hepatite b
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HEPATITE B INTRODUÇÃO À PATOLOGIA O vírus da Hepatite B (VHB) é o agente etiológico da Hepatite B vírica, uma das doenças infecciosas mais frequentes a nível mundial. A infecção aguda pelo VHB pode ter uma apresentação variável desde uma hepatite subclínica, a uma hepatite anictérica, hepatite ictérica e hepatite fulminante. A fase crónica pode ser traduzida por um estado de portador assintomático, hepatite crónica, cirrose e carcinoma hepatocelular. Quando um doente está sob terapia, a eficácia da mesma no controlo da replicação viral, vai reflectir-se na quantidade de vírus circulante no organismo do doente, pelo que a sua monitorização se reveste de elevada importância. Por outro lado, o uso prolongado de alguns antivirais pode levar ao desenvolvimento de resistências à terapia prescrita. Este facto eleva o risco de mortalidade e morbilidade associadas a patologias hepáticas provocadas por um controlo deficiente da infecção, sendo importante nestes casos a detecção precoce de mutações de resistências no genoma viral. O VHB pode ser classificado geneticamente em 8 genótipos (A a H) que têm uma distribuição geográfica característica. O genótipo A é o mais comum na Europa Ocidental, mas na área mediterrânica em particular o genótipo D é o mais frequente. Em Portugal, a distribuição genotípica do VHB coincide com a da área mediterrânica sendo o genótipo D o mais frequente, seguido pelos genótipos A e E. HEPATITE B CARGA VÍRICA DO VHB Nome do teste • Carga vírica do vírus da Hepatite B (VHB) Relevância clínica do teste • Para monitorização da terapêutica prescrita ao doente e controlo da progressão da doença • Importante na fase pré-terapêutica, uma vez que um valor superior a 100000 cópias de ADN do VHB/ml de plasma é considerado o valor limite a partir do qual se recomenda iniciar o tratamento Metodologia • Polimerase chain reaction (PCR) em tempo real Performance/limitações • Limite de quantificação inferior: 6 UI de ADN VHB/ml de plasma • Limite de quantificação Superior: 1X108 UI de ADN VHB/ml de plasma Requisitos da amostra • 3-5 ml de sangue total em tubo com anticoagulante EDTA (tampa roxa) • 2,5 ml de plasma Estabilidade/condições de transporte • Sangue total: 12 horas à temperatura ambiente ou refrigerado • Plasma: Congelação em gelo seco Razões para rejeição da amostra • Amostra incorrectamente identificada ou não identificada • Colheita num tubo com anticoagulante diferente de EDTA • Conservação de forma inadequada • Derrame da amostra devido a acondicionamento incorrecto • Tempo que medeia entre a colheita e a chegada da amostra superior a 12 horas no caso de envio de sangue total Tempo de resposta 10 dias úteis Código(s) para emissão de Termo de Responsabilidade • SNS026325 HEPATITE B GENOTIPAGEM DO VHB Nome do teste • Genotipagem do vírus da Hepatite B (VHB) Relevância clínica do teste • Resistências: surgem mais precocemente contra a lamivudina e são mais frequentes nos genótipos A do que nos D • Desenvolvimento de CHC: o genótipo 1 apresenta um risco 4,5X maior de desenvolver CHC do que os restantes • Taxas de seroconversão de AgHBe: seroconversão espontânea mais precoce em genótipos B do que C, após 1, 3 e 5 anos de seguimento • Taxas de progressão da doença: B menor taxa do que C - os doentes B têm menor taxa de AgHBe positivo e cargas víricas mais baixas • Remissão sustentada: ALT persistentemente normais e desaparecimento do AgHBs mais frequente no genótipo A do que no genótipo D • Ocorrência de hepatites fulminantes: o genótipo D parece ser mais frequente nos casos fulminantes • Resposta à terapia: menor taxa de resposta ao IFN alfa e INF alfa peguilado e maior taxa de recaída após descontinuação da lamivudina por parte dos genótipos C e D do que dos A e B Metodologia • Amplificação do genoma do vírus por polimerase chain reaction (PCR), sequenciação e análise filogenética Performance/limitações • Limite de detecção: 10 UI de DNA de VHB/ml de plasma Requisitos da amostra • 3-5 ml de sangue total em tubo com anticoagulante EDTA (tampa roxa) • 1 ml de plasma Estabilidade/condições de transporte • Sangue total: 12 horas à temperatura ambiente ou refrigerado • Plasma: Congelação em gelo seco HEPATITE B GENOTIPAGEM DO VHB Razões para rejeição da amostra • Amostra incorrectamente identificada ou não identificada • Colheita num tubo com anticoagulante diferente de EDTA • Conservação de forma inadequada • Derrame da amostra devido a acondicionamento incorrecto Tempo de resposta 10 a 20 dias úteis Código(s) para emissão de Termo de Responsabilidade • SNS026323 HEPATITE B RESISTÊNCIAS DO VHB AOS ANTIVIRAIS Nome do teste • Resistências do vírus da Hepatite B (VHB) aos antivirais Relevância clínica do teste • Permite reajustar ou alterar a terapia prescrita, quando a monitorização da infecção evidencia que não há o controlo esperado da replicação viral Metodologia • Amplificação por polimerase chain reaction (PCR) do domínio da DNA polimerase do gene pol, seguida de sequenciação directa Performance/limitações • Limite de detecção: 10 UI de DNA de VHB/ml de plasma Requisitos da amostra • 3-5 ml de sangue total em tubo com anticoagulante EDTA (tampa roxa) • 1 ml de plasma Estabilidade/condições de transporte • Sangue total: 12 