avaliação de protocolos de extração de dna em

AVALIAÇÃO DE PROTOCOLOS DE EXTRAÇÃO DE DNA EM PLANTAS DE
MURICI DO PARQUE NACIONAL DE SETE CIDADES-PI
GIOVANA SARAH SALES BATISTA, GISELE HOLANDA DE SÁ, DAVI ALVARENGA LIMA, JARBSON
HENRIQUE OLIVEIRA SILVA, SAMARA DE BRITO VIEIRA, MARILHA VIEIRA DE BRITO, MARIA
FERNANDA DA COSTA GOMES, JOSÉ VERLEANDSON DOS SANTOS GOMES, SÉRGIO EMÍLIO
DOS SANTOS VALENTE, PAULO SARMANHO DA COSTA LIMA
Introdução: Uma das espécies, de interesse econômico, que ocorre no Parque Nacional de Sete
Cidades (PNSC) é o murici (Byrsonima verbascifolia), que se destaca por ser uma espécie
frutífera conhecidas nos cerrados brasileiros. Apresenta grande importância socioeconômica,
servindo como fonte de energia na alimentação e uso medicinal, servindo como antitérmico e
também adstringente. Em virtude de tal importância, torna-se necessária sua caracterização
molecular, possibilitando estimar a diversidade genética existente no PNSC e auxiliar na
preservação dessa espécie. Com isto, o presente trabalho tem por objetivo analisar a diversidade
genética do gênero Byrsonima verbascifolia por meio de marcadores moleculares do tipo RAPD
("Random Amplified Polymorphic DNA?), técnica derivada da PCR ("Polymerase Chain
Reaction?). Materiais e Métodos: Foram coletadas amostras de 8 indivíduos de murici do PNSC.
Essas amostras foram conservadas em solução de CTAB e NaCl. Para a extração de DNA das
amostras utilizou-se três protocolos: Doyle & Doyle (1987), Romano e Brasileiro (1998) e Khanuja
et al. (1999). Após a extração, o DNA extraído foi quantificado com auxílio de um NanoDrop®
2000. Posteriormente realizou-se a eletroforese em gel de agarose, onde verificou-se a qualidade
do DNA extraído, selecionando-se as melhores amostras a serem utilizadas na PCR com a
utilização da técnica de RAPD. Foram utilizados 02 primers de RAPD, desenvolvidos pela Operon
Technologies (OPA-02 e OPE-14). Resultados e Discussão: Dentre os protocolos utilizados para
extração de DNA, o que apresentou maior eficiência na extração, por meio da quantificação em
Nanodrop foi o protocolo descrito por Romano & Brasileiro (1998). Para a realização da técnica
de PCR foram utilizadas três amostras que apresentavam os valores mais próximos do padrão de
pureza (razões A260/280 e A260/230). Com a amplificação por meio do primer OPE-14 foram
geradas bandas de boa resolução, indicando que a quantidade e aqualidade do DNA extraído
foram adequadas para amplificar o DNA por meio da PCR. No entanto, o primer OPA-02 não
possibilitou a amplificação do DNA, o que pode ser explicado por não possuir uma sequência de
DNA complementar às amostras de DNA utilizadas. Conclusão: Com os resultados obtidos, foi
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Revista Brasileira de Biodiversidade e Biotecnologia
GPI Cursos - Teresina-PI - CNPJ:14.378.615/0001-60
Registro: http://gpicursos.com/slab2015/Sistema/trabalho-pdf.php?id=533"
possível determinar o protocolo de extração de DNA genômico Romano & Brasileiro (1999) como
o mais eficiente para futuros estudos moleculares com plantas de murici.
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