Fenótipo “inferido” : D+C+E+c-e+cw-KExemplo de tratamento Cloroquina Pré-tratamento Exemplo de tratamento Cloroquina SURPRESA! E- Pré-tratamento Pós-tratamento (2h) Importância da fenotipagem do paciente Demonstra os possíveis aloanticorpos o paciente poderá desenvolver Fenótipo rr D C E c e Cw K k 0 0 + + + 0 0 0 Fya Fyb Jka Jkb M 0 + 0 + + N S s Dia + 0 + 0 33 Importância da fenotipagem do paciente Demonstra os possíveis aloanticorpos o paciente poderá desenvolver Fenótipo rr D C E c e Cw K k 0 0 + + + 0 0 0 Fya Fyb Jka Jkb M 0 + 0 + + N S s Dia + 0 + 0 34 PACIENTE MURPHY, P.H.D., hemácias tratadas por cloroquina A B AB D Ctl RA RB 0 0 0 0 0 4+ 4+ Fenotipagem ABO/ Rh(D): ORh- Pausa no nosso caso: Se tivéssemos outras situações…. MÉTODOS PARA DISSOCIAÇÃO DE ACS LIGADOS ÀS HEMÁCIAS (TAD+) › ACS IgG: – Difosfato de cloroquina – Técnica de Bloqueio frações Fc – TAD até 2+ e/ou pós-cloroquina › ACS IgG + complemento: – ZZAP › ACS IgM: – Lavagem com salina pré-aquecida – Reagentes Thiol (DTT ou 2-ME) 37 ZZAP DTT 0,2M + enzima proteolítica • Mistura de ditiotreitol 0,2M (agente redutor) e papaína (enzima proteolítica) • Dissociar as imunoglobulinas (auto IgG e IgM) e componentes do complemento da membrana eritrocitária de GV TAD+ • O uso do reagente torna possível a fenotipagem de pacientes com TAD+ especialmente para ags dos sistemas Rh e Kidd. • Além disso, prepara hemácias de pacientes com AHAI para técnica de auto-adsorção a quente. ATENÇÃO! • Desnatura os antígenos do sistema KEL, YT, LW e DO e a maioria dos antígenos HTLA, além dos antígenos sensíveis ao tratamento enzimático (MNS,Fy, Xg). E O QUE SIGNIFICA ISTO? COMO PROSSEGUIR? MÉTODOS PARA DISSOCIAÇÃO DE ACS LIGADOS ÀS HEMÁCIAS (TAD+) › ACS IgG: – Difosfato de cloroquina – Técnica de Bloqueio frações Fc – TAD até 2+ e/ou pós-cloroquina › ACS IgG + complemento: – ZZAP › ACS IgM: – Lavagem GV com salina pré-aquecida/ preaquecimento – Reagentes Thiol (DTT 0,01M ou 2-ME 0,1M) 40