Caracterização da maturidade fisiológica de sementes de cucurbitaceas pelos testes de tetrazólio e raios-X. Warley M. Nascimento1; Raquel A. Freitas1; Caroline J. Costa1; Roseane S. Pereira1; Denise C.F.S. Dias2; Maria Laene M. Carvalho3 1 Embrapa Hortaliças, C. Postal 218, 70359-970, Brasília – DF. e-mail:[email protected]; 2 Universidade Federal de Viçosa, 36.571-000 Viçosa MG, 3Universidade Federal de Lavras, C. Postal 37, 3700.200-000 Lavras MG. RESUMO Mudanças fisiológicas e morfológicas durante o desenvolvimento de sementes de cucurbitáceas têm sido avaliadas na Embrapa Hortaliças. Utilizou-se o híbrido F1 de Cucurbita maxima x C. moschata cv. Jabras como modelo para este estudo. Frutos foram colhidos aos 20, 30, 40, 50 e 60 dias após a antese e armazenados por períodos de 0, 15 e 30 dias. Avaliou-se a qualidade fisiológica das sementes através da massa de 100 sementes, germinação, primeira contagem e comprimento da radícula. O vigor e a viabilidade também foram avaliados pelo teste de tetrazólio, e amostras de cada tratamento foram submetidas ao teste de raios-x. A maturidade fisiológica das sementes ocorreu em frutos colhidos entre 40 e 50 dias após a antese e armazenados por 30 e 15 dias, respectivamente. Sementes desses frutos apresentaram maior vigor, germinação e massa seca. O teste de tetrazólio e as análises de raio-x foram eficientes em determinar a maturidade fisiológica e caracterizar o desenvolvimento das sementes. A análise radiográfica permitiu ainda a caracterização de quatro classes de sementes, de acordo com o desenvolvimento do embrião: cheio, acima de 50%, abaixo de 50% e vazio (sementes chochas). As principais mudanças morfológicas e fisiológicas durante o desenvolvimento das sementes de cucurbitáceas serão discutidas. Palavras-chave: Cucurbita maxima, C. moschata, C. melo, qualidade de sementes ABSTRACT. Characterization of cucurbit seed physiological quality by tetrazolium test and X-ray analysis The physiological and morphological changes during cucurbit seed development have been evaluated at Embrapa Vegetables. An F1- hybrid (Cucurbita maxima x C. moschata) cv. Jabras was used in this study as a model. Fruits were harvested at 20, 30, 40, 50 and 60 days after anthesis, and seeds were extracted after 0, 15 and 30 days of fruit storage. Dry seed weight, standard germination, germination at first count and root length were evaluated. Seed vigor and viability were also determined by tetrazolium test, and samples of each treatment were submitted to x-ray nondrestructive imaging. Seed physiological maturity occurred in fruits harvested between 40 and 50 days after anthesis and stored for 30 and 15 days, respectively. Seeds from these fruits had high vigor, seed germination and dry weight. The tetrazolium test and the x-ray analysis were efficient to determine the cucurbit seed physiological maturity and to show the seed development. The x-ray analysis also allows to characterize the seeds in four classes, according to the embryo development: full, above 50%, below 50% and empty. The major morphological and physiological changes during cucurbit seed development will be discussed. Keywords: Cucurbita maxima, C. moschata, C. melo, seed quality INTRODUÇÃO A obtenção de sementes de alta qualidade fisiológica em hortaliças de frutos carnosos, como é o caso das cucurbitaceas, depende diretamente do estádio de maturidade que se apresenta o fruto por ocasião da colheita. As sementes dessas espécies podem ainda ser colhidas antes de atingirem o ponto de maturidade fisiológica, desde que os frutos permaneçam armazenados em condições de ambiente fresco e arejado por um determinado período para que as sementes completem a sua maturação dentro dos próprios frutos como em abóbora e pepino (Pedrosa et al., 1987; Barbedo et al., 1994,). No ponto de maturidade fisiológica, as sementes apresentam máximo teor de matéria seca e máxima germinação e vigor. Vários estudos têm sido realizados na Embrapa Hortaliças para verificar o efeito da idade e do período de armazenamento dos frutos de cucurbitaceas na qualidade fisiológica de sementes (Lima & Nascimento, 2003; Costa et al., 2006). O objetivo deste trabalho foi determinar, por meio dos testes de raios-x e tetrazólio a maturidade fisiológica de sementes de cucurbitaceas, tendo como modelo a abóbora híbrida. MATERIAL E MÉTODOS Utilizaram-se neste estudo sementes de abóbora híbrida interespecifica de Cucurbita maxima x C. moschata. Sementes de abobora 'Jabras' foram extraídas de frutos colhidos aos 20, 30, 40, 50 e 60 dias após a antese, e armazenados por 0, 15 e 30 dias antes da extração das sementes. Avaliou-se a qualidade fisiológica das sementes através da massa de 100 sementes, germinação, primeira contagem de