Diagnóstico, amostra e transporte

Laboratório
Diagnóstico, amostra e
transporte
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EVD PREPAREDNESS AND RESPONSE TRAINING PACKAGE
Laboratory
FIG: Representação de uma imagem microscópica
do vírus do Ébola
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Laboratory
Objectivos e Resultados da
Sessão
Objectivos
– Compreender os princípios básicos do
diagnóstico de laboratório
– Assegurar uma recolha segura de
amostras do caso suspeito de Ébola
– Assegurar um transporte seguro e
apropriado da(s) amostra(s) para o
Laboratório de Referência
Resultados Esperados
– Conhecer todos os principais
abastecimentos
– Identificar todos os passos para a recolha
e transporte das amostras
– Compreender
todas as principais
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medidas
para a prevenção de infecções
Laboratory
Diagnóstico
● Doenças que devem ser excluídas incluem: paludismo,
febre tifóide, shigelose, cólera, leptospirose, peste,
riquetsiose, febre recorrente, meningite, hepatite e
outras febres hemorrágicas virais
● Papel essencial do histórico do doente; exposição à
área/aldeia com um surto em curso e/ou contacto com
casos confirmados
● Testes de diagnóstico:
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● Ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA)
● Testes de detecção de antígenos
● Ensaio de reacção em cadeia de polimerase via transcriptase
reversa (RT-PCR)
● Microscopia electrónica
● Isolamento do vírus através da cultura de células
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Viremia de Curta Duração
Febre
Vírus / Antigénio
Anticorpos
neutralizantes IgG ELISA
Anticorpos IgM
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3-7 dias
3-15 dias
Incubação
Doença
Tempo
(Figura adaptada de T Ksiazek CDC/Atlanta)
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Rede Laboratorial de Agentes
Patogénicos Emergentes e Perigosos
(EDPLN)
●
Uma rede de laboratórios de diagnóstico de alta
segurança

●
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Laboratórios Humanos e Animais de Alta Segurança BSL-4
e alguns BSL-3
Apoia a resposta rápida para detectar,
diagnosticar e controlar novas ameaças de
doenças

