ambiente e fluidos orais

UPCII M Microbiologia
Teórica 15 e 16
2º Ano
2015/2016
Sumário
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D. O Ecossistema Oral
Porquê Microbiologia Oral?
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Capítulo XV. A Cavidade oral como habitat
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2
Características do ambiente oral
Parâmetros fisico químicos que afectam a colonização
microbiana da cavidade oral
T15/16 MJC
11-18-2015
Porquê Microbiologia Oral?
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T15/16 MJC
11-18-2015
Microbiologia Oral
Foi a “primeira” Microbiologia. 1676
Mas só em 1840 foi ligada à cárie.
No fim do século XIX surgem postulados de Koch:
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


Microrganismo tem de ser:





4
Presente em todos os casos de patologia
Isolado desses casos e caracterizado em cultura
Ser inoculado em modelos animais e produzir os mesmos sintomas
Ser re-isolado dos animais modelo e caracterizado
Ter características idênticas ao microrganismo original
T15/16 MJC
11-18-2015
Teoria “QuimioParasítica”
Proposta por Miller para explicar a relação entre
Microrganismos e cárie.
Junta:
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


Koch (isolamento)
Pasteur (fermentação de açucares)
Magitot (dissolução de dentes por fermentação de açucares)
Conclui que as cáries são provocadas pela destruição
ácida dos dentes resultante da ação do ácido produzido
pelos microrganismos quando fermentam açucares.
Microbiologia Oral como disciplina só evoluiu a partir do
meio do século passado nalguns países.
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
5
T15/16 MJC
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Principais infecções da cavidade oral
6
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Patologias Orais
Normalmente policrobianas
Associadas a imuno comprometimento
Infeções virais (HPV, EBV e HSV) comuns e muitas vezes
assintomáticas
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

7
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Habitats da Cavidade Oral
Dentes
Tecidos moles:
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



Mucosas
Dorso da língua
Epitélio Crevicular
Próteses

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T15/16 MJC
11-18-2015
Dentes
9
T15/16 MJC
11-18-2015
Mucosa Oral
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11-18-2015
Epitélio crevicular
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Aplicações ortodônticas
12
T15/16 MJC
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Aplicações prostodônticas
13
T15/16 MJC
11-18-2015
Aplicações prostodônticas
14
T15/16 MJC
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Cavidade Oral
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11-18-2015
Cavidade Oral
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T15/16 MJC
11-18-2015
Factores FQ
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Resultam de quê?
Quais são os que normalmente afectam microrganismos?
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Temperatura
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pH
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6.7
19
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Potencial redox (Eh)
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Aerobiose  Ambiente oxidante  Eh>0
Anaerobiose  Ambiente redutor  Eh<0
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+158 a 542 mV saliva
-300 mV bolsas periodontais
+294 mV superficie dentária limpa
vs.

20
–141mV placa de 7 dias
T15/16 MJC
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Forças Mecânicas Abrasivas
Fluxo salivar
Idade do Hospedeiro
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Bibliografia
Capítulo 1, 2 e 8
Capítulo 31-Secção de Oral Ecossystem
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T15/16 MJC
11-18-2015
Sumário
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D. O Ecossistema Oral
Capítulo XVII. Fluidos orais
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Saliva
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Propriedades gerais
Mucinas e aglutininas
Propriedades antimicrobianas da saliva
Fluido Crevicular
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Saliva é produzida por
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


Parótidas
Submaxilares
Sublinguais
Glandulas menores da mucosa oral

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

24
Labiais
Bucais
Glossopalatinas
Palatinas
Linguais
Saliva serosa
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


Saliva mucosa

T15/16 MJC
Enzimas
Aglutininas
PRPs
Iões
Células
plasmáticas
mucinas
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Funções da saliva





Inibição da precipitação
do Ca2+
Efeito de tampão
Digestão dos alimentos
Lubrificação dos
tecidos
Atividade
antimicrobiana (vírus,
bactérias e fungos)



Física
Química
Sabor
25
T15/16 MJC
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Funções das moléculas salivares
Molécula
Aglutinação
Adesão (+/-)
Amicrobiana
Nutrição
Amilase
-
+
-
+
BetaMicroglobulina
+
?
?
Fibronectina
-
+
-
?
Lisozima
+
+
+
?
Mucina
+
+
+
+
Aglutinina da
parótida
+
+
-
?
PRPs
-
+
-
?
S-IGA
+
+
+
?
Staterina
-
+
-
?
26
?
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Função das moléculas depende da conformação

Amilase (tem origem no hospedeiro)



Actividade catalítica
Interação com streptococci orais (ABPs)
Ligação à hidroxiapatite
Estas funções desaparecem se forem cortadas
as pontes de dissulfito

27
T15/16 MJC
11-18-2015
Maioria das moléculas são “multifuncionais”

Estaterinas e PRPs



Inibem a formação de fosfato de cálcio
Adsorvidas à superfície promovem a colonização bacteriana
As moléculas da saliva “agem” em conjunto

Homocomplexos


Heterocomplexos

28
Oligomeros de mucinas por via de pontes bissulfito  viscosidade e
elasticidade
De mucinas com IgA, lisosimas, cistatinas  concentram as moléculas
antimicrobianas à superfície da saliva
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11-18-2015
Interacção de moléculas salivares e bactérias

Agregação e aglutinação das bactérias


Adesão das bactérias à superfície


Quais?
Morte ou inibição do crescimento das bactérias


Quais?
Quais?
Nutrição dos MO

29
Quais?
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11-18-2015
Aglutinação das bactérias

Ligação das bactérias a estas moléculas impede ligação ao
esmalte, mucosa e biofilme.