germinação e comprimento da radícula. Determinou-se ainda o vigor e a viabilidade pelo teste de tetrazólio, avaliando-se individualmente os embriões externa e internamente, observando-se a coloração dos tecidos e a ocorrência de lesões nos cotilédones e eixo embrionário, de acordo com critérios estabelecidos por Barros et al. (2005). Amostras de cada tratamento foram ainda submetidas a um método não destrutivo de análise de imagem empregando raio-x, o qual permite maiores informações sobre o desenvolvimento do embrião e a morfologia interna das sementes. Amostras de 100 sementes de cada lote foram submetidas à radiação em intensidades de 45 kV por 25segundos. As sementes foram arranjadas em placas de isopor com 1 cm de espessura sobre filme MR 2000-1 Kodak e submetidas à radiação a uma distância de 35cm da fonte, em aparelho Faxitron- HP, modelo 43085-N. RESULTADOS E DISCUSSÃO A idade do fruto influencia a qualidade de sementes de cucurbitaceas, e o armazenamento dos frutos propicia uma melhoria da qualidade fisiológica das sementes (Lima & Nascimento, 2003; Costa et al., 2006). No presente trabalho, observou que a máxima germinação ocorreu entre 55 a 75 dias após a antese, incluindo o armazenamento dos frutos (Tabela 1). A maturidade fisiológica das sementes ocorreu em frutos colhidos entre 40 e 50 dias após a antese e armazenados por 30 e 15 dias, respectivamente. Sementes desses frutos apresentaram maior vigor, germinação e massa seca. Comparando com os resultados obtidos no teste de tetrazólio (Tabela 2), obtiveramse informações semelhantes, evidenciando que este teste pode ser utilizado com eficiência em estudos de maturação de sementes de cucurbitaceas. Barros et al. (2005), trabalhando com sementes de C. pepo, constataram que o teste de tetrazólio foi um método rápido e preciso para caracterizar a viabilidade e o vigor das sementes, apresentando correlação significativa com outros testes de avaliação da qualidade fisiológica. Uma alta correlação entre o desenvolvimento do embrião e a germinação foi ainda observada pelo raio-x (dados não apresentados). Quatro classes de sementes foram caracterizadas de acordo com o desenvolvimento do embrião: cheio, acima de 50%, abaixo de 50% e vazio. A análise de raio-X pode predizer a performance das sementes e permite a seleção de sementes de alta qualidade. LITERATURA CITADA BARBEDO CJ; NAKAGAWA J; BARBEDO ASC; ZANIN ACW. 1994. Influência da idade e do período de repouso pós-colheita de frutos de pepino cv. Rubi na qualidade fisiológica de sementes. Horticultura Brasileira 12: 118-124. BARROS DI; DIAS DCFS; BHERING, MC; DIAS, LAS; ARAÚJO EF. 2005. Uso do teste de tetrazólio para avaliação da qualidade fisiológica de sementes de abobrinha. Revista Brasileira de Sementes 27: 165-171. COSTA CJ; CARMONA R; NASCIMENTO WM. 2006. Idade e tempo de armazenamento de frutos e qualidade fisiológica de sementes de abóbora híbrida. Revista Brasileira de Sementes 28: 127-132. LIMA GP; NASCIMENTO WM. 2003. Influência da idade e armazenamento dos frutos na qualidade de sementes de melão cv. Eldorado 300. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE OLERICULTURA, 43. Horticultura Brasileira 21: 398. Suplemento 1. PEDROSA JF; OLIVEIRA GM; NETO FB; MONTEIRO MR. 1987. Influência da idade e armazenamento do fruto na produção e qualidade de sementes de Cucurbita maxima x moschata. Horticultura Brasileira 5: 15-17. Tabela 1. Média da massa de 100 sementes, germinação (%), primeira contagem (%) e comprimento da radícula (cm) de sementes híbridas de abóbora, provenientes de frutos colhidos aos 20, 30, 40, 50 e 60 dias após a antese (DAA) e armazenados por 0, 15 e 30 dias. Massa de 100 sementes Germinação Primeira Comprimento da (g) (%) contagem (%) radícula (cm) DAA ARMAZENAMENTO (dias) 0 15 30 0 15 30 0 15 30 0 15 30 20 11,7Bc* 13,0Bb 16,1Ab 0Aa 0Ab 10Ac 0Ab 0Ab 15Ab 0Bb 0Bd 1,4Ad 30 13,4Bc 17,3Aa 19,3Aa 0Ba 1Bb 46Ab 0Bb 0Bb 77Aa 0Bb 0Bd 2,9Ac 40 14,4Bbc 16,0ABa 17,8Aab 0Ba 52Aa 62Aab 0Bb 78Aa 89Aa 0Cb 50 16,9Aab 18,0Aa 18,9Aa 15Ba 67Aa 77Aa 15Bb 92Aa 95Aa 60 18,6Aa 18,9Aa 18,7Aab 31Ca 57Ba 78Aa 54Ba 87Aa 91Aa 3,0Bc 4,8Ab 1,0Cab 4,5Bb 6,2Aa 1,7Ba 6,6Aa 6,8Aa *Na linha, as médias seguidas da mesma letra maiúscula, e, na coluna, as médias seguidas da mesma letra minúscula não diferem entre si, pelo teste de Tukey, ao nível de 5% de probabilidade. Tabela 2. Média dos resultados da avaliação do vigor (%) e viabilidade (%) de sementes híbridas de abóbora provenientes de frutos colhidos aos 20, 30, 40, 50 e 60 dias após a antese (DAA) e armazenados por 0, 15 e 30 dias, pelo teste de tetrazólio. Vigor (%) DAA Viabilidade (%) ARMAZENAMENTO (dias) 0 15 30 0 15 30 20 0 0 35 0 0 50 30 0 0 65 0 1 78 40 1 59 80 1 83 93 50 10 81 79 22 97 86 60 39 72 75 62 92 90