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UPCII M Microbiologia
Teórica 15
2º Ano
2010/2011
Sumário
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Capítulo XIV. Diagnóstico Microbiológico
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Produtos biológicos para análise

Colheita e transporte de amostras
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Identificação do agente infeccioso:
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2
Diagnóstico Directo
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Cultura e isolamento

Caracterização do microrganismo

Antibiograma
Detecção da resposta imune
T15 MJC
8-11-2011
Diagnóstico Microbiológico
Paciente
Pedido de Exame
Diagnóstico e Terapia
Colheita
Interpretação
Transporte
Resultado
Laboratório
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T15 MJC
8-11-2011
Sensibilidade e Especificidade
Presença do
Microrganismo
Ausência do
Microrganismo
8-11-2011
+
-
Verdadeiro
(V+)
Falso
(F-)
Verdadeiro
(V-)
Falso
(F+)
T15 MJC
Colheitas a partir de:
Excreções
Secreções
Tecidos
Órgãos
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
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T15 MJC
8-11-2011
Colheita e Transporte das amostras
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


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Anaeróbios / Fastidiosos / Vírus
Psicrófilos / Mesófilos
Colheitas de locais com MI
Contaminação do ambiente (Espectoração e saliva)
Meio de recolha  Eficácia
Meio de transporte
Antibioterapia precedente
Tempo da colheita /Rota de infecção e ciclo de infecção
Tempo de espera para processamento
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T15 MJC
Análise laboratorial
Directamente (1)



Presença de antigénios (A)
Presença de sequências genómicas (B)
Após cultura (2)



Presença de antigénios (A)
Presença de sequências genómicas (B)
Pesquisa e identificação da toxina

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T15 MJC
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1 – Observação directa
Ovos de helmintas
Espiroquetas
Cryptococcus neoformans
Preparação Tzanck (infecção por vírus
herpes simplex ou varicella-zoster)
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T15 MJC
1 - Observação directa - Colorações
A= Não acid fast
Fluido CerebroEspinal
Bacillus antracis
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B=Acid Fast
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8-11-2011
1 - Observação directa – Microscopia electrónica
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1 - Observação directa – Imunocitoquímica
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1 - Observação directa – Sondas moleculares
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2 - Cultura
Meios de Cultura: Função?
Meios de transporte: Função?
Incubação: (Temperatura e oxigénio)
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2 - Cultura
Reacções com o meio de cultura
Streptococcus beta hemolítico
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2 - Cultura
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Após cultura segue-se identificação:
Serotipagem
Biotipagem
Tipagem de fagos
Tipagem de bacteriocinas
Multiloccus enzyme
electrophoresis (MLEE)
Pulse Field Gel Electrophoresis
(PFGE)
Restriction Fragment Lenght
Polymorphism (RFLP)
Ribotyping
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2 – Cultura – Permite antibiograma
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8-11-2011
A – Detecção de antigénios
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T15 MJC
A – Detecção de antigénios
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Detecção de Proteínas
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T15 MJC
B- Detecção de sequências genómicas
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Detecção de ácidos nucleicos

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PCR
T15 MJC
8-11-2011
B- Detecção de sequências genómicas

20
PCR
T15 MJC
8-11-2011
B- Detecção de sequências genómicas

PCR
Visualização
Utilização noutras técnicas
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8-11-2011
B- Detecção de sequências genómicas
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Detecção de ácidos nucleicos
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RT-PCR (Real Time)
RT-PCR (Reverse Transcription)
Multiplex PCR
Nested PCR
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B- Detecção de sequências genómicas
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Detecção de ácidos nucleicos
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Sondas moleculares
FISH
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3 – Resposta imunitária
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Tradicionais
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Medem a resposta humoral pela actividade dos anticorpos
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Aglutinação
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3 – Resposta imunitária
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Tradicionais – Reacção de
aglutinação
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3 – Resposta imunitária
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Activação do complemento
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T15 MJC
3 – Resposta imunitária
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Mais Recentes – Imunoensaios enzimáticos
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Medem a resposta humoral pela presença dos anticorpos
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T15 MJC
3 – Resposta imunitária
8-11-2011
T15 MJC
3 – Resposta imunitária
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Bibliografia
Capítulo 6
Capítulo 17
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