Influência do Metimazol (MMI) sob os Níveis Séricos dos

INFLUÊNCIA DO METIMAZOL (MMI) SOB OS NÍVEIS SÉRICOS DOS HORMÔNIOS DA TIREÓIDE EM
RATOS E CAMUNDONGOS
Lima Filho, G.L.; Lima, G.M.T.*; Carvalho, E.B.; Lima, G.M.S.; Neves, S.R.S.e Catanho, M.T.J.A.
Universidade Federal de Pernambuco
CCB / DBR / UFPE
*CCS / DMC / UFPE
Av. Prof. Morais Rego S/N
50670-901, Recife - PE, Brasil
RESUMO
A glândula tireóide secreta e metaboliza os hormônios tireoideanos os quais regulam o
consumo de O2 da maioria das células do corpo. Sua síntese e liberação é controlada pelo
hormônio adenohipofisário como também por drogas que modulam a concentração dos níveis
séricos de T4 e T3 a nível da glândula tireóide ou em tecidos periféricos. O presente estudo visa
avaliar a influência sinérgica sobre a secreção basal dos hormônios tireoideanos em ratos e
camundongos, após administração de drogas tireoideanas e não tireoideanas. O tratamento com o
Metimazol (MMI), por via oral, em ratos e camundongos causa modificações nos níveis séricos de
tiroxina total (T4 total) e triiodotironina total (T3 total) obtidos através da cinética de tratamento
(1 a 14 dias). Podendo observar que o MMI, em ratos, reduz os níveis séricos de T4 total de
maneira significativa do que em camundongos. Entretanto, o MMI promove um aumento
significativo nos níveis séricos de T3 total no 7º dia de tratamento em ratos, não sendo observado
em camundongos.
I. INTRODUÇÃO
A formação dos hormônios tireoideanos (HTs)
ocorrem na molécula de tireoglobulina, sobre o controle da
tireotrofina hipofisária (TSH). A tireoglobulina (TGB) é
uma glicoproteína sintetizada na célula tireóidea, a qual
participa das etapas para a formação dos hormônios
tireoideanos, pelas células foliculares da glândula tireóide,
que são: captação do iodeto pela célula tireóide; oxidação
do iodeto a iodo; iodação da tireoglobulina (TGB);
proteólise desta molécula; liberação do hormônio na
circulação e conversão da tiroxina (T4) em triiodotironina
(T3) nos tecidos periféricos. Assim, o controle de todos
esses processos se torna bastante complexo, permitindo que
os mais variados fatores interfiram na função tireoideana.
Drogas tiocarbamida, particularmente Propiltiouracil (1),
Metimazol (2, 3) e Carbimazol, são inibidores potentes da
peroxidase tireoidal e bloqueador da síntese dos HTs,
clinicamente usadas no controle do hipertireoidismo. A
atividade aumentada no hipertireoidismo é explicada, em
parte, pelo alto nível de T3 nesta síndrome. A enzima é
inibida pelo Propiltiouracil e em menor proporção pelo
MMI, o qual mostra porque o Propiltiouracil é mais
efetivo que o MMI na redução do nível de T3 em
hipertireoidismo (4). A inibição da atividade tipo 1 5'deiodinase resulta na conversão empareada de T4 para T3
(5), porém o Propiltiouracil e Ipodato diminui a conversão
intracelular de T4 para T3; outras condições que podem
modificar a taxa de T4 para T3 no soro, requer
interpretação de testes da tireóide mas não modificam a
produção intracelular de T3. Deficiência na dieta de
selênio também diminui a conversão de T4 para T3 (6,7 e
8). Este trabalho tem por objetivo avaliar a influência do
MMI, quando administrado por via oral, comparando seus
efeitos em ratos e camundongos, observando os níveis
séricos de T4 e T3 totais através da cinética de tratamento.
II. MATERIAIS E MÉTODOS
Animais de Experimentos
A - Ratos Wistar adultos, 60 -70 dias, machos,
foram mantidos no biotério, em gaiolas apropriadas cuja
população não ultrapassou a 05 (cinco) animais.
III. RESULTADOS
Os efeitos observados após administração oral de
MMI, em ratos adultos machos, em diferentes tempos de
tratamento, sobre o nível sérico do hormônio T4 total,
estão demonstrados na fig. 1. Pode-se observar que durante
o tratamento no período de 2 a 14 dias, os ratos que
receberam solução salina, (veículo), não apresentaram
alterações significativas nos níveis séricos de T4 total.
