autofagia e sua relação com carcinoma de células

Revisões de Literatura / Bibliography Review
Autofagia e sua relação com carcinoma
de células escamosas oral
Autophagy and its relationship with
oral squamous cell carcinoma
Marayza Alves Clementino
Doutoranda – Programa de Pós-Graduação em Odontologia – Universidade
Estadual da Paraíba – UEPB – Campina Grande – PB
Hellen Bandeira de Pontes Santos
Mestranda – Programa de Pós-Graduação em Odontologia – Universidade
Estadual da Paraíba – UEPB – Campina Grande – PB- Brasil
Simone Alves de Sousa
Professora Doutora - Departamento de Clínica e Odontologia Social Universidade Federal da Paraíba - UFPB - João Pessoa – PB- Brasil
Pollianna Muniz Alves
Gustavo Pina Godoy
Cassiano Francisco Weege Nonaka
Professores Doutores – Programa de Pós-Graduação em Odontologia –
Universidade Estadual da Paraíba – UEPB – Campina Grande – PB – Brasil
RESUMO
Introdução: Estudos apontam para a importância da autofagia na regulação do desenvolvimento e
progressão de diversas neoplasias malignas, incluindo o carcinoma de células escamosas oral (CCEO),
e na determinação da resposta à terapia anticâncer. Objetivo: Realizar uma revisão de literatura sobre o
processo de autofagia e sua relação com CCEO. Métodos: Foi realizada a busca eletrônica de publicações
nas bases de dados Web of Science, PubMed e Scopus, utilizando as seguintes palavras-chave, obtidas de
acordo com o Medical Subject Headings (MeSH): câncer, câncer bucal, autofagia, proteínas relacionadas à
autofagia e carcinoma de células escamosas oral. Os estudos foram divulgados no período de janeiro de 2001
a fevereiro de 2015. Conclusão: A autofagia é um processo que pode estar envolvido no desenvolvimento e
progressão do CCEO. Os resultados apresentados pelos trabalhos existentes na literatura sobre o assunto
são divergentes, ora sugerindo uma função pró-tumoral ora uma atividade antitumoral para a autofagia nos
CCEOs.
Palavras-chave: autofagia; carcinoma de células escamosas; neoplasias bucais.
ABSTRACT
Introduction: Studies highlight the importance of autophagy in the regulation of the development and
progression of several malignancies, including the oral squamous cell carcinoma (OSCC), and in the
determination of the response to the anticancer therapy. Objective: to perform a literature review on the
process of autophagy and its relationship with OSCC. Methods: An electronic search of publications was
performed in Web of Science, PubMed, and Scopus databases using the following keywords, obtained
according to the Medical Subject Headings (MeSH): cancer, oral cancer, autophagy, autophagy-related
proteins, and oral squamous cell carcinoma. The studies were published between January 2001 and February
2015. Conclusion: Autophagy is a process that may be involved in the development and progression of
OSCC. The results of the studies in the literature on the subject are divergent: some of them suggest a protumor function, others suggest an anti-tumor activity for autophagy in OSCC.
Keywords: autophagy; squamous cell carcinoma; oral neoplasms.
FOL • Faculdade de Odontologia de Lins/Unimep • 25(2) 31-40 • jul.-dez. 2015
ISSN Impresso: 0104-7582 • ISSN Eletrônico: 2238-1236
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Marayza Alves Clementino et al.
Introdução
O carcinoma de células escamosas
representa aproximadamente 90% de todas as
malignidades que acometem a cavidade oral.