Resposta laboratorial

Desenvolvimento de análises e reagentes

Transferência e formação de tecnologias

Investigação aplicada
EVD PREPAREDNESS
Coordenação
mundial e troca de informações
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EDPLN - 23 membros a nível
mundial
Regiões da OMS
Região Africana
Região das Américas
Região do Sudeste Asiático
Membro da EDPLN (6 membros)
Região Europeia
Membro da EDPLN e CC da OMS (15 membros)
Região do Mediterrâneo Oriental
Membro da EDPLN e laboratório veterinário (2 membros)
Região do Pacífico Ocidental
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Recolha e Transporte de Amostras:
resumo
• Antes da recolha das amostras
• Durante a recolha das amostras
• Após a recolha das amostras
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Antes da recolha das
amostras
• Antes de entrar no quarto do doente
1. Reunir todos os materiais
2. Preencher a documentação do
doente
3. Realizar a higiene das mãos
4. Colocar todo o equipamento de
protecção pessoal
5. Levar todos os principais materiais
para a recolha das amostras
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Reunir todos os materiais
Equipamento para recolher uma
amostra de sangue: 2-5 ml de tubo
com EDTA, tubo de separação de soro (SST)
Equipamento para
prevenir infecções
OU
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+
Preencher a documentação
do doente
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Realizar a higiene das mãos
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Laboratory
Colocar todo o equipamento de protecção
pessoal
Levar todos os principais materiais para a
recolha das amostras
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Recolha da amostra de sangue de
EVD
•
Apenas devem ser obtidas amostras essenciais para o diagnóstico ou
monitorização (2 a 5 ml)
•
Amostras a serem recolhidas: 2 a 5 ml de sangue para PCR e cultura de
vírus num tubo com EDTA; para a serologia (se necessário) num tubo de
separação de soro (SST)
•
As amostras devem ser obtidas por pessoal experiente nas técnicas
necessárias
•
É necessária uma boa coordenação com as outras equipas
(epidemiológica, colegas da prevenção e controlo de infecções, médicos,
etc.)
•
As roupas protectoras incluem: dois pares de luvas, que facilita a
descontaminação do exterior do recipiente de amostras; bata resistente a
fluídos e de mangas compridas com punhos; protecção facial completa;
EVD PREPAREDNESS
ANDde
RESPONSE
TRAINING PACKAGE
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cirúrgica ou
procedimento
14máscara
Laboratory
Recolha da amostra de sangue de EVD
• A necessidade de equipamento de protecção pessoal
(EPP) adicional, como coberturas para os pés/pernas,
touca, a utilização de uma máscara ajustada N95 ou
semelhante ou fatos biológicos específicos depende do
potencial de contacto com fluídos ou de aerossolização,
dependendo do procedimento a ser feito e da presença
de sintomas clínicos que aumentem a probabilidade de
contacto com fluídos corporais
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Durante a recolha das amostras
• Recolha de uma amostra de sangue de um doente
1. Preparar o quarto
2. Identificar e preparar o doente
3. Recolher a amostra de sangue
4. Tirar o tubo de recolha de sangue do suporte e
colocá-lo no tabuleiro
5. Colocar a agulha, outros artigos que pingam
sangue ou possuem fluídos corporais dentro do
saco de resíduos infecciosos para serem
destruídos
• Preparar a amostra de sangue para transporte
• Remover o EPP
• Realizar
a higiene
dasTRAINING
mãosPACKAGE
EVD PREPAREDNESS
AND RESPONSE
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Laboratory
Recolha de amostras de sangue (1ª
parte)
Preparar o quarto
Colocar um
torniquete
Identificar e preparar
o doente
Pedir ao doente que
faça um punho, para
que as veias fiquem
mais destacáveis
Ancorar a veia
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Escolher o sítio
Desinfectar a área onde
irá colocar a agulha
Retirar o sangue
Recolha de amostras de sangue (2ª
parte)
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Preparar a amostra de sangue para o
transporte
A amostra está agora pronta para ser
enviada para o Laboratório Nacional
Central. Siga os requisitos de
empacotamento do Envio de
Amostras para as substâncias
infecciosas.
< 1 semana: Armazenar amostras à
temperatura ambiente até 24 horas.
> 1 semana antes do envio:
armazenar entre 0-5° Celsius.
> uma semana antes do envio,
armazenar a -20° Celsius (ou melhor
ainda, a -70° Celsius se disponível).
Evitar ciclos de congelamentodescongelamento.
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Laboratory
Remover o EPP e realizar a higiene das
mãos
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Laboratory
Após a recolha das amostras
1. Preparar todos os materiais de envio antes de
entregar a(s) amostra(s)
2. Preparar a amostra
3. Empacotar a amostra
4. Marcar e rotular a caixa
5. Finalizar o envio
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Envio de Amostras
● O envio de amostras deve seguir os padrões
internacionais de envio para o “transporte
de substâncias infecciosas de categoria A”
(sistema de empacotamento triplo)
● A logística de envio deve ser coordenada
através da rede EDPLN
● Categoria A para os vírus vivos
● Categoria B para amostras inactivas
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Preparar todos os materiais de envio
antes de entregar a(s) amostra(s)
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Laboratory
Envio de uma amostra de sangue de EVD
• Armazenar as amostras num frigorífico ou num congelador (se
demorar mais de 24 horas) até que sejam enviadas para serem
testadas.
• As amostras refrigeradas devem ser enviadas com embalagens
de gelo e as amostras congeladas devem ser enviadas com gelo
seco.
• Enviar as amostras em sacos de resíduos infecciosos
estanques separados e seláveis, colocados num recipiente de
envio aprovado pelo TDGR.
•
O empacotamento, envio e transporte de todas as amostras
relacionadas com um caso suspeito de EVD devem obedecer aos
requisitos do Transporte de Materiais Perigosos (TDGR) e devem ser
realizados por um indivíduo certificado pelo TDG. Estes regulamentos
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que o manuseamento e o envio das amostras do doente
24 | requerem
Laboratory
estejam de acordo com os procedimentos internacionais para o
Preparar a amostra
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Laboratory
Empacotar a amostra
Se for necessária refrigeração
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Marcar e rotular a
caixa
Finalizar o
envio
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Questões
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