Clonagem

CLONE
População de células geneticamente idências
Clone de um organismo: organismo geneticamente igual a
outro organismo
Mas pode falar-se de
Clonagem de um gene: produção de múltiplas cópias de um gene
Clone de um gene: células contendo moléculas idênticas de
DNA recombinante, contendo o gene de interesse
CLONAGEM DE UM GENE – OBJECTIVOS?
•Sequência de DNA que codifica a proteína
•Produção de proteína recombinante
•Inserção do DNA clonado noutro organismo
Sequência de DNA que codifica a proteína – utilidade?
•Dedução da sequência de aminoácidos da proteína
•Comparação com a sequência de aminoácidos de outras
proteínas
•Reconhecimento de domínios funcionais
•Previsão da função
•Previsão da estrutura
•Mutagénese
•Produção de anticorpos
Produção de proteína recombinante – utilidade?
•Aplicações na medicina e na biotecnologia
•Caracterização da proteína
•Produção de anticorpos
•Actividade da proteína
•Estrutura da proteína
•Interacções da proteína com outras macromoléculas
Clonagem de um gene: produção de múltiplas cópias de um gene
VECTOR DE CLONAGEM
Características de um plasmídeo para que possa ser
usado como vector de clonagem:
•Origem de replicação, que permite replicação eficiente do
plasmídeo, para dezenas ou centenas de cópia por célula
•Gene que confere resistência a um antibiótico, que
permite selecção das células contendo o plasmídeo
•Local de clonagem, com locais susceptíveis de clivagem
por enzimas de restrição, para permitir inserção de
fragmentos de DNA
Enzimas de restrição
Protein X
Protein X
Protein X