Esta neoplasia maligna apresenta uma maior
prevalência em homens e está associada a
vícios, como uso do fumo e álcool, má higiene
bucal, fatores dietéticos e mastigação de betel.1
O tratamento do carcinoma de células
escamosas oral (CCEO) inclui cirurgia,
radioterapia, quimioterapia ou a combinação
destas. Apesar dos avanços no tratamento do
CCEO, a taxa de sobrevivência de cinco anos
para esta lesão é consideravelmente menor do
que para outras neoplasias malignas, como os
cânceres de colo do útero e de mama.2 Além disso,
ainda há uma falta de marcadores biológicos
para a detecção precoce do CCEO e, em muitos
casos, esta lesão apresenta resistência às
drogas disponíveis para quimioterapia. Neste
sentido, pesquisas têm sugerido que a análise
dos perfis de expressão de moléculas-chave
envolvidas nas vias de sobrevivência das células
tumorais pode ter uma grande importância para
o entendimento do comportamento biológico
da lesão e para a determinação do prognóstico
destes pacientes.3-5
Estudos apontam para a importância da
autofagia na regulação do desenvolvimento e
progressão de diversas neoplasias malignas,
incluindo o CCEO, e na determinação da
resposta à terapia anticâncer.3,4 A autofagia é um
sistema de degradação intracelular em massa
que desempenha várias funções fisiológicas,
tais como desenvolvimento, diferenciação e
manutenção de homeostasia celular.6
A autofagia é multifacetada e nem sempre
constitui um mecanismo de proteção. Em
tumores estabelecidos, a autofagia pode
atender à elevada demanda de nutrientes de
células neoplásicas em proliferação e pode
permitir a sobrevivência da célula maligna à
radioterapia, quimioterapia e terapia hormonal.7
Por outro lado, em decorrência de sua regulação
positiva durante a interação entre células
dendríticas e células T CD4+, influenciando
a ativação das células T, a autofagia pode
32
estimular a imunidade antitumoral. Sendo
assim, compreender o papel da autofagia no
desenvolvimento e progressão do câncer pode
contribuir para a melhoria dos paradigmas
atuais do tratamento antineoplásico.8
Dessa forma, este trabalho tem como
objetivo realizar uma revisão de literatura sobre
o processo de autofagia, suas características
gerais, as vias seletivas, proteínas relacionadas
e seu papel em relação ao CCEO.
Método
Foi realizada a busca eletrônica de
publicações nas bases de dados Web of
Science, PubMed e Scopus utilizando-se as
seguintes palavras-chave, obtidas de acordo
com o Medical Subject Headings (MeSH):
câncer, câncer bucal, autofagia, proteínas
relacionadas à autofagia e carcinoma de células
escamosas oral, usando o operador booleano
“AND”. Foram adotados como critérios de
inclusão dos estudos: a) artigo sobre a autofagia
e as proteínas relacionadas com este processo,
que tratasse de aspectos conceituais e/ou
relacionados com a participação da autofagia
no desenvolvimento/progressão do câncer e
do CCEO, b) artigo divulgado no período de
janeiro de 2001 a fevereiro de 2015 e c) artigo
publicado na língua inglesa. Segundo os critérios
de inclusão e exclusão, realizou-se então a
seleção de 50 trabalhos. Após sua análise, 20
foram excluídos e, ao final, 30 artigos foram
selecionados para o presente estudo (Figura 1).
Revisão de literatura
Características gerais da autofagia
A palavra autofagia, com origem nos
termos gregos auto (próprio) e fagia (comer),
corresponde a um mecanismo intracelular
catabólico, no qual as células degradam seus
próprios componentes citoplasmáticos dentro de
seus lisossomos. Neste processo, elas regulam
seu volume e utilizam os produtos derivados
desta degradação para sua sobrevivência.6
Durante o processo de autofagia, surge uma
estrutura de membrana única, denominada
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Autofagia e sua relação com carcinoma de células escamosas oral
Figura 1: Fluxograma com a estratégia de busca da revisão de literatura
membrana de isolamento, que envolve porções
do citoplasma e organelas até que ocorra a fusão
das pontas de isolamento. Neste momento
ocorre a formação do autofagossomo, uma
estrutura esférica, de dupla membrana, com
cerca de 1 µm de diâmetro. O autofagossomo
funde-se com os lisossomos para degradar os
conteúdos sequestrados e a membrana interna
por meio de hidrolases lisossômicas. O tempo
de vida destas estruturas é curto (meia vida
de aproximadamente 8 minutos), em contraste
com outras organelas celulares.9
Existem pelo menos três tipos de autofagia
em células eucarióticas – macroautofagia,
microautofagia e autofagia mediada por
chaperona (AMC), que diferem quanto ao modo
de entrega do material a ser catabolizado pelo
lisossomo.10 O termo “autofagia” geralmente
indica macroautofagia, que é caracterizada
pela imersão do citoplasma e organelas em
estruturas de dupla membrana, denominadas
autofagossomos. O autofagossomo entrega o
material a ser catalisado para os lisossomos.10 Por
outro lado, na microautofagia, os componentes
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citosólicos podem ser levados diretamente
para o lisossomo por meio de invaginação da
membrana citoplasmática. A AMC, descrita
apenas em mamíferos, é caracterizada pela
entrega das proteínas de substrato para o
lisossomo, por meio da proteína Hsp70, membro
da família das proteínas de choque térmico de 70
quilodaltons, presente no citosol.11
Os aminoácidos, produtos finais da
degradação de componentes citosólicos,
podem ser reutilizados pela célula e atuam
como reguladores de retroalimentação negativa
para o processo de autofagia. A proteína
alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR) é
uma molécula-chave em vias de sinalização
de detecção de nutrientes, que participa na
regulação da autofagia. A inibição da mTOR
por rapamicina induz a autofagia mesmo em
células que foram cultivadas na presença
de aminoácidos.12 Além dos nutrientes,
alguns hormônios também desempenham
um papel no controle da autofagia. A insulina
inibe o processo, enquanto glucagons estão
relacionados à estimulação.9 Embora os sinais
hormonais possam ser integrados à via mTOR,
existe também a via dependente de proteína
Akt, que regula a autofagia e é dependente
de insulina, mas independente da rapamicina.
