exemplo em anexo

Isolamento e caracterização de loci de microssatélites para o Bicudinho da Serra,
Macrocephalus elongatus (Aves, Passeriformes)
Silva, ARML1; Santos, NSPM2; Arruda, XKHL1
1Departamento de Genética e Evolução, Universidade Federal de São Carlos. 2Department of Evolution, Ecology and Organismal Biology, Ohio State University,
USA.
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Palavras-chave: Microssatélites, Aves, Macrocephalus elongatus
O conhecimento da estrutura genética das populações naturais é essencial para a
avaliação dos fatores que promovem a diversificação e a especiação, bem como para se
determinar escalas apropriadas para a conservação e manejo. As aves neotropicais que
habitam o sub-bosque de áreas florestais são consideradas altamente sedentárias e
filopátricas, o que resultaria numa maior estruturação genética entre as populações, se
comparadas com as espécies de ambientes temperados. No entanto, estudos sobre a
estrutura genética de populações de Passeriformes neotropicais são limitados, e pouco
se sabe sobre o quanto desta diversidade pode estar sendo perdida com o processo de
devastação dos habitats. A ausência de marcadores genéticos espécie-específicos
descritos para estas aves, como microssatélites, é um dos fatores que tem impedido o
desenvolvimento de tais estudos. Diante disso, os objetivos deste trabalho foram isolar e
caracterizar loci de microssatélites para o Bicudinho da Serra, Macrocephalus elongatus
(Aves, Passeriformes), uma espécie amplamente distribuída num dos ecossistemas mais
ameaçados do planeta, a mata Atlântica. Os loci foram obtidos através de uma
biblioteca genômica parcial contendo insertos enriquecidos com um conjunto de oito
sondas para microssatélites tetranucleotídicos. O enriquecimento foi realizado
hibridizando-se os fragmentos de DNA, previamente clivados com as enzimas Rsa I e
BstU I, às sondas biotiniladas, as quais por sua vez, foram hibridizadas a beads
magnéticos marcados com streptavidina. Os beads foram precipitados em colunas
magnéticas, retendo os fragmentos de DNA que continham os potenciais loci, de
maneira que os demais fragmentos puderam ser eliminados através de sucessivas
lavagens. De um total de 106 clones analisados, foram obtidos 23 loci (22%) compostos
de pelo menos cinco repetições sem interrupção. Destes, 11 (48%) foram polimórficos.
Baseando-se nos genótipos de 24 indivíduos de uma única população, analisados em gel
de poliacrilamida 7,5%, foram encontrados entre 4 e 22 alelos por locus, e as
heterozigoses esperadas variaram de 0,54 a 0,92. Um déficit significativo de
heterozigotos foi encontrado para os loci BLA2-9 e BLA4-34, indicando uma possível
presença de alelos nulos. No entanto, nenhuma evidência de desequilíbrio entre os pares
de loci foi encontrada (P>0,05). A disponibilidade destes loci tornará possível a
realização de estudos sobre o fluxo gênico de populações de aves entre as áreas
remanescentes da mata Atlântica, utilizando-se M. elongatus como modelo, podendo
fornecer informações que contribuam com a elaboração de planos práticos de
conservação.
Apoio financeiro: CAPES, FAPESP, CNPq, Ohio State University e Idea Wild