Estudo da sensibilidade aos antibióticos Estudo da sensibilidade aos antibióticos Modo de acção dos antibióticos Actuam numa etapa essencial do metabolismo bacteriano - reacções de síntese proteica - do peptidoglicano - dos ácidos nucleicos - dos folatos Concentração Mínima Inibidora (CMI) a mais fraca concentração de antibiótico capaz de inibir completamente “in vitro” o crescimento visível de um microrganismo. Concentração Mínima Bactericida (CMB) a mais fraca concentração de antibiótico que, após 18 horas de contacto, elimina 99,9% de uma população bacteriana. Estirpe sensível quando a CMI é nitidamente inferior à concentração sanguínea obtida após administração de uma dose utilizada na terapêutica Estirpe resistente quando a CMI é superior às concentrações máximas que se possam obter “in vivo” sem utilizar doses tóxicas Estirpe intermédia quando a CMI se situa entre os dois extremos Aida Duarte FFUL 1 Estudo da sensibilidade aos antibióticos Métodos para avaliação da susceptibilidade aos antibióticos Determinação da CMI e da CMB de um antibiótico em meio liquido Determinação da CMI e de um antibiótico em meio liquido E-test Aida Duarte FFUL 2 Estudo da sensibilidade aos antibióticos Método de difusão - método dos discos ou antibiograma Este método baseia-se no princípio da existência de uma correlação entre os valores críticos da CMI e os diâmetros dos halos de inibição, obedecendo a uma técnica padronizada Meio de cultura Meio gelosado Mueller-Hinton - permite o desenvolvimento da maior parte das bactérias isoladas em clínica. - não é antagonista para os principais agentes antibacterianos - a espessura do meio tem de ser de 4 mm Inóculo bacteriano - estirpe pura - deve conter 2 a 3 x 105 bactérias por ml Sementeira - por inundação - estrias com zaragatoa Deposição dos discos - à superfície do meio de cultura distanciados entre si de 30 mm e do bordo da caixa petri 10 mm - prédifusão dos antibióticos 30 min. à temperatura ambiente Aida Duarte FFUL 3 Estudo da sensibilidade aos antibióticos Leitura dos resultados com ajuda de uma craveira ou régua mede-se o diâmetro do halo de inibição e faz-se corresponder na tabela fornecida pelo fabricante dos discos. Causas de erro Meio de cultura - espessura não homogénea ou insuficiente - dessecação excessiva durante a conservação Inóculo - demasiado fraco aumenta os halos de inibição - demasiado forte diminui os halos de inibição Deposição dos discos - a proximidade dos discos pode levar a uma sobreposição dos halos de inibição Leitura - halos de inibição não definidos podem exprimir um mecanismo de resistência - erros na medição dos halos de inibição Para as bactérias exigentes devem-se ajustar as condições necessárias ao seu desenvolvimento - adição de sangue de carneiro para as bactérias Neisseria e Streptococcus - adição de sangue cozido (gelose de chocolate) para Haemophilus Aida Duarte FFUL 4 Estudo da sensibilidade aos antibióticos As condições padronizadas são viáveis para a maior parte das bactérias aeróbias de crescimento rápido. Associação de antibióticos Uma associação de antibióticos é prescrita com o fim de alargar o espectro de acção do antibiótico Indicações para uma associação de antibióticos - infecções graves por bactérias virulentas e/ou multi-resistentes aos antibióticos - tratamento de uma infecção grave antes dos resultados dos exames bacteriológicos - infecções generalizadas em doentes imunologicamente deficientes - tratamento de uma infecção mista - impedir o aparecimento de estirpes mutantes resistentes Efeitos terapêuticos da associação de dois antibióticos Adição o efeito da associação é igual à soma dos efeitos de cada antibiótico isoladamente Indiferença a actividade de um dos antibióticos não é afectada pela presença do outro Sinergia o efeito é significamente superior à soma dos efeitos de cada antibiótico isoladamente Antagonismo a associação diminui a actividade de um dos antibióticos. A sua actividade é inferior à soma dos efeitos de cada antibiótico Aida Duarte FFUL 5