Tais achados sugerem a existência de múltiplas
vias de sinalização na regulação da autofagia.9
Proteínas relacionadas à autofagia
A autofagia é um processo evolutivamente
conservado e é coordenada finamente por um
grupo de genes, denominado família ATG. As
proteínas codificadas a partir destes genes
são necessárias para o correto funcionamento
das atividades específicas durante as etapas
do processo autofágico.7
O processo de iniciação da autofagia
envolve diversos membros da família de
proteínas Atg, dentre elas: Atg6 (Beclina-1),
Atg5 e Atg12. A formação do autofagossomo
envolve um sistema de conjugação no qual
a Atg12 é covalentemente ligada à Atg5 e
direcionada à membrana do autofagossomo.
Tal conjugação é mediada pelas enzimas
Atg7 e Atg10. Além disso, a proteína Atg8
sofre lipidação por Atg7 e, em consequência,
acopla-se à membrana do autofagossomo em
formação.13 É importante salientar que outras
proteínas são importantes na sinalização da
autofagia, modulando o processo autofágico
positiva ou negativamente12 (Figura 2).
Figura 2: Maquinaria molecular envolvida na formação do autofagolisossomo. A Beclina-1 faz parte de um complexo
fosfatidilinositol 3-quinases (PI3K) tipo III que inicia o processo de formação do autofagossomo. Dois sistemas
semelhantes à ubiquitina são necessários para a formação da membrana de isolamento: (I) acoplamento de LC3 à
fosfatidiletanolamina (PE) e (II) conjugação de Atg12 a Atg5 e Atg16L1. Os cinco aminoácidos C-terminais de LC3 (LC3-I
não conjugado) são clivados pela proteína Atg4, fase necessária para ligar a proteína à PE, após a ativação por Atg7
e ligação por Atg3, na membrana autofagossômica (LC3-II conjugado). De forma similar, as proteínas Atg7 e Atg10
promovem a união de Atg12 às proteínas Atg5 e Atg16L1. Em seguida, este complexo é direcionado à membrana externa
do autofagossomo em formação. Por fim, os autofagossomos fundem-se com os lisossomos para a degradação de seu
conteúdo
Fonte: Adaptado de Netea-Maier et al.14
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Autofagia e sua relação com carcinoma de células escamosas oral
A proteína mTOR é uma serina-treonina
cinase presente em dois complexos proteicos
citoplasmáticos: complexo mTOR insensível
à rapamicina (proteínas mTOR, GβL e Rictor)
e complexo mTOR sensível à rapamicina
(proteínas mTOR, GβL e Raptor). A principal
função da mTOR é atuar como sensor
dos níveis de ATP e aminoácidos, a fim de
coordenar o balanço e a disponibilidade de
nutrientes e o crescimento celular.12
Quando a autofagia e a síntese proteica são
ativadas, Akt fosforila a proteína mTOR no sítio
de ativação Ser2448 e, a partir desta primeira
fosforilação, mTOR realiza autofosforilação
da Ser2481. Uma vez ativada, mTOR inibe o
processo autofágico e ativa a proteína p70S6,
uma cinase ativada por sinalização mitogênica
requerida para o crescimento celular e
passagem pela fase G1 do ciclo celular.15
Além da mTOR, estudos citam a participação
da proteína cinase ativada por AMP (AMPK),
que é um complexo heterotrimérico composto
de uma unidade catalítica α e subunidades
regulatórias β e γ. A AMPK é ativada sob
condições de estresse de energia, baixos níveis
de ATP intracelular e/ou durante a hipóxia
e a privação de nutrientes. Esta proteína
responde ao estresse energético suprimindo o
crescimento celular e processos biossintéticos
por meio da inibição da via mTOR sensível à
rapamicina. A AMPK atua na fosforilação dos
produtos proteicos do gene supressor tumoral
TSC2 que, por sua vez, atuam na supressão
de mTOR, induzindo o processo autofágico.16
Outra proteína relacionada à autofagia é a
p53, que possui papel de supressora tumoral,
exercendo funções no reparo do DNA e na
parada do ciclo celular, bem como na indução
à apoptose e à senescência.17 O primeiro
estudo a sugerir uma relação desta proteína
com a modulação da autofagia foi realizado
por Feng et al.17 Este trabalho demonstrou que
a ativação da p53 desencadeia uma resposta
semelhante à privação de nutrientes, como a
ativação de AMPK e subsequente inativação
dos genes TSC1, TSC2 e mTOR.