S-IgA, aglutinina da parótida, lisosimas, beta-microglobulina e
iões de Ca2+
Mucinas





30
30-80% hidratos de carbono
Não exclusiva da saliva
MG1=MUC5B
Formadora de gel
MG2=MUC7
MUC1
Associadas à membrana das células mucosas que as
MUC4
segregam
T15/16 MJC
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Mucinas Orais
31
T15/16 MJC
11-18-2015
Mucinas e consistência da saliva


Gel hidratado
Proteínas + açúcares:







32
Ácido siálico
Glicose
Galactose
Fucose
GlcNAc
GalNAc
Man
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11-18-2015
Mucinas e batérias



Ácido siálico à superfície.
Tem carga negativa.
Serve de sinalizador para
alguns Streptococci que têm
lectinas  Efeito
aglutinador pois adere às
lectinas.
Comprovação
experimental que <
[mucinas]  >[Strep.
mutans] (MG2)
33
T15/16 MJC
11-18-2015
Aglutinina da parotida



Glicoproteína gp340 ou DMBT1
Tem ac. siálico que se liga a uma lectina dos streptococci
Esta lectina tem alta afinidade para o cálcio
34
T15/16 MJC
11-18-2015
sIgA
35
T15/16 MJC
11-18-2015
Produção de sIgA
36
T15/16 MJC
11-18-2015
sIgA

Anticorpo segregado por clones de células-B



Mistura com especificidades diferentes (IgA1- antigénios e IgA2
– LPS, LTA, polissacarideos)
Liga-se aos antigénios bacterianos impedindo fixação ao
substrato
Microrganismos orais têm proteases específicas para
sIgA1




37
Porphyromonas gingivalis
Strep pneumoniae
Neisseiria meningitidis
Haemophilus influenzae
T15/16 MJC
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Saliva protege de Microrganismos por:
1. Aglutinação e eliminação por arrastamento:




38
Mucinas
sIgA
Gp 340
Collectinas
T15/16 MJC
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Saliva protege de Microrganismos por:
2. Componentes antimicrobianos da saliva:
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






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Lisozymas
Peroxidases
Lactoferrina
Histatinas
Cistatinas
Cromogranina A
Fatores antivirais
Defensinas
T15/16 MJC
11-18-2015
Componentes antimicrobianos da saliva

Lisozimas




40
Hidrolisa ligações glicosídeas da parede
Ativa enzimas endógenas (autolisinas)
Aglutina
Outras propriedades ligadas a zonas anfipáticas do terminal C
T15/16 MJC
11-18-2015
Componentes antimicrobianos da saliva

Peroxidase, tiocianato




41
peróxido de hidrogénio
Derivados do ião tiocinato inibem o crescimento bacteriano
e impedem o desenvolvimento de Strep
 inibem desidrogenases membranares
Inibem adesão aos dentes
T15/16 MJC
11-18-2015
Componentes antimicrobianos da saliva

Lactoferrina



42
Complexa iões de ferro essenciais para crescimento
bacteriano
Complexa hemina
Impede adesão à HA
T15/16 MJC
11-18-2015
Componentes antimicrobianos da saliva

Histatinas (HRPs)

Catiónicas
Cerca de 12
Diferem no comprimento, sequência e fosforilação
Libertam histaminas das MAST
Promovem o crescimento dos cristais de HA
Inibem as proteases de cysteína bacterianad
Ligam taninos
Propriedades antifungicas e antibacterianas
Impedem a coagreagação bateriana
43
T15/16 MJC








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Componentes antimicrobianos da saliva

Cistatinas


44
Péptidos ricos em cisteína que inibem proteases de cisteína
baterianas.
Também são reguladores de inflamação pois inibem proteases
do hospedeiro e estimulam a produção de citocinas.
T15/16 MJC
11-18-2015
Componentes antimicrobianos da saliva

Cromogranina A


45
O seu processamento liberta um pétido com n-terminal
(vasostatina-1).
Propriedades antifungicas e antivirais
T15/16 MJC
11-18-2015
Componentes antimicrobianos da saliva

AMPs







46
Defensinas
Pequenos péptidos
(20-40 aa)
São amfipáticos
Os humanos são mais
pequenos (15-20 aa)
As alfa defensinas são
produzidas por
leucócitos.pele e
epitélio respiratório
As beta defensinas
são produzidas pelos
leucócitos e por e
células epiteliais.
Interagem e ativam
sistema imunitário.
T15/16 MJC
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Propriedades antivirais da saliva

A saliva parece também inibir a divisão de vírus como o
HIV




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SLPI (secretory leukocyte protease inhibitor) protease serínica
TSP1 GP que se liga à gp120 do HIV inibindo a ligação ao CD4
Gp 340
PRPs ligam-se ao gp120 de HIV
T15/16 MJC
11-18-2015
Defesas da cavidade oral presentes na saliva
48
T15/16 MJC
11-18-2015
Nutrição bacteriana



Baseada nas proteínas
E Glicoproteínas
Conseguida por várias enzimas:


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Glicosidades, peptidades, neuraminidases, esterases
Utilização da Amilase do hospedeiro
T15/16 MJC
11-18-2015
Fluido Crevicular







Albumina
Produtos inflamatórios (prostaglandinas, elastase, MMPs)
Produtos de células fagocitárias
Fibrina
Fibronectina
Hormonas
Importância destas moléculas no diagnóstico
(Periodontite)
50
T15/16 MJC
11-18-2015
Bibliografia
Capítulo 4,5,6,7 e 8
Capítulo 31-Secção Oral Ecossystem
51
T15/16 MJC
11-18-2015