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MICROPROPAGAÇÃO DA CAMOMILA (Anthemis nobilis L):
PROTOCOLOS
INICIAIS PARA A CULTURA IN VITRO.
Maycon Cardoso de Souza,Gilmar Pezzopane Plá e Eulinor Pereira da Silva
( PUIC Individual). Curso de Agronomia – Campus Tubarão.
Introdução
Resultados
A camomila, representante da família Asteraceae, é uma planta originária da flora
européia e do ocidente asiático, sendo muito cultivada na Europa Oriental e Egito
(SOUZA, 2004) foi introduzida pelos imigrantes europeus há mais de 100 anos.
Atualmente, é a planta medicinal com a maior área de cultivo e com o maior
envolvimento de pequenos produtores rurais. Apesar disso, é considerada cultura
secundária, na qual se utilizam técnicas inadequadas de produção e de
beneficiamento, que resultam em produtos de baixa qualidade. A camomila pertence à
família Asteraceae. Em cosmética é utilizada em xampus clareadores e possui
propriedades medicinais sendo utilizada como antiespasmódico, carminativo,
antiinflamatório e sedativo. A regeneração de plântulas in vitro é uma técnica
especialmente vantajosa para a obtenção de genótipos produtores de compostos
medicinais. A aplicação da micropropagação destaca-se na recuperação de
substâncias farmacêuticas, na multiplicação segura de cultivares desejáveis, na
propagação rápida com alto coeficiente de multiplicação, e como auxiliar na
salvaguarda do patrimônio genético de plantas ameaçadas pela exploração humana
(SIMÕES, 1988). Este método vem sendo amplamente aplicado na recuperação de
plantas livres de vírus e de outros causadores de doenças, na conservação e no
intercâmbio de germoplasma in vitro, micropropagação rápida de genótipos de elite,
produção de haplóides, transformação genética de plantas e propagação comercial de
plantas com potencial econômico. Atualmente e sob expectativas futuras, a
micropropagação é direcionada a atividades comerciais, objetivando a limpeza clonal e
multiplicação de espécies ornamentais, florestais, agronômicas e medicinais. A
micropropagação de espécies medicinais justifica-se pela crescente demanda da
indústria farmacêutica por plantas indexadas, livres de vírus, com alta qualidade
fitossanitária e fisiológica e com a capacidade de síntese de metabólicos secundários
potencializada, através do melhoramento genético (TORRES, et al 2001).
Os resultados mostraram que a concentração de BAP a qual melhor respondeu em
relação a formação da parte aérea das de camomila cultivadas in vitro foi a de 0,5
mg/l. Já em relação ao enraizamento os melhores resultados apareceram na
concentração de 0,5 mg/l de AIA. Nas concentrações de 1,0 e 1,5 mg/l de BAP,
observou-se uma grande contaminação nos meios de cultura. Testou-se também o
desenvolvimento destas plantas com giberelinas e a concentração de 0,5 mg/l foi a
que melhor resultado apresentou, no que diz respeito a formação de brotos no meio
de cultura.
A
B
A
Objetivo
C
Desenvolver protocolos iniciais para obtenção de plantas monoclonais de Anthemis
nobilis através da cultura in vitro de sementes e segmentos nodais.
Metodologia
Desinfecção
Foram utilizadas gemas axilares e sementes de origem comercial de camomila,
submetidas à limpeza prévia com detergente neutro. Água corrente e álcool 70°GL, e
posteriormente desinfecção em câmara de fluxo utilizando hipoclorito de sódio a 2,5%
de cloro ativo durante 20 minutos. Para concluir a fase de desinfecção o material foi
lavado com água destilada, fazendo sucessivos enxágües.
Isolamento
Após a desinfecção, as gemas e sementes foram inoculadas individualmente em
tubos de ensaio (20 x 150mm), contendo meio basal de Murashige & Skoog (1962)
(MS), acrescido de 3% de sacarose e solidificado com 0,2 % de àgar. Todos os meios
de cultura tiveram seu pH ajustado para 5,8 e foram auto-clavados por 30 minutos a
1,1kgf/cm2 e temperatura de 25°C. Cada tratamento teve 30 repetições.
Ambiente de cultivo
As culturas foram mantidas em sala de crescimento apropriada, à temperatura de
25°C+/- 2°C, sob fotoperíodo de 16 horas, providos por lâmpadas fluorescentes
Phillips TDL com intensidade luminosa de 23µmol.m-1.s-1, e umidade relativa em torno
de 70%.
Multiplicação in vitro
Segmentos nodais isolados das plântulas foram subculturados no meio de cultura
descrito anteriormente, acrescido de diferentes quantidades de BAP (6-Benzil Amino
Purina) e AIA (Ácido Indol Acético) variando as concentrações de 0.0 mg/L-1 a 1.5
mg/L-1.
D
A) Plantas de camomila cultivadas in vitro com 0,5 mg/l de BAP B) Plantas de
camomila cultivadas in vitro com 0,5 mg/l de AIA C) Raízes de camomila cultivadas in vitro
com 0,5 mg/l de AIA D) Plantas de camomila cultivadas in vitro com 0,5 mg/l de
Ácido giberélico
Conclusões
Em função dos resultados é possível observar que altas concentrações de BAP em
meio de cultura não estimulam o desenvolvimento de plantas de melissa, sendo que
isto pode estar associada a uma ação tóxica deste regulador de crescimento. Assim,
mais estudos precisam ser desenvolvidos, principalmente, em relação as
concentrações de BAP em intervalos entre 0,2 e 0,7 mg/l, no sentido de encontrar
com mais exatidão qual a concentração que realmente provoca o melhor
desenvolvimento das plantas de camomila in vitro.
Bibliografia
SOUZA, J.A. Cultivo in vitro e caracterização isoenzimática de espécies de
camomila. Pelotas. 48f. Dissertação de Mestrado (Fisiologia Vegetal), IB,UFPel,
2004.
SIMÕES, M.O.M. Ontogênese de gemas e raízes adventícias de Citrus sinensis
(Linn.) Osbeck cv Pêra cultivadas in vitro. Viçosa: UFV, 1988. 56p. (DissertaçãoMestrado em Fisiologia Vegetal).
TORRES, A.C.; et al. Meios e condições de incubação para a cultura de tecidos de
plantas: Formulações de meios para a cultura de tecidos de plantas. Circular
Técnica, Embrapa, Brasília, 2001. n.24, p.1-20.
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