Membros da família de proteínas BH3,
que abrange componentes com atividades
pró-apoptóticas e antiapoptóticas, têm sido
sugeridos como importantes moléculas
capazes de modular o processo de autofagia.
Neste contexto, merece destaque a proteína
Bcl-2. Pesquisas têm revelado que esta
molécula antiapoptótica exerce um importante
papel como inibidora da autofagia, ligandose diretamente à Beclina-1 e impedindo sua
ação pró-autofágica. Isto poderá ocorrer
quando a Bcl-2 estiver presente no retículo
endoplasmático, pois sabe-se que esta
organela é o maior reservatório de cálcio
celular, responsável pela síntese de lipídios
por modificações pós-transducionais e pelo
enovelamento de proteínas e, por estes
motivos, pode estar associado a uma maior
ocorrência de estresse oxidativo.18
A cadeia leve 3 da proteína 1 associada
a microtúbulos, conhecida como proteína
LC3, está presente no meio celular em duas
formas: LC3I (citosólica) e LC3II (ligada
ao autofagossomo durante a autofagia).19
A expressão da LC3II como um potencial
marcador de autofagia tem sido bastante
investigada. No entanto, a expressão de LC3II
não é aumentada significativamente em um
fluxo equilibrado de autofagia.19
Autofagia e câncer
Nos modelos experimentais de autofagia
deficiente, os tumores crescem mais
rapidamente, e este crescimento é ainda maior
por defeitos na apoptose.6 Estas evidências
sugerem que a autofagia é um mecanismo
supressor de tumor e que, em contrapartida,
a redução dos níveis autofágicos poderia
promover a tumorigênese. Além disso, a
autofagia é regulada negativamente pelas vias
fosfatidilinositol 3-cinase (PI3K)/Akt/mTOR e o
desenvolvimento neoplásico é frequentemente
iniciado através de mutações que aumentam a
sinalização por essas vias.6
Os mecanismos pelos quais a autofagia
é capaz de inibir a tumorigênese envolvem
a diminuição da capacidade de reduzir os
danos celulares, a diminuição da instabilidade
genômica e a diminuição do estresse
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Marayza Alves Clementino et al.
oxidativo, bem como a eliminação de proteínas
e organelas danificadas e a estimulação da
senescência induzida pela oncogênese. Por
outro lado, ao inibir o processo de apoptose
induzido pela falta de interações corretas
entre as células neoplásicas e a matriz
extracelular, estudos sugerem que a autofagia
pode contribuir para a tumorigênese e o
desenvolvimento de metástases.7
A autofagia mantém a sobrevivência de
células tumorais em resposta ao estresse
metabólico, com exceção dos processos de
necrose e inflamação, especialmente quando
a apoptose está inibida. A autofagia diminui a
massa mitocondrial por mitofagia (degradação
mitocondrial por autofagia) e reduz a
susceptibilidade das células à apoptose por
estímulos mitocondriais.20 Assim, pode-se
propor que as células tumorais induzem
a autofagia para sobreviver ao estresse
metabólico no microambiente tumoral e para
evitar a apoptose induzida por terapia. Por
outro lado, também foi sugerido que a autofagia
poderia funcionar como um mecanismo de
morte celular, especialmente em células
com defeitos na apoptose. A autofagia pode
apresentar efeitos diferenciados, dependendo
do tipo de célula ou alteração genética
associada, caracterizando-se como um
processo multifacetado.21
Autofagia e carcinoma de células
escamosas oral
O CCEO constitui um problema crítico de
saúde em todo o mundo.1 Naqueles casos
em que não é possível a realização de
ampla ressecção do tumor, a quimioterapia
tradicional tem sido utilizada. Todavia, ela pode
não atender às exigências em terapia clínica,
uma vez que o CCEO pode não responder
aos atuais agentes quimioterápicos em virtude
da resistência a múltiplas drogas (RMD) das
células tumorais.22 Neste sentido, a inibição da
autofagia poderia constituir-se em uma nova
estratégia potencial para reduzir a possibilidade
de RMD em CCEOs.
