CD11c PerCP-eFluor® 710

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CD11c PerCP-eFluor® 710
Também conhecido como: Integrina alfa X, Integrina aX, Leu M5 alfa
Número catálogo(s): 9046-0116-120 (120 testes)
Perfis fluorescentes monócitos de sangue periférico
humano normal sem coloração (histograma azul) ou
com coloração com CD11c PerCP-eFluor® 710
(histograma roxo).
Informação do produto
Conteúdo: CD11c PerCP-eFluor® 710
Condições de conservação: Guarde à
Número catálogo(s): 9046-0116-120 (120 testes)
temperatura entre 2 e 8°C. Não congele.
Clone 3,9
Material sensível à luz.
Concentração: 5 uL (1,0 ug)/teste (um teste é
Cuidado, contém Azida
definido como a quantidade que irá corar
Fabricante: eBioscience, Inc., 10255 Science
1 x 10e6 células em 100 uL)
Center Drive, San Diego, CA 92121, USA
Anfitrião/Isotipo: Rato IgG1, kappa
Representante Autorizado: Bender
HLDA Workshop: III
MedSystems GmbH, uma eBioscience
Formulação: Aquosa tampão, azida sódica ,
Company Campus Vienna Biocenter 2 A-1030
0,09%, pode conter proteína/estabilizador
Viena de Áustria
transportadora.
Uso pretendido
O anticorpo fluocromo monoclonal conjugado 3.9
reage com o antigénio humano CD11c. O CD11c pode
ser detectado em amostras humanas biológicas
usando técnicas imunológicas.
Princípios do teste
Citómetro de fluxo é uma ferramenta útil para medir
simultaneamente propriedades múltiplas físicas de
partículas individuais (tais como células). Células
passam por ficheiro único através do feixe laser.
Quando cada célula passa através do feixe laser,
o citómetro regista como a célula ou partícula espalha
a luz reflectida do laser e emite fluorescência. Usando
o protocolo de análise do citómetro de fluxo, é
possível realizar uma análise em simultâneo das
moléculas ao nível unicelular.
Descrição
O anticorpo monoclonal 3.9 reage ao CD11c humano,
uma cadeia alfaX integrina 150 kDa. O CD11c não
covalente associa-se à integrina beta2 (CD18) para
formar o heterodímero CD11c/CD18. Este complexo é
expresso em monócitos, granulócitos, macrófagos, NK,
células dendítricas e subconjuntos de linfócitos T e B.
O CD11c/CD18 liga-se ao CD54, iC3b e ao figrinógeno
e desempenha um papel nas interacções adesivas de
leucócitos.
Documento # 30889_02_pt • Entrada emvigor: 24-06-2011
Não se destina à distribuição sem o expresso consentimento por escrito. Copyright © 2000-2010 eBioscience, Inc.
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Recolha de espécimes e instruções de
armazenamento
Recolha assepticamente uma amostra de sangue
venoso, por venipunção num tubo de colheita de
sangue, utilizando o anticoagulante adequado
(recomendado EDTA). Mantenha as amostra à
temperatura da sala (18-25°C). Antes da utilização,
misture as amostras agitando ligeiramente.
Materias necessários, mas não fornecidos
• Tubos de teste 12x75 mm
• Tampões (eBioscience Flow Cytometry Staining
Buffer, Cat. No. 00-4222 recomendado)
• Tampão de Lise (eBioscience 1X RBC Tampão de
lise, Cat. No. 00-4333 ou eBioscience Fixação
1 passo /Solução de lise (10X), Cat. No. 00-5333
recomendado)
• Para a coloração intracelular use o Tampão de
fixação IC e Tampão de permeabilização, Nº.
88-8823 (citoquina intracelular ou coloração de
proteína citoplasmática) ou Conjunto de tampão
Foxp3, Cat. Nº. 00-5523 (Para coloração de
proteína nuclear). Consulte a secção dos
Melhores protocolos do sítio Web eBioscience
para os protocolos "Coloração de antigénios
intracelulares para o Citómetro de fluxo".
• Viabilidade da coloração (Viabilidade da solução
de coloração 7-AAD, Cat. Nº. 00-6993 ou Solução
de coloração de iodeto de propídio,
Cat. No. 00-6990 recomendado)
• Pipetas automatizadas
• Centrifugadora
• Misturadora vortex
• Balde com gelo ou frigorífico
• Citómetro de fluxo
Protocolo do Teste
NOTA: Para a coloração intracelular, consulte a secção
dos Melhores protocolos do sítio Web eBioscience
para os protocolos "Coloração de antigénios
intracelulares para o Citómetro de fluxo".
1. Alíquota 100 µL da amostra do teste para os tubos.
2. Adicione 5 µL do anticorpo adequado para cada tubo.
3. Incube 30-60 minutos a 2-8°C. Alternativamente,
as amostras podem ser incubadas à temperatura
ambiente no escuro entre 15-30 minutos.
4. Adicione 2 ml de Tampão de Lise 1X RBC
(à temperatura ambiente) por tubo. Misture
suavemente. (Alternativamente, as amostras
podem ser incubadas com 2 mL 1-step
Fix/Solução Lise.)
5. As amostras incubadas no escuro à temperatura
ambiente por 10 minutos. Não exceda 15minutos
de incubação no Tampão Lise RBC.
6.
7.
8.
Centrifugue as amostras a 300-400 x g durante
5 minutos à temperatura ambiente,
decante/aspire o material flutuante e lave 1 vez
com 2 ml de Solução tampão de coloração para
Citometria de fluxo.
Centrifugue as amostras a 300-400 x g durante
5 minutos à temperatura ambiente, decante/aspire
o material flutuante.
Ressuspenda o precipitado com coloração em
1 mL de Solução tampão de coloração para
Citometria de fluxo e analise as amostras num
citómetro de fluxo.
Limitações
1. Para um desempenho óptimo dos anticorpos
conjugados de fluorocromo, armazene os frascos
a 2-8°C no escuro. Não congele.
2. Centrifugue o frasco do anticorpo antes de abrir
para recuperar o volume máximo.
3. Salvo quando referido no protocolo, toda a
coloração deve ser realizada no gelo ou a 2-8°C
com a mínima exposição à luz.
Características de desempenho
A consistência dos reagentes de elevada qualidade é
garantida ao testar cada lote de anticorpos
monoclonais quanto à conformidade das
características de um reagente padrão. Os dados
citométricos de fluxo representativos são incluídos
quando for apropriado.
Evidência de deterioração
Para questões ou preocupações sobre o desempenho
ou qualidade dos produtos recebidos, contacte o
Suporte Técnico da eBioscience (ver abaixo).
Referências
Procedures for the Collection of Diagnostic Blood
Specimens by Venipuncture (H3-A6), 3rd Edition
publicado por National Committee for Clinical
Laboratory Standards.
McMichael AJ, Beverly PCL, et al. eds. Leucocyte
Typing III: White Cell Differentiation Antigens. Oxford
University Press. New York. 1987.
Knapp W, Dorken B, et al, eds. Leucocyte Typing IV:
White Cell Differentiation Antigens. Oxford University
Press. New York. 1989.
Schlossman S, Bloumsell L, et al, eds. Leucocyte Typing
V: White Cell Differentiation Antigens. Oxford
University Press. New York. 1995.
Documento # 30889_02_pt • Entrada emvigor: 24-06-2011
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