Enquanto que, os ratos tratados por 2 dias com MMI, os
níveis séricos de T4 total foram em média
significativamente diferentes em relação ao controle,
podendo-se observar um aumento de 71 %. Por outro lado,
em 4 e 7 dias de tratamento com o MMI, observa-se que os
níveis séricos de T4 total são significativamente diferentes
quando comparado ao controle, apresentando uma redução
de 27,4 % e 48,1 % respectivamente. Pode-se observar que
os níveis séricos de T4 total ao 14º dia de tratamento não
apresentaram alterações significativas em relação ao
controle.
Nos efeitos observados em camundongos machos
adultos, tratados com MMI, por via oral, fig. 1, verifica-se
uma redução dos níveis séricos de T4 total de 56 %, 34 %,
37 % e 25 % ao longo dos tempos de tratamento da droga,
(1 - 14 dias). Entretanto, pode-se verificar que os níveis
séricos de T4 total dos animais controle de no 1º dia de
tratamento é elevado em relação aos demais tempo de
tratamento. Os resultados apresentados são em média
significativamente diferentes ao nível de significância de 5
%.
16
14
10
12
8
10
6
8
6
4
4
2
2
0
T4 (µg/dl) (Camundongos)
12
T4 ( µg/dl) (Ratos)
B - Camundongos albinos, machos, adultos Mus
musculus, 60 - 70 dias foram mantidos no biotério, em
gaiolas apropriadas cuja população não ultrapassou a 05
(cinco) animais. Os animais receberam diariamente água e
alimentação adequada, iluminação natural e temperatura
ambiente variando de 25 - 27 ºC. Para cada grupo de
animais tratados, um correspondente grupo controle,
recebendo solução fisiológica, foi mantido nas mesmas
condições.
Administração de Drogas. Ratos e camundongos
machos, adultos, de 60 - 70 dias de vida, em grupos de 5 10 animais, receberam Metimazol (MMI) dissolvido em
solução salina à 0,9 %, nas doses de 0,1 % na água de
beber, por via oral. Os tempo de tratamento à droga foram
de 2, 4, 7 e 14 dias para os ratos e de 1, 2, 7 e 14 dias para
os camundongos. Durante estes períodos os animais foram
observados e pesados. Após cada período de administração
do MMI, os animais foram sacrificados, o sangue foi
colhido para obtenção do soro.
Determinação dos níveis séricos de T4 e T3 por
radioimunoensaio (RIE). O experimento foi realizado em
tubos contendo GammaCoat M T4 total, devidamente
marcados e em duplicatas. Para cada tubo, foi adicionado
10 µl do soro T4 e soro das amostras, sendo que, nos tubos
branco, adiciona-se 10 µl de tampão (1 e 2). Em seguida,
foi adicionado 1 ml de 125I-T4 com atividade específica de
1,85 x 105 Bq (< 1 µg/mL T4) em todos os tubos e agitado
gentilmente. A incubação foi realizada por um período de
45 minutos, a temperatura ambiente. No final da
incubação, os tubos foram decantados e todo líquido foi
removido, exceto os tubos de contagem ( T1 e T2 ). Este
procedimento é semelhante ao descrito para o T4 total
exceto que o período de incubação é de 60 minutos na
temperatura de 37 ± 2 ºC em banho-maria e o volume das
amostras e padrões é de 50 µl/tubo, na presença de 125IT3 com atividade específica de 2,59 x 105 Bq (< 1 µg/mL
T3). Após o procedimento de incubação e decantação, os
tubos foram levados para o contador gama. Os resultados
foram determinados através da curva padrão por
interpolação em relação com a contagem B/Bo % em
função da concentração de T4 e T3 total (abcissas), em
gráfico semi-logarítmo. As amostras foram determinadas
através das curvas padrões.
0
2
4
7
14
1
2
7
14
Tempo (Dias)
Figura 1:
Determinação dos níveis séricos de T4 total em
ratos e camundongos, após administração de Metimazol
(MMI) por via oral. Controle (s) e tratados (n). Os
valores representados são as médias de n = 5 a 10
animais por cada tempo de tratamento. (p < 0,05).
A fig. 2 mostra os efeitos observados após
administração do MMI, por via oral, em ratos, em relação
aos níveis séricos de T3 total. Pode-se verificar que o
MMI altera os níveis séricos de T3 total, após um
tratamento de 07 dias, efeito este que apresenta um
aumento significativo de 87 % quando comparado ao
controle.