36
Em geral, quando há baixa disponibilidade
de fatores nutricionais e de crescimento,
a autofagia é ativada e contribui para a
manutenção da homeostase, por meio da
degradação de macromoléculas e organelas
danificadas ou desnecessárias, levando ao
fornecimento de energia para as células
neoplásicas malignas. A autofagia geralmente
serve como um mecanismo de proteção para
as células tumorais expostas aos fármacos
antineoplásicos.23
Estudos mais recentes investigaram a
expressão de proteínas da família Atg em
CCEO. Kapoor et al.3 investigaram a correlação
da expressão de Beclina-1, tanto no soro
como no próprio tumor, com características
clínico-patológicas de pacientes com CCEO. A
expressão do RNAm da Beclina-1 foi avaliada
em tumores e áreas normais de espécimes
cirúrgicos de 10 pacientes com CCEO por
reação em cadeia da polimerase (PCR) em
tempo real. A expressão do RNAm da Beclina-1
foi aproximadamente oito vezes mais baixa nos
tumores em comparação com o tecido normal
(p < 0,001). Os níveis séricos de Beclina-1
foram avaliados por ELISA e ressonância de
plasma de superfície (SPR). Os resultados
demostraram que a baixa expressão da
Beclina-1 pode desempenhar um papel
importante no desenvolvimento e progressão
do CCEO, possivelmente pela desregulação
da autofagia nas células tumorais.
A proteína LC3, essencial para a
formação do autofagossomo e indicador de
atividade autofágica, foi avaliada por imunohistoquímica em 90 casos de CCEO.24 Na
análise univariada, os autores encontraram
correlação significativamente positiva entre a
alta expressão desta proteína (n = 57; 63,3%)
e estádio clínico (p < 0,0001), tamanho do
tumor (p < 0,0001), envolvimento linfonodal (p
= 0,0003) e maior risco de morte (p < 0,0002).
Além disso, após análise multivariada, a
superexpressão da LC3 foi estatisticamente
associada a menores taxas de sobrevida (p =
0,0043). Para os autores, a alta expressão de
LC3 pode ser um indicador de mau prognóstico
em CCEO.
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Autofagia e sua relação com carcinoma de células escamosas oral
Tang et al.4 avaliaram a expressão da
proteína relacionada à autofagia 16 do tipo 1
(ATG16L1) em casos de CCEO e verificaram
sua associação com parâmetros clínicopatológicos. Por meio da imuno-histoquímica,
foi observada associação da alta expressão
desta proteína pelas células neoplásicas com
o maior tamanho dos tumores (p = 0,031),
metástase linfonodal regional (p = 0,004),
estadiamento clínico avançado (p = 0,001) e
grau histopatológico de malignidade (p = 0,038).
Adicionalmente, por meio da análise de Kaplan
Meier, verificou-se que a superexpressão de
ATG16L1 afetou significativamente a sobrevida
global (p = 0,020) e o tempo de recorrência (p =
0,031). Dessa forma, os autores sugeriram que
a expressão de ATG16L1 pode ser utilizada
como um biomarcador preditivo de fenótipo
mais agressivo em CCEOs.
Nomura et al.25 também investigaram a
expressão da proteína ATG16L1 em mucosa
oral normal, lesões potencialmente malignas
e CCEOs. A mucosa oral normal exibiu baixos
níveis de imunoexpressão de ATG16L1,
ao passo que as lesões potencialmente
malignas e os CCEOs apresentaram uma
forte expressão desta proteína, tanto em
células epiteliais como em células estromais.
