estudo dirigido 1

ESTUDO DIRIGIDO 1.
A water-soluble form of penicillin-binding protein 2 of Escherichia coli constructed by sitedirected mutagenesis.Adachi H, Ohta T, Matsuzawa H. FEBS Lett. 1987 Dec
21;226(1):150-154
1. Quais são as diferenças entre a estrutura da parede celular em bacterias gram + e
gram-?
2. As enzimas que ligam penicilina PBP são de alto peso molecular e são enzimas
bifuncionais: tem capacidade de peptidoglicano transglicosilases insensíveis a
penicilina e atividade de transpeptidases de peptidoglicanos. Explique cada uma destas
atividades.
3. No artigo de Adachi et al, 1987 os autores mostram os aminoácidos putativos que tem
papael na localização da proteína PBP2 na membrana citoplasmática.
a) como foram obtidas as diferentes frações celulares :citoplasma, membrana plasmática e
periplasma?
b) Por meio de mutagênese sítio dirigida constuiram a mutante de PBP2*. Qual é a natureza
dos aminoácidos 15-45 que foram deletados (eg. Hidrofílica, hidrofóbica, etc..)
c) Como foi detectada a presença da proteína PBP2?
3. A mutante PBP2* não foi encontrada na membrana plasmática mas sim no citoplasma.
Quais conclusões deste experimento?
5. Quais poderiam ser os mecanismos de resistênca a penicilina?