VIGILÂNCIA LABORATORIAL DO VÍRUS INFLUENZA E OUTROS VÍRUS RESPIRATÓRIOS NO PARANÁ AVANÇOS E DESAFIOS MARIA DO CARMO DEBUR Laboratório de Biologia Molecular LACEN/PR VIGILÂNCIA LABORATORIAL VÍRUS RESPIRATÓRIOS - PR • INICIOU EM 2000 • UNIDADES SENTINELAS – SÍNDROME GRIPAL • IMUNOFLUORESCÊNCIA INDIRETA • • • • • • • INFLUENZA A INFLUENZA B PARAINFLUENZA TIPO 1 PARAINFLUENZA TIPO 2 PARAINFLUENZA TIPO 3 ADENOVÍRUS VÍRUS SINCICIAL RESPIRATÓRIO POSITIVAS ENVIADAS À FIOCRUZ/RJ 2009 – PANDEMIA INFLUENZA A/H1N1pdm2009 - Lacen/PR Treinamento FIOCRUZ/RJ - Implantou a metodologia molecular em Julho 2009 - Pesquisa do vírus Influenza A e subtipagem em H1N1pdm2009 http://www.who.int/csr/resources/publications/swineflu/CDCRealtimeRTPCR_SwineH1Assay2009_20090430.pdf SÍNDROME RESPIRATÓRIA AGUDA GRAVE (SRAG) • COLETA SWAB OROFARINGE E NASOFARINGE Resultado Pesquisa Influenza A – SRAG Lacen/PR n= 14.042 n= 3.540 NEGATIVO n=3.226 (91%) FLU A H1N1 pdm 2009 n=5.606 (40%) NEGATIVO n=7.321 (52%) FLU A H1N1 pdm 2009 n=182 (5%) FLU A sazonal n=132 (4%) FLU A sazonal n=1.115 (8%) 2009 2010 PROJETO PILOTO • 2011 • Monitoramento dos vírus respiratórios em Síndromes Respiratórias Agudas • Comitê de Ética CAAE: 02840312.3.0000.0095 Aprovado Nº Parecer: 75087 • Lacen/PR Escolha da metodologia para diagnóstico laboratorial: Imunofluorescência indireta (IFI) x Metodologia Molecular (PCR) PROJETO PILOTO Resultados da Pesquisa de Influenza A e Outros Vírus Respiratórios (2011) n= 2.136 Positividade (fluA+RV12) 350 NEGATIVO 49% Número de amostras 300 250 AdV 5% 200 hRV 14% 150 100 50 0 J F M A M J J A S O N D M es 14,2% Influenza A 36,8% Outros VR FLU A sazonal 14% FLU A H1N1 PIV pdm 2009 hMPV hCoV FLU B 3% 0,2% 1% 3% 2% Fonte: Gerenciador de Ambiente Laboratorial RSV 9% 2012 • Implantação da Detecção do Vírus INFLUENZA B • Implantação da Subtipagem do Vírus Influenza A em: - Influenza A H3 Sazonal - Influenza A H1 Sazonal - Influenza A/H1N1 pdm 2009 2013 • Janeiro 2013 – Lacen/PR Treinamento Fiocruz/RJ no Protocolo CDC para detecção Outros vírus Respiratórios - Influenza A (FluA H1N1 pdm 2009, FluA H3 sazonal, FluA H1 sazonal) - Influenza B - Adenovírus - Metapneumovirus humano - Vírus Sincicial Respiratório - Rinovírus - Parainfluenza tipo 1 - Enterovirus - Parainfluenza tipo 2 - Parainfluenza tipo 3 10 reações/amostra (Singleplex) 44 pacientes/placa • A partir de abril de 2013 Diagnóstico Molecular • 2013 e 2014 Validação do Protocolo Multiplex 5 reações/amostra 72 pacientes/placa - Influenza A (FluA H1N1 pdm 2009, FluA H3 sazonal, FluA H1 sazonal) - Influenza B - Adenovírus - Rinovírus - Vírus Sincicial Respiratório - Bocavírus humano - Parainfluenza tipo 1 - Coronavírus 229E - Parainfluenza tipo 2 - Coronavírus NL63 - Parainfluenza tipo 3 - Coronavírus OC43 - Metapneumovirus humano - Coronavírus HKU1 - Vigilância Epidemiológica de Influenza e Outros Vírus Respiratórios • Diagnóstico Diferencial dos Casos de Síndrome Respiratória Aguda Grave (SRAG), notificados no SINAN • Amostras do SIVEP-Gripe (Portaria nº 2693 de 17/11/11 republicada em 26/04/12) SÍNDROME GRIPAL SÍNDROME RESPIRATÓRIA AGUDA GRAVE (SRAG) RESULTADOS 2015 7.024 Amostras PROGRAMAS 2015 n=2045 n=4516 n=451 RESULTADOS 2016 1.626 Amostras até 11/04/2016 PROGRAMAS 2016 (até 11/04/2016) n=339 n=1222 n=59 QUALIDADE DAS AMOSTRAS Positividade por dias com sintomas Número de amostras 3000 Positivos Negativos 2000 1000 0 3 0- as i d 7 4- as i d Dias com sintomas >7 as i d TEMPO SINTOMAS ATÉ COLETA POSITIVIDADE POR REGIONAL SELEÇÃO DE AMOSTRAS PARA FIOCRUZ/RJ 5 5 5 15 10 10 10 10 15 5 5 5 CRITÉRIOS PARA SELEÇÃO CRITÉRIOS PARA SELEÇÃO • • • • • • • • Casos de óbitos. Casos inconclusivos Amostragem de surtos Casos de pacientes com SRAG com uso de oseltamivir até 2 dias após o início dos sintomas Pacientes entre 2 a 65 anos Trabalhadores de avicultura e suinocultura Amostras com Ct para Influenza A e B ≤30 Pacientes vacinados recentemente PERSPECTIVAS PARA 2016 • Subtipagem Influenza B OBRIGADA!!! CONTATOS: Maria do Carmo Debur [email protected] Irina N. Riediger Mayra M. P. Giacomini Alix Mazzetto LACEN/PR: (41) 3299-3203