Além disso, foi observada uma associação
significativa da alta expressão de ATG16L1 no
estroma tumoral com a invasão linfovascular
e a presença de metástase linfonodal. Para
os autores, a desregulação da ATG16L1
é um evento frequente e precoce durante
a carcinogênese oral e poderia afetar o
comportamento biológico dos CCEOs.
Weng et al.26 investigaram o papel da
Beclina-1 na progressão do carcinoma de
células escamosas de língua (CCEL). A
expressão de Beclina-1 foi detectada com PCR
quantitativo e Western Blot, por meio do estudo
com linhagens celulares de CCEL. Os autores
observaram que a expressão de Beclina-1
poderia aumentar os níveis de expressão de
LC3II, Atg4 e Atg5. Além disso, esse estudo
mostrou que a alta expressão de Beclina-1
inibiu a proliferação, migração e invasão
das células malignas, enquanto que a baixa
expressão promoveu efeitos contrários. Para
os autores, a Beclina-1 pode contribuir para
fenótipos malignos em linhagens celulares de
CCEL, podendo ser um alvo potencial para a
terapia gênica no câncer oral.
Recentemente, por meio de imunohistoquímica, Sakakura et al.5 avaliaram
a relação da expressão de proteínas
relacionadas à autofagia (LC3, Beclina-1
e p62/ SQTM1) com a infiltração de células
inflamatórias e com diversos parâmetros
clínico-patológicos em 74 casos de CCEO. A
expressão de LC3 e p62/ SQTM1 na região
de front invasivo foi fortemente correlacionada
com a infiltração de células T, enquanto que
a expressão de p62/ SQTM1 e Beclina-1
foi correlacionada com moléculas MHC de
classe I e de classe II, respectivamente.
Adicionalmente, os autores observaram uma
forte relação da expressão de LC3 pelas
células tumorais na região mais invasiva do
tumor com parâmetros clínicos desfavoráveis.
Para os autores, a correlação observada
entre a expressão de LC3 e p62/ SQTM1 e a
infiltração de células T sugere que o processo
de autofagia pode induzir a mobilização das
células do sistema imune para o tumor.
Discussão
A desregulação da autofagia já foi
identificada em diversas neoplasias malignas.
No entanto, o papel deste mecanismo
intracelular catabólico, que pode tanto promover
a morte quanto a sobrevivência celular, ainda
não é completamente compreendido nestas
lesões.3,4,20,21,24 Apesar de promissor, o estudo
da autofagia em CCEO aplicada à terapia
desta neoplasia maligna permanece em seus
estágios iniciais.
Alguns estudos avaliaram a expressão
imuno-histoquímica de proteínas relacionadas à
autofagia em CCEO, tais como LC3, Beclina-1
e p62.3,5,24,26,27 No entanto, os resultados
apresentados são controversos. Kapoor et
al.,3 Tang et al.,4 Tang et al.,2 Weng et al.26 e
Sakakura et al.5 mostraram que a alta expressão
destas proteínas pelas células tumorais está
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Marayza Alves Clementino et al.
correlacionada com parâmetros clínicos
desfavoráveis, como menor tempo de sobrevida
e recidiva do CCEO. Em contrapartida, Wang et
al.27 encontraram associação estatisticamente
significativa entre a baixa expressão de
Beclina-1 e o maior tamanho dos tumores,
estágios clínicos mais avançados e menor grau
de diferenciação celular em CCEL. Em conjunto,
tais achados sugerem que a desregulação da
atividade autofágica pode desempenhar um
papel importante no processo de progressão
tumoral em CCEOs.
Outros resultados conflitantes têm sido
evidenciados em estudos realizados com o
objetivo de analisar possíveis relações entre
a expressão de Beclina-1, um importante
mediador da autofagia, e o prognóstico em
CCEO. Tang et al.28 encontraram associação
estatisticamente significativa da expressão
de Beclina-1 com o grau de malignidade do
tumor e a metástase linfonodal regional em
casos de CCEO. Em contrapartida, Kapoor
et al.3 não encontraram correlações entre
os níveis séricos de Beclina-1 e parâmetros
clínicos, como estágio clínico, envolvimento
linfonodal e tamanho do tumor. Todavia, os
autores não descartam a possibilidade de a
Beclina-1 estar envolvida no desenvolvimento
e na progressão do CCEO.