horas à temperatura ambiente ou refrigerado • Plasma: Congelação em gelo seco Razões para rejeição da amostra • Amostra incorrectamente identificada ou não identificada • Colheita num tubo com anticoagulante diferente de EDTA • Conservação de forma inadequada • Derrame da amostra devido a acondicionamento incorrecto Tempo de resposta 10 a 20 dias úteis Código(s) para emissão de Termo de Responsabilidade • SNS026343 HEPATITE C INTRODUÇÃO À PATOLOGIA O vírus da Hepatite C (VHC) é o agente etiológico da Hepatite C e pode conduzir a cirrose hepática, insuficiência hepática terminal e carcinoma hepatocelular. A presença de anticorpos contra o VHC, por si só, não é indicadora de infecção, uma vez que por vezes a infecção resolve-se sem que o doente tenha consciência de que foi infectado e os anticorpos podem permanecer presentes no organismo durante vários anos. Por outro lado, há situações raras de infecção activa em que o organismo do doente falha na produção de anticorpos contra o vírus. Quando há suspeita de infecção com VHC é importante pesquisar directamente a presença do ARN viral no organismo do doente. Quando um doente está sob terapia, a eficácia da mesma no controlo da replicação viral, vai refletir-se na quantidade de vírus circulante no organismo do doente, pelo que a sua monitorização se reveste de elevada importância. Actualmente, é do conhecimento geral que vírus da Hepatite C de diferentes genótipos estão associados a diferentes respostas à terapia standard (Interferão+Ribavirina). Por este motivo, genotipar o vírus que circula no organismo do doente reveste-se da maior importância para a decisão do esquema terapêutico a aplicar. HEPATITE C CARGA VÍRICA DO VHC Nome do teste • Carga vírica do vírus da Hepatite C (VHC) Relevância clínica do teste • Para monitorização da terapêutica prescrita ao doente e controlo da progressão da doença Metodologia • Polimerase chain reaction (PCR) quantitativo em tempo real Performance/limitações • Limite de quantificação inferior: 25 UI de ARN VHC/ml de plasma • Limite de quantificação superior: 3,91x108 UI de ARN VHC/ml de plasma Requisitos da amostra • 3-5 ml de sangue total em tubo com anticoagulante EDTA (tampa roxa) • 2,5 ml de plasma Estabilidade/condições de transporte • Sangue total: 6 horas à temperatura ambiente ou refrigerado • Plasma: congelação em gelo seco Razões para rejeição da amostra • Amostra incorrectamente identificada ou não identificada • Colheita num tubo com anticoagulante diferente de EDTA • Conservação de forma inadequada • Derrame da amostra devido a acondicionamento incorrecto • Tempo que medeia entre a colheita e a chegada da amostra superior a 6 horas no caso de envio de sangue total Tempo de resposta 10 dias úteis Código(s) para emissão de Termo de Responsabilidade • SNS026324 HEPATITE C PESQUISA DO ARN DO VHC Nome do teste • Pesquisa do ARN do vírus da Hepatite C (VHC) Relevância clínica do teste • A pesquisa directa do vírus através da detecção do seu ARN permite confirmar a presença do vírus no organismo de um doente em caso de suspeita de infecção, quer devido a serologia positiva, quer devido a outros resultados laboratoriais (ex: bioquímicos) ou sintomalogia suspeitos Metodologia • Amplificação por transcrição reversa e polimerase chain reaction (PCR) em tempo real Performance/limitações • Limite de detecção: 37 UI de ARN viral/ml de plasma Requisitos da amostra • 3-5 ml de sangue total em tubo com anticoagulante EDTA (tampa roxa) • 2,5 ml de plasma Estabilidade/condições de transporte • Sangue total: 6 horas à temperatura ambiente ou refrigerado • Plasma: congelação em gelo seco Razões para rejeição da amostra • Amostra incorrectamente identificada ou não identificada • Colheita num tubo com anticoagulante diferente de EDTA • Conservação de forma inadequada • Derrame da amostra devido a acondicionamento incorrecto • Tempo que medeia entre a colheita e a chegada da amostra superior a 6 horas no caso de envio de sangue total Tempo de resposta 10 dias úteis Código(s) para emissão de Termo de Responsabilidade • SNS026320 HEPATITE C GENOTIPAGEM VHC Nome do teste • Genotipagem do vírus da Hepatite C (VHC) Relevância clínica do teste • Essencial para decidir qual o esquema terapêutico de Interferão+Ribavirina a prescrever a um doente, uma vez que os genótipos 1 e 4 respondem mais dificilmente a esta terapia do que os genótipos 2 e 3 Metodologia • Amplificação por transcrição reversa e polimerase chain reaction (PCR) seguido de hibridação inversa Performance/limitações • Detecta genótipos virais diferentes se existir uma infecção múltipla na amostra Requisitos da amostra • 3-5 ml de sangue total em tubo com anticoagulante EDTA (tampa roxa) • 2,5 ml de plasma. Estabilidade/condições de transporte • Sangue total: 6 horas à temperatura ambiente ou refrigerado • Plasma: congelação em gelo seco Razões para rejeição da amostra • Amostra incorrectamente identificada ou não identificada • Colheita num tubo com anticoagulante diferente de EDTA • Conservação de forma inadequada • Derrame da amostra devido a acondicionamento incorrecto • Tempo que medeia entre a colheita e a chegada da amostra superior a 6 horas no caso de envio de sangue total Tempo de resposta 10 dias úteis Código(s) para emissão de Termo de Responsabilidade • SNS026321