1,4
1
1,2
1
0,8
0,8
0,6
0,6
0,4
0,4
0,2
0,2
0
T3 (ng/dl) (Camundongos)
T3 ( ng/dl) (Ratos)
1,2
(9). Podemos explicar que o MMI, uma tioamida, é usado
para inibir a organificação da iodotironina, inibindo a
atividade da peroxidase; Além desses efeitos, o MMI é
capaz de inibir a proliferação celular em células FRTL5
tireóide (10). Isto mostra que a ação do Metimazol quando
administrado por via oral em camundongos apresenta um
efeito mais relevante do que os efeitos observados em ratos.
Possivelmente o MMI não possui uma ação específica
sobre a iodotironina tipo 1 deiodinase no fígado e rins,
importantes locais de produção de T3 total (11).
0
2
4
7
14
1
2
7
14
Tempo (Dias)
Figura 2:
Determinação dos níveis séricos de T3 total em
ratos e camundongos após administração de Metimazol
(MMI) por via oral. Controle (s) e tratados (n). Os
valores representados são as médias de n = 8 a 15
animais por cada tempo de tratamento. (p < 0,05).
Entretanto, nos níveis séricos de T3 total, em
camundongos, após a administração oral do MMI,
apresentou em média diferença significativa em 01 e 02
dias de tratamento, observa-se uma diminuição de 54 % e
39 % em relação percentual controle (fig. 2). Enquanto
que, nos tratamentos de 07 e 14 dias não foram observados
nas médias uma diferença significativa a 5 %. Pode-se
observar que os níveis séricos de T3 total, em ratos, são
diferentes significativamente em relação ao controle no
tempo de 02 dias de tratamento quando comparados com
camundongos. Podemos verificar que no 7º dia de
tratamento, os níveis séricos de T3 total em ratos e em
camundongos não sofrem alterações significativas.
Verificamos que o tratamento com MMI, em tempo curto,
promove uma liberação considerável de T4 total e no 7º
dia de tratamento ocorre uma redução, considerando que
no 14º dia, os animais tratados com MMI apresentam os
mesmos níveis séricos de T4 total retornando aos valores
normais.
IV. DISCUSSÃO
O presente resultado tem demonstrado que a
administração do MMI por via oral em ratos e em
camundongos machos adultos, em diferentes tempos de
tratamento, leva a verificar uma redução basal dos níveis
séricos de T4 e T3 totais. Estudos comparativos foram
realizados para verificar o processo indutivo do MMI,
sobre os níveis séricos de T4 total, observando-se uma
redução significativa na resposta em função do tempo de
tratamento. Por outro lado, no 7º dia de tratamento com o
MMI verifica-se um aumento nos níveis séricos de T3
total em ratos. A ação do MMI nos camundongos reduz os
níveis séricos de T4 e T3 totais nos primeiros dias de
tratamento, demonstrando que o MMI promove um
hipotireoidismo em relação aos níveis séricos de T4 total
V. CONCLUSÃO
Os resultados obtidos neste trabalho permitem
concluir que a administração do Metimazol por via oral
reduz os níveis séricos de T4 total tanto em ratos como em
camundongos, e que os níveis séricos de T3 total aumenta
no 7º0 dia de tratamento em ratos de maneira mais
significativa que em camundongos. Ressalta-se ainda a
importância fisiológica da indução do hipotireoidismo com
o MMI, tanto em ratos como em camundongos com
mecanismo molecular diferenciado.
AGRADECIMENTOS
Os autores expressam seus agradecimentos ao
Magnífico Reitor da Universidade de Pernambuco
UPE/FESP, Dr. Júlio Fernando Pessoa Correia, pelo
incentivo financeiro para obtenção dos kits radioativos.
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ABSTRACT
The thyroid gland secretes the metabolic hormones
thyroxine (T4) and triiodothyronine (T3) which regulate
the oxygen consumption of the majority of cells in the
body. Their synthesis and release are controlled by the
anterior pituitary hormone and also for drugs that mediated
the serum concentration of T4 and T3 in the thyroid gland
or in the peripheral tissues. The present study evaluates the
sinergic effect on the basal secretion of the T4 and T3 after
administration of thyroidal and nonthyroidal drugs in rats
and mice. The study achievements with the oral
administration of Methymazole (MMI) in rats and mice
resulted in the reduction of the T4 and T3 serum levels,
obtained through kinetic treatment. There was a significant
reduction in T4 serum values among treated rats and mice
for up to 14 days of MMI. Moreover, increased T3 serum
concentration was found in rats treated with MMI, after 7
days of treatment, when compared to the serum level of
treated mice.