As divergências entre os resultados das
pesquisas descritas anteriormente podem
estar relacionadas a diferenças metodológicas,
como a região tumoral avaliada. Os tumores
malignos são caracterizados como lesões
estruturalmente heterogêneas, especialmente
quando comparadas às regiões do cório e do
front invasivo. Sakakura et al.5 não observaram
diferenças significativas na expressão de
proteínas relacionadas à autofagia entre o
centro e front invasivo em casos de CCEO.
Por outro lado, relataram que os resultados
mais importantes foram obtidos na região de
front invasivo. Estes autores encontraram uma
forte associação da expressão da proteína
LC3 pelas células tumorais do front invasivo
com a alta expressão de Ki-67, com fatores
prognósticos desfavoráveis, como estágios
clínicos mais avançados e maior tamanho dos
38
tumores, e com menores índices de sobrevida
global.
Outros autores sugerem que a ATG16L1,
uma proteína essencial para a formação
do autofagossomo, pode ser usada como
um marcador preditivo do comportamento
biológico mais agressivo em casos de
CCEO.4,25 Tang et al.4 encontraram associação
entre a alta expressão da ATG16L1 e estádios
clínicos mais avançados, maior tamanho dos
tumores, presença de metástase linfonodal
regional, menor tempo de sobrevida e maiores
taxas de recorrência. De forma similar,
Nomura et al.25 encontraram associação
estatisticamente significativa entre a alta
expressão de ATG16L1 no estroma tumoral,
a invasão linfovascular e a presença de
metástase linfonodal em casos de CCEO.
Avanços recentes sobre a compreensão dos
processos moleculares que contribuem para a
autofagia têm fornecido uma maior percepção
sobre a relação deste processo com a apoptose.
Evidências têm sugerido que a autofagia
apresenta um papel citoprotetor em condições
fisiologicamente relevantes.29 Tal condição
é mediada, em muitas circunstâncias, pela
modulação negativa da apoptose. A despeito
desses achados, Jiang et al.29 estimularam
a autofagia por meio do esgotamento de
nutrientes em linhagens celulares de CCEO
e mensuraram este processo por meio da
avaliação dos níveis de Beclina-1, LC3, p62 e
GFP-LC3. Após ensaio de viabilidade celular,
citometria de fluxo e Western Blot, os autores
encontraram uma correlação negativa entre
a autofagia e a apoptose, ou seja, quando os
índices autofágicos diminuíam, os valores
referentes à apoptose e à morte celular
aumentavam. Para os autores, os inibidores
de autofagia devem ser investigados como
um novo agente terapêutico para o tratamento
adjuvante do CCEO.
Contudo, com base nos estudos existentes,
ainda não é possível afirmar que o esgotamento
de nutrientes a fim de estimular a autofagia
será uma estratégia antineoplásica útil para
o CCEO. Em carcinomas metastáticos de
pele, verificou-se que tal estratégia depende
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Autofagia e sua relação com carcinoma de células escamosas oral
primeiramente da existência de um limiar
entre a morte celular e a autofagia. Além
disso, o sucesso da erradicação das células
neoplásicas malignas pela estimulação da
autofagia exigirá que o limiar da morte celular/
autofagia seja ultrapassado. Uma estratégia
de quimioterapia que estimule a autofagia
pode ser mais adequada para os tumores com
um limiar baixo de morte celular/autofagia.30
Em contrapartida, a inibição da autofagia
tem sido apresentada como um caminho
promissor para a erradicação das células
neoplásicas malignas. Aumentos dos níveis
de autofagia são quase sempre observados
como consequência do tratamento anticâncer
e são estudados por serem associados com
resistência às drogas antineoplásicas.23 Devese reconhecer, no entanto, que a supressão
crônica de autofagia pode estimular a
tumorigênese por promover o acúmulo de
danos induzidos por espécies reativas de
oxigênio e a instabilidade genômica.7
Conclusão
A autofagia é um processo que pode estar
envolvido no desenvolvimento e progressão
do CCEO. Os resultados apresentados pelos
trabalhos existentes na literatura sobre o assunto
são divergentes, ora sugerindo uma função prótumoral ora uma atividade antitumoral para a
autofagia nos CCEOs. Dessa forma, pesquisas
ainda são necessárias para esclarecer o
papel da autofagia nos CCEOs e verificar
se a modulação deste processo intracelular
catabólico pode constituir uma estratégia
terapêutica alternativa para estas lesões.
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Submetido em: 01/04/2015
Aceito em: 25/09/2015
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