre 2-40C
• Amostras: soro, plasma e sangue total
• Volume da amostra: 10uL
• Tempo do teste: máximo 15 minutos
• Validade: 24M
Chikungunya Procedimento
Chikungunya IgG/IgM ECO Teste
Interpretação
Positivo
1
Assay diluent
10µl
IgG Positivo
C M G
C M G
Negativo
Zika
Do not read
After 30 mins
C M G
2
Assay diluent
IgM/IgG
CHIKV
3 gotas
15 min.
Read at
15 mins
Do not read
After 30 mins
IgG/IgM Positivo
C M G
Read at
15 mins
IgM/IgG
IgM/IgG
CHIKV
drops
IgM Positivo
Inválido
Se não houver linha de controle,
o teste é inválido.